流式细胞术样品制备技术PDF电子书下载

第一节 流式细胞术基本原理简介 1

一、概念 1

二、流式细胞术的工作原理 1

三、流式细胞术的特点 4

四、流式细胞术可测量的参数 4

五、影响流式细胞术定量分析的因素 5

六、狭缝扫描流式细胞计 6

第二节 流式细胞术的样品制备技术概论 8

一、酶学法 9

二、化学法 10

三、物理法 10

第三节 新鲜实体瘤组织单细胞悬液的制备 11

一、酶消化法 12

二、机械法 13

三、化学法 15

四、低渗组织液处理法 17

第四节 石蜡包埋组织单细胞悬液的制备 19

第五节 脱落细胞样品单细胞悬液的制备 24

第六节 血液单细胞样品的制备 27

一、淋巴细胞的制备 28

二、粒细胞的制备 32

三、单核细胞的制备 32

四、白血病细胞的制备 34

五、流式细胞术检测血中网织红细胞的样品制备 34

第七节 细胞培养及单细胞悬液的制备 38

一、细胞培养 38

二、单细胞悬液的制备 39

第八节 单细胞悬液的保存 42

一、深低温保存 42

二、70%乙醇或75%甲醇固定保存 44

三、其他固定剂保存 45

第九节 流式细胞术定量细胞学荧光染色技术 46

一、定量细胞学染色原理 46

二、定量荧光细胞染色技术的评价标准 48

三、定量DNA荧光染色技术 48

四、定量RNA荧光染色技术 53

第十节 影响定量细胞学荧光染色的因素 59

一、温度的影响 59

二、pH的影响 61

三、荧光染料浓度的影响 62

四、杂质对细胞荧光染色的影响 63

五、细胞固定剂对细胞荧光染色的影响 64

六、其他影响因素 65

第十一节 流式细胞术参考标准样品的制备 67

一、使用参考标准样品的意义 67

二、参考标准样品的性质 68

三、参考标准样品的制备 68

四、石蜡包埋肿瘤DNA倍体分析的二倍体参考标准样品的选择 75

第十二节 流式细胞术免疫学样品的制备 79

一、流式细胞术免疫学样品制备的基本原理和常用方法 80

二、流式细胞术检测造血系统恶性肿瘤细胞表面标记抗原的样品制备 81

三、流式细胞术检测癌基因蛋白及其它细胞内抗原的样品制备 89

四、流式细胞术进行抗细胞表面抗原的单克隆抗体制备的初筛 98

五、流式细胞术检测石蜡包埋组织细胞表面植物凝集素受体的样品制备 100

六、流式细胞术免疫荧光染色样品制备过程中一些人工假象的分析及处理 102

七、流式细胞术在其它方面的一些应用 104

第十三节 流式细胞术分析染色体组型的样品制备 108

第十四节 流式细胞酶学方法 113

一、流式细胞酶学方法的条件 114

二、用荧光底物可能测定的酶活性 115

三、常见的几种酶及其相应的荧光底物配方 115

四、酶活性检测的样品处理及注意事项 115

第十五节 流式细胞术定量检测雌激素受体的方法 117

第十六节 流式细胞术检测E-玫瑰花环实验方法 121

第十七节 流式细胞术检测血液红细胞感染疟原虫的方法 125

第十八节 流式细胞术鉴别死活细胞的PI荧光染色法 127

第十九节 荧光显微镜技术简介 130

一、基本原理 130

二、荧光显微镜的基本结构 132

三、荧光显微镜的使用方法 135

第二十节 用荧光显微术观察FITC和PI对固定细胞的蛋白和DNA的双染色 136

第二十一节 荧光显微术观察活细胞的线粒体和细胞核 138

第二十二节 实验溶液的配制 140

一、荧光染色液的配制 140

二、酶类溶液的配制 141

三、平衡盐溶液的配制 143

四、磷酸缓冲液的配制 144

五、细胞生长培养液的配制 146

六、其它溶液的配制 153

第二十三节 流式细胞仪的操作程序及注意事项 156