骨组织病理解剖学技术PDF电子书下载

第一章 骨及软骨的正常组织学 1

第一节 软骨组织 1

一、透明软骨 1

二、弹性软骨 2

三、纤维软骨 2

四、软骨的组织发生 2

五、软骨的退变 4

六、软骨的再生和移植 4

第二节 骨 4

一、骨组织 5

二、骨细胞 5

三、骨细胞间质 6

四、骨的组织结构 7

五、扁骨的组织结构 8

六、长骨的组织结构 8

七、骨组织的形成 10

八、骨组织的重吸收 11

九、骨细胞谱系 11

十、膜内成骨 12

十一、软骨内成骨 12

十二、骨是人体内的钙库 15

第三节 关节 16

第二章 骨科组织病理实验室基本设备及常用药品 17

第一节 仪器设备 17

一、切片机 17

二、自动脱水机 17

三、自动磨刀机 17

四、恒温箱和干燥箱 18

五、捞烤片机 18

六、冰箱 18

七、酸度计 18

八、天平 19

九、显微镜 19

十、显微照相机 19

十一、放大机 19

十二、一般手术器械 19

十三、电扇、电吹风、排气扇 19

十四、电炉 19

十五、真空泵 19

第二节 木器设备 20

一、切片柜 20

二、切片晾片柜 20

三、蜡块柜 20

四、药品柜 20

五、器械柜 20

六、工作台 20

七、标本陈列柜 20

第三节 切片、染色、配药用具 21

一、切片用具 21

二、染色用具 21

三、配药用具 21

四、常用药品 21

第四节 骨组织病理实验室的布置与要求 21

一、标本说明 22

二、各室布置介绍 22

第三章 骨组织的固定、脱水、透明、浸渍、包埋技术 26

第一节 骨组织的固定技术 26

一、骨组织的固定 26

二、常用固定剂 26

1.10%甲醛水溶液 26

2.80%乙醇 27

3.MuIler氏液 27

4.Zenker-甲醛固定液 27

5.Helly氏固定液 27

第二节 骨组织的脱水技术 28

一、骨组织的脱水 28

二、脱水方法 28

1.脱钙后骨组织的脱水 28

2.先固定后脱钙的骨组织脱水 28

3.先脱钙后固定的骨组织脱水 29

第三节 骨组织的透明技术 29

一、骨组织的透明 29

二、常用透明剂 30

1.二甲苯 30

2.甲苯 30

3.苯 30

4.香柏油 30

5.氯仿 31

6.苯甲酸甲酯 31

7.冬青油-苯甲酸甲酯 31

第四节 骨组织的浸渍和包埋技术 31

一、石蜡浸渍包埋技术 32

1.浸渍方法 32

2.包埋方法 32

二、火棉胶浸清包埋技术 33

三、塑料浸渍包埋技术 34

1.GMA浸渍包埋技术 34

2.TAAB环氧树脂浸渍包埋法 35

第四章 骨组织切片技术 36

第一节 切片刀 36

一、切片刀的种类和用途 37

1.平凹型刀 38

2.深平凹型刀 38

3.平楔型刀 38

4.双凹型刀 38

5.D型刀 38

二、切片刀的研磨 38

1.磨石 39

2.磨刀方法(“8”字磨刀法） 40

三、切片机 42

四、骨组织切片法 43

1.骨磨片技术 43

2.骨火棉胶包埋大切片技术 45

3.不脱钙骨的制片技术 45

第五章 骨的组织学染色技术 49

第一节 软骨组织的染色技术 49

一、透明软骨结构的显示 50

1.软骨细胞 50

2.软骨基质 52

3.汞溴酚蓝法示蛋白质 54

4.Von. Kossa氏法示钙质 54

二、弹性软骨结构的显示 54

1.碱性蓝B法 54

2.Verhoeff+V.G法 55

3.Triple-staining-Method三联染色法 55

三、纤维软骨结构的显示 56

1.MCT法 57

2.Pollak氏改良法 57

3.Luxol坚牢蓝G法 58

4.Romeis氏美蓝染色法 58

第二节 骨组织的染色技术 59

一、未脱钙骨的染色 59

1.可溶性钙的显示 59

2.不溶性钙质的显示 60

二、脱钙骨组织染色技术 63

1.苏木素-伊红法(HE法) 63

2.改良的V.G法 64

3.网织纤维染色法(Gomori法) 65

4.Lillie 氏硝酸银沉淀法 66

5.Schmorl氏硫紫-磷钨酸法 66

6.Schmorl 氏苦味酸-硫紫法 67

第六章 骨的病理学染色技术及应用 68

第一节 骨的病理学染色技术 68

一、糖原色技术 68

1.Best氏胭脂红法 69

2.Gomori氏银染法(Arzac与Flores改良法） 69

3.铬酸-雪夫氏反应(CAS) 70

4.过碘酸雪夫氏反应(PAS) 71

二、粘液染色技术 71

1.异染反应 72

2.阿新蓝染色技术 73

3.阿新蓝混合染色技术 74

三、网织纤维染色技术 76

1.Foot氏法 76

2.Gordon 及Sweet法 77

四、脂类的染色技术 78

1.苏丹染色 78

2.显示中性和酸性脂类的尼罗蓝法(Cain，1947) 79

3.锇酸染色法 80

五、结缔组织染色技术及肌肉杂色技术 80

1.Lillie氏猩红-苦味酸-苯胺蓝法 81

2.Schaffler氏三纤维同显法 81

3.PTAH法 82

4.Retterer氏法(显示横纹肌) 83

5.间苯二酚-碱性品红染色法(Hart氏改良) 83

6.弹性纤维-PAS阳性物质染色法 84

六、色素的显示技术 85

1.含铁血黄素的显示 85

2.黑色素的显示方法 86

七、浆细胞的染色技术(Unna-Pappenheim甲基绿-派若宁染色法 88

八、淀粉物的显示技术 89

1.硫代黄素T荧光染色法 89

2.Bennhole氏刚果红染色法 90

3.Wloman氏甲苯胺蓝法 90

4.King氏银浸染法 90

九、纤维素的染色技术 91

1.MSB法 91

2.Gram氏法 92

3.PTAH法 93

十、结核菌染色技术 93

1.Ziehl-Neesen快速染色法 93

2.金胺O-若丹明B荧光染色法 94

十一、痛风结晶的显示技术 94

1.明矾苏木素染色法 95

2.六胺银染色法 95

十二、髓鞘染色技术 96

1.正常髓鞘的Weil氏法 96

2.变性髓鞘的Marchi氏法 96

第二节 骨病理染色技术在诊断中的应用 97

一、染色技术在骨疾患特殊结构和物质显示上的应用 97

1.糖原、粘液物质的显示 97

2.网织纤维染色的应用 99

3.含铁血黄素染色的应用 99

4.其它物质的显示 101

二、染色技术在骨疾患鉴别诊断中的应用 101

1.网织纤维染色的应用 102

2.糖原、粘液染色的应用 103

3.脂肪染色的应用 103

4.其它染色的应用 104

第七章 骨组织病理染色切片质量问题的探讨 105

第一节 骨组织制片过程中易出现的问题 106

第二节 骨组织切片染色过程中易出现的问题 108

第三节 骨肿瘤标本冷冻切片易出现的问题 109

第八章 骨的细胞学技术 110

第一节 骨细胞学制片技术 111

一、涂片技术 111

二、印片技术 111

三、穿刺技术 111

第二节 染色技术 113

一、Weight氏法 113

二、leishman染色法 114

三、Giemsa快速染色法 115

第三节 常见恶性肿瘤细胞的形态 115

一、成骨肉瘤的细胞形态 115

二、软骨肉瘤的细胞形态 115

三、脊索瘤的细胞形态 116

四 、尤文氏肉瘤的细胞形态 116

五、骨巨细胞瘤的细胞形态 116

1.Ⅰ级骨巨细胞瘤的细胞形态 116

2.Ⅱ级骨巨细胞瘤的细胞形态 117

3.Ⅲ级骨巨细胞瘤(恶性)的细胞形态 117

第四节 骨肿瘤细胞化学和免疫组织化学 117

第九章 骨及软骨的酶组织化学技术 118

第一节 AKP的显示 120

一、Gomori氏法 120

二、偶氮偶合法 121

第二节 ACP的显示 121

一、Gomori氏法 121

二、后偶合技术 122

第三节 SDH的显示 123

第四节 ATP酶的显示 124

一、钙激活的ATP酶技术 124

二、镁激活的ATP酶技术 125

第十章 骨组织的脱钙技术 126

第一节 骨的锐钙方法 127

一、酸类单纯脱钙技术 128

1.甲酸单纯脱钙剂 128

2.硝酸单纯脱钙剂 128

3.盐酸单纯脱钙剂 129

4.三氯乙酸单纯脱钙剂 130

5.硫酸单纯脱钙剂 130

二、酸类混合脱钙技术 130

1.甲酸为主的混合脱钙剂 130

2.盐酸为主的混合脱钙剂 131

3.硝酸为主的混合脱钙剂 133

4.三氯醋酸为主的混合脱钙剂 134

5.缓冲混合脱钙剂 134

三、螯合剂脱钙技术 135

1.柠檬酸钠脱钙剂 136

2.乙二胺四乙酸(EDTA)脱钙剂 136

四、离子交换树脂脱钙技术 136

五、电解脱钙技术 136

1.电解脱钙原理 137

2.电解脱钙液 137

六、脱钙机脱钙技术 137

1.脱钙机原理 138

2.脱钙机的优点 138

第二节 骨脱钙其它技术问题的论述 138

一、脱钙方法的选择应用 138

1.脱钙方法的选择标准 138

2.脱钙方法的选择原则 139

3.优选脱钙法 139

二、骨脱钙技术程序 140

1.组织选择 140

2.固定 140

3.脱钙 140

4.酸的中和 141

5.水洗 141

三、脱钙“终点”的测定 141

1.物理检测法 141

2.X线照相技术 141

3.化学检测法 141

四、脱钙后处理 142

1.碱处理 142

2.酒精处理 142

3.水洗处理 142

五、骨组织脱钙应注意的问题 143

第十一章 骨穿刺标本的脱钙制片技术 144

一、目前现状及原因 144

二、具体操作方法 145

第十二章 骨组织的电子显微镜技术 146

第一节 电镜制片技术 147

一、固定 147

二、脱钙 148

三、脱水 148

四、包埋 149

五、切片 149

六、铜网和支持膜 149

七、制片程序 150

1.取材 150

2.前固定 150

3.脱钙 150

4.后固定 151

5.脱水 151

6.包埋 151

7.切片 152

8.染色 152

9.观察 153

第二节 骨的电镜酶组织化学技术 153

一、酸性磷酸酶技术 154

二、碱性磷酸酶技术 155

1.钙捕捉离子的用法 156

2.胞苷-磷酸作底物的用法 156

3.柠檬酸盐作螯合剂的用法 157

第三节 电镜在骨肿瘤诊断和研究中的作用 158

一、电镜在认识骨肿瘤成分性质中的作用 158

二、电镜在探讨骨肿瘤组织来源的中的作用 158

三、电镜对判断骨肿瘤良恶性的作用 159

四、电镜对探讨某些基础理论的作用 160

1.瘤细胞胞浆内空泡 160

2.瘤细胞内胶原形成 160

3.瘤细胞内纤毛形成 160

第四节 几种常见骨肿瘤的电镜观察结果 160

一、骨肉瘤 160

1.多核巨细胞 161

2.暗细胞 161

二、骨巨细胞瘤 161

1.多核巨细胞 161

2.基质细胞 161

三、骨原发性恶性纤维组织细胞瘤 162

1.纤维细胞样瘤细胞 162

2.纤维母细胞样瘤细胞 162

3.黄色瘤样或组织细胞样瘤细胞 162

4.纤维组织细胞 163

四、骨的纤维肉瘤 163

五、骨髓瘤 163

六、骨软骨瘤 163

七、软骨母细胞瘤 163

八、软骨肉瘤 164

第十三章 骨组织免疫组化技术 164

第一节 免疫组织化学基本方法 164

一、免疫酶标法的六种基本形式 165

1.直接法 165

2.间接法 165

3.间桥法 165

4.PAP法 165

5.A蛋白-PAP法 165

6.ABC法 165

二、免疫酶标法的染色步骤 165

1.冰冻切片染色法 165

2.石蜡切片染色法 167

第二节 骨肿瘤免疫组化的联合表达 168

一、骨肿瘤的概念及分类 169

1.原发性骨肿瘤 169

2.继发性骨肿瘤 169

二、免疫组织化学技术在骨肿瘤病理诊断中的应用 169

1.波形蛋白 169

2.细胞角蛋白 170

3.结蛋白 171

4.S-100蛋白 172

5.第八因子相关抗原(FVⅡ RAg) 172

6.组织细胞抗原 172

7.组织表面分子抗原在骨肿瘤鉴别诊断中的应用 172

8.Ⅰ型胶原 175

9.CEA(癌胚抗原) 175

10.骨肿瘤免疫组化诊断应用总表 179

11.骨小细胞性肿瘤的免疫组化鉴别诊断 179

第三节 骨免疫组化基本操作和注意事项 179

一、基本技术操作 179

1.试验计划 179

2.抗体稀释度 179

3.抗体滴加技术 180

4.PBS液洗涤法 181

5.孵育技术 181

6.蛋白酶消化 182

7.显色方法 183

二、免疫组化染色结果易出现 的错误情况 183

1.切片均为阴性 183

2.切片呈弱阳性 184

3.切片显示过度背景染色 184

4.试验切片呈弱阳性 184

5.试验片呈阴性 184

6.试验片背景污染 185

三、骨组织免疫组化的固定和制片技术 185

1.骨组织的固定 185

2.骨的脱钙处理 185

第十四章 骨的PCR基因扩增技术 185

第一节 PCR基因扩增的原理 186

第二节 PCR技术的基本设备 186

一、PCR扩增仪 186

1.最简单的热循环实验方法 186

2.采用自动化扩增仪法 187

二、微量取样器 187

三、移液器 188

四、试剂的配制、分装和保存 188

第三节 用石蜡切片制备样本的方法 188

一、骨组织PCR石蜡包埋标本的制备 189

二、二甲苯脱蜡提取法 189

三、水浴脱蜡抽提法 190

四、直接扩增法 191

五、骨PCR扩增技术中应注意的问题 191

六、对照实验 191

七、实验注意事项 192

第十五章 原位杂交技术 192

第一节 原位杂交技术的应用原理 193

第二节 原位杂交技术在组织病理学上应用的原理 193

一、DNA探针 193

二、DNA控针检测肿瘤标记物的基本原理 194

三、DNA探针原位杂交检测肿瘤标记物方法步骤 195

第三节 石蜡切片原位杂交方法步骤 195

一、操作步骤 195

1.组织片预处理 195

2.杂交 196

3.洗涤及显色 196

第十六章 骨骼标本的陈列技术 197

第一节 骨骼标本材料的收集 197

第二节 骨骼标本材料的处理 198

一、经防腐固定后的骨骼标本处理 198

1.加压蒸煮法 198

2.碱液浸泡法 199

3.药液浸煮法 199

4.活性酶洗涤剂加热浸泡法 199

二、腐?骨的处理 200

三、未经防腐固定处理的标本处理 200

1.人工浸蚀法 201

2.自然浸蚀法 202

第三节 骨骼标本的制作技术 203

一、脱脂 203

1.四氯化碳脱脂法 204

2.有机溶剂浸泡法 204

二、漂白 204

1.漂白粉和漂白精粉漂白法 205

2.过氧化氢漂白法 205

3.过氧化钠漂白法 205

三、表面处理 206

1.石蜡浸渍法 206

2.表面涂布法 206

四、骨标本的连接 207

1.弹簧纽结法 207

2.活动片连接法 207

3.双方向活动片连接法 208

4.钩环连接法 208

5.钩扣连接法 208

6.车轴连接法 208

7.其它连接法 209

五、骨骼标本的装配固定 209

六、整体骨架的串联 210

1.手骨的串联 210

2.足骨的串联 211

3.上肢骨的串联 212

4.下肢骨的串联 212

5.躯干骨的串联 212

6.颅骨的串联 215

七、活动骨标本的串联技术 215

1.指(趾 )骨的连接方法 215

2.脊柱的连接方法 215

3.椎肋的连接方法 216

4.活动骨架的连接方法 217

八、可移动手骨标本的串联技术 218

九、可移动足骨标本的串联技术 218

十、带有韧带和关节囊的可移动骨骼标本的串联技术 219

第四节 骨标本的加工技术 220

一、颅骨的分离 220

1.冲击分离法 220

2.干豆膨胀分离法 220

二、骨的锯切 220

1.颅颞骨切面的锯切法 221

2.其它骨的锯切法 221

第五节 骨透明标本的制作 222

一、胚胎骨骼透明标本的制作技术 223

1.Schultze法 223

2.?透明法 223

3.?法 223

二、胚胎骨骼染色透明标本的制做技术 224

1.茜素红染色法 224

2.硫酸铜浸染法 225

三、胚胎骨与软骨双重染色透明标本制做技术 225

1.茜素红-甲基绿双重染色法 225

2.茜素红-甲苯胺蓝双重染色法 226

四、骨空腔性内部结构的透明标本制做技术 227

1.内耳骨迷路透明标本 227

2.内耳膜述路透明标本 227

五、骨血管透明标本技术 228

第六节 显示骨结构和成分的标本制作技术 228

一、骨膜的显示 228

1.骨外膜 228

2.骨内膜 229

二、骨质的显示 229

三、骨髓的显示 229

四、骨化学成分的显示 229

1.有机质的显示 229

2.无机质的显示 230

第十七章 骨肿瘤标本制作技术 230

第一节 骨肿瘤标本的固定方法 231

第二节 骨肿瘤标本的剖面技术 231

一、检视和构思 231

1.步骤 232

2.原则 232

二、具体操作 233

第三节 骨肿瘤标本的放置和固定技术 236

一、基本方法和原则 236

二、具体操作 237

1.选择标本缸 237

2.框架制作 237

3.吊装固定 239

第四节 保存液的配制 241

一、常用保存液的配制 241

1.10%甲醛液 241

2.10%甲醛钙液 241

二、自然保色液 241

第五节 封缸与标签 242

一、封缸胶的配制 242

1.玻璃标本缸用胶 242

2.有机玻璃标本缸用胶 243

三、标签 243

二、封缸操作法 243

1.玻璃标本缸封存法 243

2.有机玻璃标本缸封存法 243

第六节 骨骼浸溃标本的制作技术 243

第七节 骨肿瘤薄片解剖标本的制作技术 244

一、制作方法和处理 245

二、显色和染色 246

三、薄片标本的H.E染色法 246

四、有机玻璃盒的制作 247

五、冲水槽的制作 247

六、冲水框的制作 248

第十八章 照相、冲洗及幻灯片制作技术 249

第一节 大体、显微摄影技术 249

一、大体标本拍摄技术 249

1.要求 250

2.原则 250

3.照明 250

4.照射角的运用 251

5.拍摄背景的布置 251

6.拍摄方法 252

二、显微摄影技术 252

1.简易显微照相装置应具备的条件 254

2.简易显微照相装置的基本构造 254

3.简易显微照相装置的装配原理 255

4.简易显微照相装置使用的感光材料 256

5.简易显微照相装置的曝光 256

6.简易显微照相装置的操作法 258

7.简易显微照相装置的理论问题 259

三、近距离照相技术 262

1.近距离照相的光学知识 262

2.近距离照相的曝光校正 264

3.照明与胶片 266

4.近距离照相的注意事项 268

第二节 胶片的冲洗 268

一、黑白负片的冲洗 268

1.微粒两液显影 268

2.菲尼酮强力微粒显影液 269

3.D-23显影液 269

二、彩色负片的冲洗 270

1.冲洗工艺 270

2.配方 270

第三节 照片的放大技术 272

一、黑白照片的制作 272

1.相纸 272

2.放大准备 273

3.放大操作 274

二、彩色照片的制作 274

1.彩色放大的主要设备 275

2.彩色放大的校色技术 276

3.彩色照片的放大程序(减色法) 276

4.冲洗彩色照片的配方及工艺 279

第四节 幻灯片的制作技术 281

一、黑白幻灯片的制作 281

1.翻拍技术 281

2.负正法制作黑白幻灯片 282

3.反转法制作黑白幻灯片 282

4.蓝底幻灯片的制作 284

二、彩色幻灯片的制作 286

第十九章 骨组织病理实验性技术 289

第一节 95%酒精穿入皮质骨速率的实验技术 290

一、实验(一) 291

1.材料 291

2.方法 291

二、实验(二) 292

1.材料 292

2.方法 292

3.结果 292

三、统计学意义 293

第二节 骨细胞和软骨细胞的组织化学实验技术 295

一、实验(一)骨细胞与软骨细胞的SDH显示 295

二、实验(二)SDH活性与形态学的关系 297

第三节 骨肿瘤病中抗人Ⅰ、Ⅱ型胶原抗体实验技术 299

一、材料和方法 300

1.Ⅰ型胶原的提取和纯化 300

2.Ⅱ型胶原的提取和纯化 300

3.三法鉴定 301

4.抗人Ⅰ、Ⅱ型胶原抗体的制备及鉴定 301

二、抗人Ⅰ、Ⅱ型胶原抗体在骨肿瘤病理研究中的应用 302

1.材料和方法 302

2.结果 302

3.软骨性肿瘤对抗Ⅰ型胶原抗体的免疫荧光反应 302

4.软骨性肿瘤对抗Ⅱ型胶原抗体的免疫荧光反应 302

三、本实验的意义 303

第四节 骨基质诱导异位骨形成实验模型的组织学和组织化学实验技术 304

一、材料和方法 304

1.动物 304

2.骨基质粉的制备 304

3.手术操作 305

4.组织切片 305

二、诱导性骨形成的组织化学定位 305

1.碱性磷酸酶(AKP)定位 305

2.酸性粘多糖定位 306

3.钙质沉着定位 306

三、实验结果 306

1.诱导性骨形成的间充质细胞增生期 306

2.软骨细胞分化期 307

3.软骨细胞退变期 307

4.骨形成期 307

第五节 实验家兔骨折愈合骨组织形态计量学实验技术 308

一、材料和方法 309

二、骨折模型不脱钙切片的制作 311

三、骨计量学测量方法及测定指标 313

四、骨组织形态测量学参数 315

1.静态组织学参数 315

2.动态组织学参数 316

五、结果 317

六、骨计量测量指标、公式及单位 320

第六节 未脱钙骨酶组织化学实验性新技术——家兔桡骨骨折模型低温塑料切片 322

一、材料 323

二、固定、脱脂、脱水 323

三、浸透 323

四、包埋 323

五、切片 323

六、染色 324

第七节 免疫组织化学在骨小圆细胞型成骨肉瘤诊断及鉴别诊断中的价值 325

一、概要 325

二、目的 326

三、材料与方法 326

四、观察结果 327

五、讨论 327

第二十章 微波（MW）在骨病理技术中的应用 329

一、基本原理 330

二、骨组织的MW固定脱钙法 330

三、骨组织的MW脱水、透明、浸质法 331

四、骨组织的MW特殊染色方法 332

五、软骨组织冰冻切片MW处理法 332

六、骨组织免疫组化的MW法 332

七、电镜MW法 335

八、原位杂交MW法 335

九、原位PCR MW法 336

第二十一章 常用配方及计算方法 337

第一节 缓冲液 337

一、Ⅰ型缓冲液(弱酸及其盐） 337

1.Walpole醋酸-醋酸钠缓冲液 337

2.Holnes硼酸-四硼酸钠缓冲液 338

二、Ⅱ型缓冲液(强碱-弱酸及其盐) 338

1.氢氧化钠-硼砂缓冲液 338

2.氢氧化钠-硼酸缓冲液 339

3.氢氧化钠-氯化钠-甘氨酸缓冲液 340

4.氢氧化钠-醋酸缓冲液 340

三、Ⅲ型缓冲液(强酸-弱酸及其盐) 341

1.甘氨酸-盐酸缓冲液 341

2.柠檬酸钠-盐酸缓冲液 341

3.盐酸-氯化钾缓冲液 342

四、X型缓冲液(同一种酸的两种盐类) 343

1.Sorersen磷酸盐缓冲液 343

2.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液 343

五、配制缓冲液的注意事项 344

六、常用于缓冲液的化学试剂分子量 344

第二节 常用酸碱盐溶液的简便配制法 345

一、常用酸溶液的配制 345

二、常用碱溶液配制法 346

三、常用盐溶液配制法 347

四、PH值及溶液酸碱度的关系 347

第三节 化学计算公式 348

1.元素的当量 348

2.酸的当量 348

3.碱的当量 348

4.盐的当量 349

5.克当量数 349

6.毫克当量数 349

7.百分浓度 349

8.克分子浓度 349

9.当量浓度 349

10.毫克当量浓度 349

11.溶液的稀释 349

12.“十”字交叉法 350

13.各种固定剂穿透组织的速率计算公式 350

14.常用骨组织染料的溶解度 351

第四节 免疫组化常用试剂配制方法 351

一、固定液 351

1.10%中性缓冲福尔马林 351

2.4%多聚甲醛缓冲固定液 352

3.苦味酸-多聚甲酸固定液（PAPG） 352

4.过碘酸-赖氨酸-多聚甲醛固定液(PLP) 352

5.多聚甲醛戊二醛固定液(PG) 352

二、缓冲液 353

1.Tris-HCI缓冲液(0.5mlo,ph7.6) 353

2.TBS液(0.05mol，ph7.6) 353

3.TBS液(0.02mol，pH8.2) 353

4.DBS液(0.1mol，ph7.4) 353

5.醋酸盐缓冲液(0.1mol，ph5.2) 354

三、显色液 354

1.DAB-H2O2 354

2.AEC 354

第五节 原位杂交技术试剂的配制 354

一、原液 354

二、工作液 355

第六节 PCP常用试剂配制 357

一、TE缓冲液 357

二、STE液 357

附录 358

骨科手术植骨用骨的制备技术 358

第一节 冷冻干燥和低温冷冻法骨库的建立 359

一、骨库设备 359

1.贮存系统 359

2.骨材料加工处理系统 360

二、供体和来源的选择 363

第二节 骨材料贮存的制作方法 364

一、低温冷冻法 364

1.取材 364

2.处理 364

3.贮存 364

二、冷冻干燥法 364

三、灭菌 365

第三节 骨移植 366

一、自体骨移植 367

二、异体骨移植 368

三、异种骨移植 369

四、骨移植的生物学和评定方法 369

1.骨移植的生物学原理 369

2.骨移植后效果的评价 370

参考文献 372