简明神经生物学实验技术手册PDF电子书下载

一、神经生理学实验 1

（一）复合动作电位记录 1

（二）体感诱发电位记录（大脑皮质） 2

（三）在体神经元动作电位的细胞内记录（脊神经节） 5

（四）细胞外记录——丘脑腹后外侧核的电活动 8

（五）全细胞记录——缺氧预适应脑提取液对ATP敏感性钾电流的作用 10

（六）光遗传学实验——利用光遗传学技术调控小鼠大脑皮层桶状区S1BF神经元的兴奋变化 16

（七）fMRI实验——前爪刺激引起大鼠大脑皮层血氧水平依赖的改变 20

二、神经化学实验 25

（一）微透析法——脑内腺苷的测定 25

（二）突触体——缺氧对大脑皮质突触体乳酸脱氢酶透出率的影响 26

三、神经组织免疫细胞化学实验 30

（一）免疫细胞化学染色法——面口部注射甲醛溶液后大鼠延髓背角内的FOS样阳性神经元观察 30

（二）免疫细胞化学双标染色法——大鼠中缝核簇内5-羟色胺样阳性神经元表达FOS蛋白 33

（三）免疫荧光细胞化学双重标记染色法——大鼠三叉神经节内阿片μ受体与降钙素基因相关肽共存的阳性神经元 37

（四）放射性核素标记的原位杂交组织化学法——大鼠三叉神经节内钙结合素mRNA阳性神经元的分布 41

（五）包埋前免疫电镜双标记法——大鼠延髓背角内γ-氨基丁酸能神经元与P物质能纤维终末的突触联系 47

（六）包埋前与包埋后免疫电镜双标记法——大鼠孤束核内γ-氨基丁酸能纤维终末与P物质受体样阳性神经元的突触联系 52

四、神经形态学实验 58

（一）辣根过氧化物酶逆行示踪法——大鼠脊髓灰质向孤束核的投射 58

（二）荧光金逆行追踪——延髓背角内P物质受体样阳性神经元向丘脑胶状质核投射 60

（三）植物凝集素（PHA-L）顺行示踪法——大鼠三叉神经脊束核吻侧亚核向三叉神经运动核的投射 65

（四）生物素葡聚糖胺顺行示踪法——延髓背角浅层向臂旁外侧核及丘脑腹后内侧核的投射 71

五、分子神经生物学实验 76

（一）总RNA的提取及cDNA的制备（三叉神经节） 76

（二）PCR检测mRNA的含量（5-HT3受体） 79

（三）重组质粒DNA（pGEM-ChAT）的制备及限制性酶切分析 84

（四）十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 90

（五）Westeern印迹法检测乙酰胆碱转移酶 95

六、神经行为学实验 100

（一）甲醛溶液致炎大鼠疼痛行为的观察 100

（二）大鼠脊髓横断及半横断模型的复制 101

（三）慢性束缚应激对大鼠空间学习记忆能力的影响 104

（四）创伤后应激障碍模型大鼠的自发活动和焦虑水平检测 113

（五）急性缺氧预适应对小鼠缺氧耐受性的影响 116