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第1篇 基因工程 2

第1章 基因工程常用技术 2

实验1染色体DNA的制备——植物总DNA的提取 3

实验2细菌总DNA的提取 5

实验3动物组织DNA的提取 7

实验4质粒DNA的提取 8

实验5琼脂糖凝胶电泳分离检测DNA 12

实验6 PCR扩增目的基因 15

实验7琼脂糖凝胶中DNA片段的回收 19

实验8 DNA的酶切 22

实验9感受态细胞的制备 26

实验10在质粒载体中进行外源DNA的克隆 29

实验11质粒DNA的转化 31

实验12基因定位 34

实验13基因的定点突变 37

实验14 DNA的随机突变 40

第2章 原核表达体系的应用 43

实验15原核生物中外源基因的表达和纯化 43

实验16宏基因组文库构建 47

实验17 cDNA文库的构建 52

第3章 真核表达体系的应用 66

实验18小鼠β-actin基因的克隆与表达 66

实验19酵母表达体系及酵母双杂交技术 76

实验20植物表达体系 84

第2篇 蛋白质工程 95

第4章 蛋白质工程常用技术 95

实验21蛋白质末端分析 95

实验22 SDS-PAGE电泳分离检测蛋白质 100

实验23离子交换层析纯化牛奶中的酪蛋白 106

实验24凝胶过滤 115

实验25亲和层析 124

实验26高效液相色谱法测定牛乳中α-乳白蛋白 127

实验27气相色谱法测定人白蛋白制品中辛酸钠含量 135

实验28蛋白质二维凝胶电泳技术 139

实验29免疫印迹 149

第3篇 细胞工程 156

第5章 细胞工程技术 156

实验30菊花的愈伤组织诱导培养 156

实验31菊花愈伤组织的分化培养 165

实验32菊花苗的生根培养 168

实验33植物原生质体分离与融合 169

实验34动物细胞的原代培养 176

实验35动物细胞的传代培养 182

实验36培养细胞的增殖及活力检测 183

实验37流式细胞仪检测技术 187

第4篇 发酵工程 192

第6章 固体培养技术 192

实验38平菇的固体培养技术 192

第7章 厌氧发酵技术 197

实验39啤酒发酵技术 197

实验40酸奶发酵 205

第8章 好氧分批发酵技术 213

实验41单细胞蛋白好氧分批发酵技术 213

第9章 连续发酵技术 222

实验42酵母的连续发酵技术 222

第10章 动植物细胞悬浮培养技术 229

实验43动物细胞悬浮培养 229

实验44植物细胞悬浮培养 237

实验45共聚焦显微技术 239

第5篇 免 疫学 246

第11章 免疫学技术 246

实验46环状沉淀反应 246

实验47单向琼脂扩散实验 247

实验48双向琼脂扩散实验 249

实验49对流免疫电泳实验 250

实验50火箭电泳实验 252

实验51酶联免疫吸附测定（ELISA） 253

实验52 BA-ELISA 255

实验53抗原和免疫血清的制备 257

实验54动物细胞免疫荧光技术 259

实验55淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术 261

实验56盐析法纯化免疫球蛋白 265

实验57 DEAE-Sephadex A-50柱层析纯化免疫球蛋白 268

实验58 Sepharose CL-4B亲和柱层析纯化IgG及IgG亚类 270

实验59高效液相色谱法纯化小鼠腹水中单克隆抗体 272

实验60单克隆抗体亲和层析柱纯化重组人α2a干扰素 273

实验61免疫球蛋白酶标记抗体技术 274

实验62荧光素标记抗体技术 276

实验63免疫斑点实验 279

实验64免疫组化染色技术检测淋巴细胞表面标记 281

实验65免疫共沉淀实验 285

参考文献 289

附录1常用缓冲溶液的配制 291

附录2常用培养基的配制 297

附录3不同温度下硫酸铵饱和度计算表 305