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第一篇 生物化学实验基本要求及常用仪器的使用第一章　生物化学实验基本要求 1

一、实验室规则 1

二、实验记录及实验报告 2

三、生物化学实验课程评分与标准 3

四、实验的准确度 3

第二章　生物化学实验基本操作 4

一、配制试剂 4

二、仪器的清洗与干燥 5

三、玻璃量器的使用 6

四、混匀 9

五、离心和过滤 9

六、溶液pH值的测定 9

第三章　常用仪器及使用方法 10

一、电子天平 10

二、离心机 10

三、分光光度计 11

四、pHS-3C型酸度计 16

第二篇　基础性实验 17

第一章　糖类 17

实验一　糖的颜色反应 17

实验二　糖的还原作用 19

实验三　3,5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖和总糖含量 21

实验四　斐林试剂法测定还原糖含量 23

实验五　蒽酮比色法测定可溶性糖含量 26

实验六　苯酚-硫酸法测定可溶性糖含量 28

实验七 乙酸-氯化钙旋光法测定粗淀粉含量 29

实验八　酸性洗涤剂法测定粗纤维含量 31

实验九　重量法测定果胶含量 32

实验十 比色法测定果胶含量 34

实验十一　磷钼酸显色法（Folin-Wu法）测定血糖含量 35

实验十二　葡萄糖氧化酶法（GOD）测定血糖含量 38

实验十三　邻甲苯胺法测定血糖含量 39

第二章　脂类 41

实验十四　Soxhlet提取法测定粗脂肪含量 41

实验十五　邻苯二甲醛法测定血清总胆固醇含量 43

实验十六　碘价的测定 45

实验十七　油脂酸价的测定 47

实验十八　油脂皂化值的测定 48

实验十九　卵磷脂的提取和鉴定 49

第三章　蛋白质 50

实验二十　蛋白质及氨基酸的呈色反应 50

实验二十一　蛋白质的沉淀反应 54

实验二十二　蛋白质的两性性质及等电点的测定 56

实验二十三　凯氏定氮法测定总氮含量 57

实验二十四 甲醛滴定法测定氨基氮 61

实验二十五　茚三酮显色法测定氨基酸含量 63

实验二十六　双缩脲法测定蛋白质含量 64

实验二十七　考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量 66

实验二十八　Folin-酚试剂法测定蛋白质含量 67

实验二十九　BCA法测定蛋白质含量 69

实验三十　紫外分光光度法测定蛋白质含量 71

实验三十一　纸层析法分离氨基酸 73

实验三十二　离子交换柱层析法分离氨基酸 75

实验三十三　从牛奶中分离制备酪蛋白 77

实验三十四 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白 78

实验三十五　聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白 82

实验三十六　凝胶过滤法分离纯化蛋白质 85

第四章　酶和维生素 86

实验三十七　酶的基本性质测定 86

实验三十八　过氧化氢酶米氏常数Km值的测定 91

实验三十九　脲酶Km值的简易测定 92

实验四十　谷丙转氨酶活力的测定 95

实验四十一　淀粉酶活力的测定 97

实验四十二　2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C含量 99

实验四十三　磷钼酸法测定维生素C含量 102

实验四十四 荧光法测定维生素B2含量 103

第五章　核酸 105

实验四十五 二苯胺法测定DNA含量 105

实验四十六　苔黑酚显色法测定RNA含量 106

实验四十七　定磷法测定核酸含量 107

实验四十八　紫外分光光度法测定核酸含量 110

第六章　新陈代谢 111

实验四十九　肌糖原的酵解 111

实验五十　糖酵解中间产物的鉴定 113

实验五十一　脂肪酸的β-氧化 115

实验五十二　丙酮酸含量的测定 117

实验五十三　胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 118

实验五十四 饥饿和饱食对肝糖原含量的影响 120

第三篇　综合性实验 122

实验五十五　SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量 122

实验五十六　酵母蔗糖酶的提取纯化及其性质研究 125

实验五十七 酵母细胞中核糖核酸（RNA）的提取及鉴定 132

实验五十八　菜花（花椰菜）中核酸的分离和鉴定 134

实验五十九　大肠杆菌质粒DNA的制备及电泳鉴定 136

实验六十 发酵过程中无机磷的利用和ATP生成的测定 140

第四篇　设计性实验 144

实验六十一　动物血超氧化物歧化酶（SOD）的分离纯化及鉴定 144

实验六十二　溶菌酶的制备及活性测定 144

附录 146

附录一　化学试剂与保存 146

一、一般化学试剂纯度分级 146

二、需要特殊方法保存的试剂 146

三、化学药品、试剂毒性分类参考类目 146

四、干燥剂 147

五、指示剂 148

附录二　常用清洗液的配制 148

附录三　溶液的配制 149

一、常用溶液浓度的表示及配制 149

二、溶液浓度的调整 150

三、标准溶液的配制和标定 151

附录四　缓冲溶液的配制方法 152

一、选用缓冲溶液的注意事项 153

二、常用缓冲溶液 153

三、标准缓冲溶液的配制 157

附录五　常用数据表 158

一、化学元素的相对原子质量表 158

二、硫酸铵饱和度常用表 159

三、实验室常用酸碱的密度及其浓度 160

四、体积分数酸、碱溶液的配制 160

五、常用固态化合物的浓度配制 161

六、离心机转数与相对离心力的换算 161

七、常用蛋白质相对分子质量标准参照物 161

八、常见蛋白质相对分子质量参考值 162