骨组织病理解剖学技术 第2版PDF电子书下载

第一章　骨和软骨的正常组织学 1

第一节 软骨 1

一、软骨组织 1

二、软骨组织的分类 2

三、软骨的组织发生 2

四、软骨的退变 3

五、软骨的再生和移植 3

第二节 骨 3

一、骨组织的构成 3

二、骨的组织结构 5

三、骨的发生 7

四、骨的后续生长 8

第三节　关节 9

一、关节软骨 9

二、关节囊 9

三、滑液 9

第二章　骨组织病理解剖实验室设备及试剂 10

第一节 骨组织病理解剖实验室的布置与要求 10

一、骨组织病理解剖实验室的布置 10

二、骨组织病理解剖实验室的设计要求 11

第二节 骨组织病理解剖实验室基本设备及常用试剂 18

一、仪器设备 18

二、储存陈列设备 19

三、实验用设备及试剂 20

第三章　骨组织的脱钙技术 21

第一节 骨组织脱钙技术概述 21

一、骨组织脱钙方法 21

二、骨组织脱钙技术的应用 22

三、骨组织脱钙技术程序 22

第二节 常规骨组织的病理脱钙技术 22

一、酸类单纯脱钙技术 23

二、酸类混合脱钙技术 24

第三节 骨组织科研制片的脱钙技术 28

一、螯合剂（EDTA）法 28

二、缓冲脱钙液法 28

三、甲酸-螯合剂脱钙法 29

四、电镜脱钙技术 29

第四节 脱钙“终点”的测定 30

一、物理检测法 30

二、X线检测法 30

三、化学检测法 30

第五节 脱钙后处理 30

一、碱处理 31

二、乙醇处理 31

三、流水冲洗 31

第六节 实用性指南 31

一、脱钙方法的选择标准 31

二、脱钙方法的选择原则 32

三、缓冲脱钙技术 32

四、JYBL-Ⅱ脱钙技术 32

五、JYBL-Ⅲ50％甲酸脱钙技术 32

第七节 骨脱钙应注意的问题 33

一、取材厚度 33

二、脱钙液量 33

三、脱钙温度 33

四、脱钙时间 33

五、使用器皿 33

六、固定要求 33

七、脱脂处理 33

第四章 骨组织病理标本常规制片技术 35

第一节 骨组织的固定技术 35

一、骨组织的固定 35

二、常用于骨组织的固定剂 35

三、实用性指南 36

第二节 骨组织的脱水技术 36

一、骨组织的脱水 36

二、骨组织的脱水方法 36

三、实用性指南 38

第三节 骨组织的透明技术 38

一、骨组织的透明 38

二、透明剂的使用 38

三、使用方法 38

四、实用性指南 38

第四节 骨组织的浸蜡及包埋技术 39

一、石蜡浸蜡包埋技术 40

二、实用性指南 40

第五节 骨组织标本的切片技术 40

一、切片刀 41

二、切片刀的研磨 44

三、切片机 46

四、骨组织常规切片法 46

第六节 骨穿刺标本的脱钙制片技术 46

一、骨穿刺标本制片技术的认知 47

二、骨穿刺标本的制片方法 47

第五章　骨组织标本的常规染色技术 49

第一节 苏木素染色的原理及常用苏木素染色液的配制 49

一、苏木素染料简介 49

二、染色原理 50

三、苏木素的氧化 50

四、媒染剂 50

五、苏木素染液的配制 51

第二节 伊红染色的原理及常用伊红染色液的配制 52

一、伊红染料简介 52

二、染色原理 53

三、伊红染料的促染 53

四、伊红染液的配制 53

第三节 苏木素-伊红染色的分化及返蓝 54

一、分化的目的 54

二、分化的原理 54

三、分化的控制 54

四、返蓝的目的 54

五、分化液及返蓝液的配制 55

第四节 苏木素-伊红染色的程序及注意事项 55

一、手工染色程序 55

二、全自动染色机染色程序 56

第六章　骨的组织学特殊染色技术 58

第一节 软骨组织的特殊染色技术 58

一、透明软骨结构的显示 58

二、弹性软骨结构的显示 64

三、纤维软骨结构的显示 67

第二节 骨的组织学特殊染色技术 69

一、未脱钙骨组织的染色技术 69

二、脱钙骨组织的染色技术 72

第七章　骨组织病理学的特殊染色技术 77

第一节 糖原染色技术 77

一、Best胭脂红法 77

二、Gomori银染法（Arzac与Flores改良法） 78

三、铬酸-雪夫反应（CAS） 79

第二节 黏液染色技术 80

一、异染反应 80

二、阿新蓝染色技术 82

三、Hale胶性铁技术 85

四、Gomori醛品红染色法 86

第三节 结缔组织染色技术 87

一、胶原纤维染色技术 87

二、网织纤维染色技术 88

三、弹力纤维染色技术 91

第四节 肌肉组织染色技术 93

一、磷钨酸-苏木素染色法PTAH 93

二、Puchtler法 94

第五节 脂类染色技术 95

一、苏丹Ⅲ染色法 95

二、油红O染色法 96

三、尼罗蓝染色法 97

第六节 色素的显示技术 97

一、含铁血黄素的显示技术 97

二、黑色素的显示方法 99

第七节 抗酸杆菌染色技术 100

一、Ziehl-Neelsen法 100

二、Wade-Fite抗酸新染法 101

第八节 痛风结晶的显示技术 102

一、Mallory显示尿酸盐结晶法 102

二、Gomori-Burtner六胺银法 102

第九节 骨髓标本的染色技术 103

一、骨髓穿刺液标本的石蜡制片染色技术 103

二、大体标本骨髓取材制片染色技术（骨肿瘤断端骨髓取材标本） 104

第十节 淀粉样物质的显示技术 105

一、刚果红染色技术（Benhold） 105

二、Lendrum染色技术 105

三、Wolman甲苯胺蓝技术 106

第八章　骨及软骨的酶组织化学技术 107

第一节 酶的保存 107

第二节 酶的显示技术 107

一、碱性磷酸酶（AKP）的显示 107

二、酸性磷酸酶（ACP）的显示 109

三、琥珀酸脱氢酶（SDH）的显示 110

四、三磷酸腺苷酶（ATP）的显示 111

第九章 骨组织病理制片染色常见问题及处理方法 114

第一节 骨组织制片中易出现的问题及处理方法 114

第二节 骨组织切片染色中易出现的问题及处理方法 115

第三节 骨肿瘤标本冷冻切片易出现的问题及处理方法 116

第四节 实用性指南 116

第十章　骨病理染色技术在诊断中的应用 118

第一节 染色技术在骨疾患特殊结构和物质显示上的应用 118

一、糖原、黏液物质的显示 118

二、网织纤维染色的应用 119

三、含铁血黄素染色的应用 120

四、其他病理性产物的显示 120

第二节 染色技术在骨疾患鉴别诊断中的应用 120

一、网织纤维染色的应用 120

二、糖原、黏液染色的应用 121

三、脂肪染色的应用 121

四、其他染色的应用 122

第十一章　骨的细胞学技术 124

第一节 骨病理细胞学制片技术 124

一、涂片技术 124

二、印片技术 125

三、骨肿瘤细胞学滤片制作技术 125

四、骨肿瘤穿刺针吸细胞学技术 126

五、骨组织细胞学的固定技术 127

第二节 骨细胞学的染色技术 128

一、Wright法 128

二、Leishman染色法 129

三、Giemsa快速染色法 130

第三节 常见骨肿瘤细胞学形态 130

一、骨的原发性恶性肿瘤 130

二、杂类的骨肿瘤细胞 132

第十二章　骨组织的免疫组织化学技术 133

第一节 抗体 133

一、免疫球蛋白 133

二、多克隆抗体 134

三、单克隆抗体 134

四、抗体的选择 134

五、抗体的亲和力 134

六、抗体的交叉反应 135

七、抗体的反应率 135

八、抗体的稳定性 135

九、抗体的处理 135

十、抗体滴度 136

十一、抗体稀释 136

十二、抗体孵育 136

第二节　基础酶学 137

一、过氧化物酶 137

二、底物和色原 137

三、底物-色原试剂的使用方法 137

第三节 细胞组织的固定 138

一、涂片的固定 138

二、冷冻切片的固定 138

三、石蜡切片的固定 138

四、推荐固定液 138

第四节 抗原修复 138

一、原理和技术 138

二、作用机制 139

三、石蜡切片抗原热修复方法 139

第五节 染色方法 140

一、染色原理 140

二、染色方法 142

三、常用试剂的配制 144

四、实用性指南 146

第六节 免疫组化的自动化技术 153

第七节 骨肿瘤免疫组化的联合表达 154

一、骨肿瘤的分类 154

二、骨肿瘤的抗体 156

三、免疫组化抗体在骨肿瘤中的表达 156

第十三章 骨组织病理特殊制片技术 168

第一节 骨磨片技术 168

一、空气封闭法显示骨陷窝及骨小管 168

二、染色法显示骨小管 168

第二节 骨组织火棉胶大切片技术 170

一、火棉胶浸渍包埋技术 170

二、火棉胶制片技术 171

三、骨组织火棉胶大切片的染色技术 172

第三节 不脱钙骨组织的塑料包埋制片技术 173

一、双重包埋不脱钙骨组织切片技术 174

二、树脂包埋不脱钙骨组织切片技术 174

三、塑料包埋不脱钙骨组织切片技术 175

四、塑料包埋不脱钙骨组织玻璃刀制片技术 177

第四节 石蜡包埋制作股骨头大型切片技术 178

一、甲酸脱钙制作股骨头整体切片技术 178

二、微波螯合剂脱钙制作股骨头大切片技术 179

第五节 EXAKT骨组织切磨片技术 180

一、EXAKT硬组织切片机 181

二、EXAKT硬组织磨片机 182

三、EXAKT平行载片粘合压片机 183

四、EXAKT脱水渗透机 184

五、EXAKT光固化包埋机 184

六、EXAKT干燥渗透再聚合装置 185

七、操作程序 186

第六节 牙体组织制片技术 189

一、牙体组织的切片法 189

二、牙体组织的磨片法 192

三、锯割式切片机在口腔硬组织病理的制片技术 192

第十四章　骨组织的电子显微镜技术 194

第一节 电子显微镜技术概述 194

一、成像原理 194

二、基本要求 195

三、样品制备的方法 195

四、冷冻置换法 196

五、电镜放射自显影技术 196

第二节 骨组织电子显微镜技术 198

一、骨组织的取材固定 198

二、骨组织的脱钙 198

三、骨组织的脱水 198

四、骨组织的包埋 198

五、骨组织的超薄切片 199

六、骨组织的染色（醋酸双氧铀-枸橼酸铅双重染色法） 199

七、观察 199

八、实用性指南 199

第三节 骨组织的电镜酶组织化学技术 200

一、酸性磷酸酶技术 200

二、碱性磷酸酶技术 201

第四节 电镜在骨肿瘤诊断和研究中的应用 203

一、电镜在认识骨肿瘤成分及性质中的作用 203

二、电镜在探讨骨肿瘤组织来源中的作用 203

三、电镜对判断骨肿瘤良恶性的作用 203

四、电镜对探讨骨肿瘤某些基础理论的作用 204

第五节 几种常见骨肿瘤的电镜观察结果 204

一、骨肉瘤 204

二、骨巨细胞瘤 204

三、骨原发性恶性纤维组织细胞瘤 205

四、骨的纤维肉瘤 205

五、骨髓瘤 205

六、骨软骨瘤 205

七、成软骨细胞瘤 205

八、软骨肉瘤 206

九、Ewing肉瘤 206

十、釉质瘤 206

第十五章　骨组织PCR技术 207

第一节 PCR基因扩增原理 207

第二节 PCR技术的基本设备 207

一、PCR扩增仪 207

二、移液器 208

三、试剂的配制、分装和保存 208

第三节 用石蜡切片制作PCR样本的方法 208

一、骨组织PCR石蜡切片标本的制备 208

二、二甲苯脱蜡提取法 209

三、水浴脱蜡提取法 209

四、提取DNA扩增法 210

五、提取DNA应注意的问题 210

第四节 原位PCR技术 210

一、标本制备 211

二、预处理 211

三、原位扩增 211

四、原位杂交 211

第五节 运用PCR技术对人骨组织和牙齿进行性别鉴定技术 211

一、骨组织和牙齿的处理 211

二、生化试剂 212

三、DNA提取 212

第六节 实用性指南 212

一、骨PCR扩增技术中应注意的问题 212

二、骨组织PCR方法的选择应用问题 214

第十六章　骨组织原位杂交技术 215

第一节 原位杂交技术的原理 215

一、原位杂交 215

二、探针的种类 215

三、核酸分子杂交 216

第二节 原位杂交技术所需器材及试剂 216

一、主要器材 216

二、试剂 216

第三节 骨组织原位杂交 218

一、杂交前组织处理 218

二、预杂交 218

三、杂交 218

四、显色 218

第四节　不脱钙骨组织原位杂交技术 219

一、标本制备 219

二、原位杂交 220

三、注意事项 220

四、试剂配制 220

第五节　FISH和PRINS技术 221

一、荧光原位杂交（FISH） 221

二、用引物介导的原位标记（PRINS） 222

第六节 实用性指南 223

一、探针的选择 223

二、探针的标记 223

三、探针的浓度 223

四、杂交 223

五、杂交最适温度 223

六、杂交的严格性 224

七、杂交反应时间 224

八、杂交促进剂 224

第十七章　骨组织的动物实验技术 226

第一节　基本要求 226

一、实验动物背景资料记录 226

二、试验动物体表检查 226

三、试验动物标本取材的基本要求 227

第二节 实验动物病理剖检基本操作 228

一、常用器械及使用方法 228

二、基本操作 228

第三节 实验动物病理形态学观察实验程序 229

一、实验动物骨组织脱钙法制片程序 229

二、实验动物骨组织不脱钙法制片程序 230

第四节 实验动物绿色荧光蛋白骨的冷冻切片法 231

一、操作程序 231

二、实用性指南 231

第五节 实验动物骨组织金属种植体的制片方法 232

一、操作程序 232

二、实用性指南 232

第十八章　骨组织病理实验技术 234

第一节 乙醇穿入皮质骨速率的实验技术 234

一、实验（Ⅰ） 235

二、实验（Ⅱ） 235

三、实验的统计学意义 236

第二节 骨细胞和软骨细胞的组织化学实验技术 237

一、实验（Ⅰ）骨细胞与软骨细胞的SDH显示 237

二、实验（Ⅱ）SDH活性与形态学的关系 238

第三节 骨肿瘤病理中抗人Ⅰ、Ⅱ型胶原抗体实验技术 240

一、材料和方法 240

二、抗人Ⅰ、Ⅱ型胶原抗体在骨肿瘤病理研究中的应用 241

第四节 骨基质诱导异位骨形成实验模型的组织学和组织化学实验技术 242

一、材料和方法 243

二、诱导性骨形成的组织化学定位 243

三、实验结果 244

第五节 未脱钙骨的酶组织化学实验技术——骨折模型低温塑料切片 245

一、实验材料 245

二、固定脱脂脱水 245

三、浸透 245

四、包埋 245

五、切片 245

六、染色 245

第六节 免疫组化在骨小圆细胞性成骨肉瘤诊断及鉴别诊断中的价值 246

一、概要 246

二、目的 247

三、材料和方法 247

四、观察结果 247

五、讨论 247

第七节 实验家兔骨折愈合的骨组织形态计量学实验技术 248

一、材料和方法 248

二、骨折模型不脱钙切片的制作 250

三、骨计量学测量方法及测定指标 252

四、骨组织形态测量学参数 252

五、实验结果 253

六、骨计量测量指标、公式及单位 255

第十九章　微波（MW）在骨组织病理制片技术中的应用 257

第一节　基本原理 257

第二节 骨组织的MW固定脱钙法 257

一、操作方法 258

二、实用性指南 258

第三节 骨组织MW脱水、透明、浸渍法 258

第四节 骨组织MW特殊染色法 258

第五节 软骨组织冷冻切片MW处理法 259

第六节 骨组织免疫组化的MW法 259

一、操作方法 259

二、作用机制 259

三、MW辐射功率及时间 260

四、实验稳定性和安全性 260

五、MW免疫组化的特点 261

六、电镜MW法 261

七、原位杂交MW法 261

八、原位PCR的MW法 261

第二十章　骨组织绿色环保型病理制片技术 263

第一节　材料和方法 264

一、材料 264

二、方法 264

第二节 应用 265

一、FmeFIX环保型固定剂的应用 265

二、WaxOut、WaxIn无毒型组织脱蜡、透明剂的应用 265

三、C.D脱蜡剂的应用 267

四、UltraKitt的应用 268

第二十一章　骨的组织芯片技术 270

第一节 骨组织芯片制备程序 270

一、材料及设备 270

二、骨组织处理程序 271

第二节 组织芯片制作程序 271

一、采用包埋框制备空白蜡块坯 271

二、挖取组织 272

三、填埋组织 272

四、重复上述操作 272

五、整形 272

六、二次包埋 272

七、切片 272

第三节 实用性指南 273

一、制作阵列孔毛坯时蜡块碎裂 273

二、阵列孔的毛坯从管刀上退不下来或蜡块严重变形 273

三、从供体蜡块上挖去的目标组织不能全部去除 273

四、切片容易掉片 273

五、真空泵过滤器内有蜡液或管道中有蜡液，蜡凝固后将管道封死 274

第四节 组织芯片的应用 274

第五节 组织芯片的优缺点 274

一、优点 274

二、局限性 274

第二十二章　骨骼标本的陈列技术 276

第一节 人体骨骼分类及名称 276

一、骨的分类 276

二、骨的表面形态 276

三、中轴骨骼 279

四、附肢骨骼 291

第二节 骨骼标本材料的收集 299

一、骨骼标本的获得途径 299

二、标本收集时要注意的问题 299

第三节 骨骼标本材料的处理 299

一、经防腐固定后的骨骼标本处理 300

二、腐胔骨的处理 300

三、未经防腐固定处理的标本处理 300

第四节 骨骼标本的制作技术 301

一、脱脂 302

二、漂白 302

三、表面处理 303

四、骨骼标本的连接 303

五、骨骼标本的装配固定 305

六、整体骨架的串联 305

七、活动骨标本的串联技术 309

八、可移动手骨标本的串联技术 310

九、可移动足骨标本的串联技术 311

十、带有韧带和关节囊的可移动骨骼标本的串联技术 311

第五节 骨标本的加工技术 311

一、颅骨的分离 311

二、骨的锯切 312

第六节 人体骨骼标本制作的改进方法 313

一、取材 313

二、制作方法 313

第七节 骨透明标本的制作 314

一、胚胎骨骼透明标本的制作技术 315

二、胚胎骨骼染色透明标本的制作技术 315

三、胚胎骨与软骨双重染色透明标本制作技术 316

四、骨空腔性内部结构的透明标本制作技术 317

五、骨血管透明标本制作技术 318

第八节 显示骨结构和成分的标本制作技术 318

一、骨膜的显示 318

二、骨质的显示 319

三、骨髓的显示 319

四、骨化学成分的显示 319

第二十三章 实验动物骨骼标本的制作技术 320

第一节 骨骼染色透明标本的制作技术（方法Ⅰ） 320

一、材料、药品 320

二、制作步骤 321

三、实用性指南 321

四、结果评估 321

第二节 骨骼染色透明标本的制作技术（方法Ⅱ） 321

一、材料与方法 321

二、结果评估 322

三、实用性指南 322

第二十四章　骨肿瘤标本的制作技术 323

第一节 骨肿瘤标本的组织固定技术 323

第二节 骨肿瘤标本的剖面技术 324

一、检视和构思 324

二、具体操作 324

第三节 骨肿瘤标本的放置和固定技术 326

一、基本方法和原则 326

二、具体操作 326

第四节 保存液的配制 328

一、常用保存液的配制 329

二、自然保色液的配制 329

第五节 封缸与标签 329

一、封缸胶的配制 330

二、封缸操作法 330

三、标签 330

第六节 骨骼浸渍标本的制作技术 330

第七节 骨肿瘤薄片解剖标本的制作技术 331

一、制作方法和处理 331

二、显色和染色 332

三、薄片标本的HE染色法 332

四、有机玻璃盒的制作 332

五、冲水槽的制作 333

六、冲水框的制作 333

第二十五章　骨组织病理资料管理 334

第一节 骨组织病理资料管理的要求与设备 334

一、要求 334

二、设备 335

第二节 骨组织病理资料管理的方法及功能 335

一、方法 336

二、病理资料管理系统的内容 336

三、骨病理资料管理系统的功能 336

四、骨病理资料研究系统的功能 337

第三节 微机骨病理资料管理系统的实用性指南 337

一、微机管理系统给我们带来的好处 337

二、骨病理资料计算机网络化管理的必要性 337

三、存在问题及对策 338

第二十六章　常用配方及计算方法 340

第一节　缓冲液 340

一、Ⅰ型缓冲液（弱酸及其盐） 340

二、Ⅱ型缓冲液（强碱-弱酸及其盐） 341

三、Ⅲ型缓冲液（强酸-弱酸及其盐） 342

四、Ⅳ型缓冲液（同一种酸的两种盐） 344

五、其他缓冲液的配制 345

六、实用性指南 349

七、常用于缓冲液的化学试剂的分子量 349

第二节 常用酸碱盐溶液的简便配制法 350

一、常用酸溶液的配制法 350

二、常用碱溶液配制法 350

三、常用盐溶液配制法 351

四、pH与溶液酸碱度的关系 351

五、Hp与酸碱度变化的关系 351

第三节 化学计算及试剂特性 352

一、计算公式 352

二、各种固定剂穿透组织的速率计算表 353

三、常用骨组织染料的溶解度 353

第四节 免疫组织化学常用试剂配制方法 354

一、固定液 354

二、缓冲液 355

三、显色液 355

第五节 原位杂交技术试剂的配制 356

一、原液 356

二、工作液 357

第六节 关于化学试剂配制的其他有关问题 357

一、关于媒染剂 357

二、关于染料的溶解度 358

三、关于荧光染料 359

四、关于溶液的稀释 360

五、关于清洁液 361

六、常用计量单位 361

七、关于单位的名称及符号 361

参考文献 364

附录（一）　骨科手术植骨用骨的制备技术 367

第一节 骨库的相关标准 367

一、术语定义 368

二、骨库的建立和生产同种骨的有关条例 368

三、供体选择标准 369

第二节 冷冻干燥和低温冷冻法骨库的建立 370

一、骨库设备 370

二、供体来源 371

第三节 骨材料贮存的制作方法 372

一、低温冷冻法 372

二、冷冻干燥法 373

三、骨产品的灭菌 373

四、记录保存和产品应用 374

五、异体骨移植材料的制作流程 375

六、异种骨植骨材料的制作流程 375

七、人工骨骨移植材料 376

第四节 骨移植 376

一、自体骨移植 377

二、异体骨移植 377

三、异种骨移植 377

四、骨移植的生物学和评定方法 378

附录（二）　其他特殊组织的制片方法 380

第一节 皮肤组织的制片方法 380

一、经典方法 380

二、改良方法 382

三、实用性指南 382

第二节 脂肪组织的制片方法 382

一、经典方法 383

二、改良方法 383

三、实用性指南 384

第三节 淋巴组织的制片方法 384

一、经典方法 384

二、改良方法 385

三、实用性指南 386

第四节 肌腱组织的制片方法 386

第五节 肾穿组织的制片方法 387

一、经典方法 387

二、改良方法 388

三、实用性指南 388

第六节 神经组织的制片方法 390

一、中枢神经系统的制片方法 390

二、末梢神经组织的制片方法 391

第七节 钙化组织的制片方法 393

一、经典方法 393

二、改良方法 393

三、实用性指南 394

第八节 烧伤皮肤的制片方法 394

第九节 肌肉组织的制片方法 395

第十节 指甲的制片方法 396

第十一节 眼球的制片方法 397

第十二节 需软化处理的组织制片方法 397

第十三节 易碎裂组织的制片方法 398

第十四节 石蜡包埋组织块快速补救脱钙制片法 398

附录（三）　常用名词术语英汉对照表 399

第一节 骨病理技术常用名词术语英汉对照表 399

第二节 化学试剂常用名词术语英汉对照表 404

附录（四）　关子FineFIX固定剂的应用 412

一、总则 412

二、采用FineFIX固定大体标本 413

三、组织类别与固定方法 413

四、采用FineFIX固定液制作病理切片 421

五、FineFIX环保处理 422

六、FineFIX固定剂在免疫组化中的应用 422

七、FineFIX固定剂的优点 423

八、FineFIX固定后组织切片显微镜下的形态表现 423

九、FineFIX在取材室中的优势 423

十、FineFIX固定剂值得推荐 423

附录（五） 骨组织病理解剖学技术图片展示 425