医学生物化学与分子生物学实验教程PDF电子书下载

第一篇　医学生物化学与分子生物学实验基础知识 1

第一章 医学生物化学与分子生物学实验一般知识 1

第一节　医学生物化学与分子生物学实验的基本特点 1

第二节 实验室安全及规则 2

第三节 实验报告书写 3

第二章　基本实验操作 5

第一节　洗涤和干燥 5

第二节 常用的实验操作技术 6

第三章　实验仪器简介 9

第一节　分光光度计 9

第二节 离心机 10

第三节 高效液相色谱仪 11

第四节 电泳仪 13

第五节 PCR仪 14

第六节 真空冷冻干燥机 16

第七节 高压蒸汽灭菌锅 17

第八节　恒温培养箱 18

第九节 生物安全柜 21

第二篇 医学生物化学与分子生物学基本技术原理 22

第四章　分光光度技术 22

第一节 分光光度技术基本原理 22

第二节 （722型）分光光度计的简介 24

第五章　离心技术 25

第一节 离心技术基本原理 25

第二节 离心机的组成 27

第三节 离心方法 30

第六章　电泳技术 35

第一节 电泳技术发展简史 35

第二节 电泳基本原理 35

第三节 影响电泳分离的主要因素 36

第四节 电泳分类 38

第五节 常见电泳技术 39

第七章　层析（色谱）技术 44

第一节 层析（色谱）技术发展简史 44

第二节 层析的分类 44

第三节 层析方法的一般原理 45

第四节 常见的层析技术 46

第八章　核酸的分离与纯化 54

第一节　核酸分离的原则 54

第二节 核酸分离的主要步骤 55

第三节　核酸的纯化 55

第四节　核酸浓度的测定 55

第五节　核酸的保存 56

第九章　聚合酶链反应（PCR） 57

第一节 PCR的基本原理 57

第二节 PCR反应条件 58

第三节 常见的几种PCR技术 59

第四节　PCR技术的应用及其注意事项 62

第十章　印迹技术 64

第十一章　基因工程 66

第一节　基因工程发展简史 66

第二节 基因工程基本原理 66

第三节　基因工程的基本过程 71

第三篇　医学生物化学与分子生物学基础实验 75

第十二章　蛋白质 75

实验一　蛋白质的定性试验 75

实验二 离子交换层析分离氨基酸 80

实验三　凝胶层析法分离蛋白 82

实验四　蛋白质定量分析 83

实验五　血清蛋白的乙酸纤维薄膜电泳 90

第十三章　酶学 93

实验一　酶定性 93

实验二 丙二酸抑制琥珀酸脱氢酶实验 97

实验三　琼脂糖凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶 99

实验四　碱性磷酸酶Km测定 101

实验五　3-磷酸甘油醛脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性 103

第十四章　糖代谢 107

实验一　运动对骨骼肌糖代谢的影响 107

实验二　血糖浓度测定 109

实验三　肾上腺素和胰岛素对家兔血糖浓度的影响 112

实验四　肝糖原的提取和鉴定 112

第十五章　脂代谢 114

实验一　磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯测定 114

实验二　血清总胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇 115

实验三　血清总胆固醇的测定——邻苯二甲醛直接显色法 116

实验四 酮体的生成及鉴定 117

实验五　琼脂糖凝胶电泳分离血清脂蛋白 119

第十六章　氨基酸代谢 121

实验一　血清丙氨酸氨基转移酶活性测定 121

实验二　氨基移换及精氨酸酶在尿素形成中的作用 123

第十七章　分子生物学基础实验 127

实验一 细菌质粒DNA的提取及紫外吸收法测定核酸的含量 127

实验二　质粒DNA提取（质粒小量提取试剂盒） 129

实验三　PCR扩增 130

实验四 琼脂糖凝胶电泳分离DNA 131

实验五　肝组织中核酸的提取和核酸组分的鉴定 133

实验六　真核基因组DNA的提取 137

实验七 真核细胞RNA提取 139

实验八 RT-PCR方法 141

实验九 荧光定量PCR测定培养Hela细胞中GAPDH的含量 142

第四篇　医学生物化学与分子生物学综合设计实验 150

第十八章　蛋白质和酶的纯化 150

实验一　血清中IgG的分离纯化 150

实验二　红细胞中SOD分离纯化及活性鉴定 155

第十九章　IL-29基因亚克隆及其在大肠埃希菌中表达 159

实验一　PCR扩增目的基因及其琼脂糖凝胶电泳回收 159

实验二 质粒DNA及目的基因的限制性内切酶酶切 162

实验三 质粒DNA与目的基因的连接 163

实验四 感受态细胞的制备及转化 164

实验五 阳性克隆的筛选 167

实验六　克隆基因的诱导表达 170

第二十章　原核表达IL-29分离纯化 172

实验一 包涵体的制备、洗涤 172

实验二 包涵体的裂解和洗涤 174

实验三 目的蛋白质Ni2＋金属离子螯合层析分离纯化 175

实验四　Western-blot鉴定 177

第二十一章　IL-29复性及活性鉴定 180

实验一　纯化蛋白的复性 180

实验二 IL-29诱导Hela细胞中2′5′-寡聚腺苷酸合成酶（2′5′-OAS）的荧光定量PCR分析 181

第二十二章　自主设计实验 184

实验一 凋亡细胞DNA片断的琼脂糖电泳分析 184

实验二　酪蛋白等电点的测定 185

实验三　双荧光报告基因重组体的转染及荧光显微镜观察 187

实验四 牛血清白蛋白聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳 188

实验五 完全自主设计实验 188

附录 190

附一　常用缓冲溶液的配制 190

附二　常用酸碱摩尔溶液的配制 196

附三　常用酸碱指示剂的配制 197

附四　常用抗凝试剂的配制 197

附五 国际单位制的基本单位 198