分子生物学实验指导PDF电子书下载

第1篇 基础知识 2

第1章 分子生物学实验室的基本要求 2

1.1 实验室规则 2

1.2 实验室安全防护 2

1.3 放射性同位素防护 4

1.4 危险化学试剂防护 4

1.5 生物安全防护 6

1.6 实验室物品与仪器的管理 8

第2章 实验记录与实验报告 9

2.1 实验记录 9

2.2 实验报告 10

第3章 仪器使用与溶液配制 11

3.1 常用仪器设备 11

3.2 溶液配制 16

第4章 常用实验用品的处理 17

4.1 清洗 17

4.2 消毒灭菌 18

4.3 液氮的安全使用 19

第5章 分子生物学实验技术原理 22

5.1 细胞培养技术 22

5.2 大肠杆菌的培养与保存 25

第2篇 核酸技术 30

第6章 核酸电泳 30

6.1 琼脂糖凝胶电泳分离DNA 31

6.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离DNA 36

第7章 核酸的分离纯化和鉴定 40

7.1 质粒DNA的提取与纯化 40

7.2 蛋白酶K和苯酚从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA 44

7.3 其他DNA提取方案 49

7.4 RNA的提取 49

第8章 聚合酶链反应（PCR） 61

8.1 普通PCR 61

8.2 RT-PCR 65

8.3 荧光定量PCR 69

第9章 核酸分子杂交 76

9.1 斑点杂交 76

9.2 原位杂交 80

9.3 Southern印迹杂交 85

9.4 Northern印迹杂交 90

第3篇 分子克隆 96

第10章 DNA的酶切 96

10.1 实验目的 96

10.2 实验原理 96

10.3 仪器、材料与试剂 97

10.4 实验流程 97

10.5 实验步骤 97

10.6 结果分析 98

10.7 注意事项 99

10.8 应用 99

第11章 DNA的连接 101

11.1 实验目的 101

11.2 实验原理 101

11.3 仪器、材料与试剂 102

11.4 实验流程 102

11.5 实验步骤 102

11.6 结果分析 102

11.7 注意事项 102

11.8 应用 103

第12章 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 104

12.1 实验目的 104

12.2 实验原理 104

12.3 仪器、材料与试剂 104

12.4 实验流程 105

12.5 实验步骤 105

12.6 结果分析 106

12.7 注意事项 106

12.8 应用 107

第13章 重组子的鉴定 110

13.1 实验目的 110

13.2 实验原理 110

13.3 仪器、材料与试剂 110

13.4 实验流程 110

13.5 实验步骤 110

13.6 结果分析 111

13.7 注意事项 111

13.8 应用 112

第4篇 蛋白技术 118

第14章 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 118

14.1 实验目的 118

14.2 实验原理 118

14.3 仪器、材料与试剂 119

14.4 实验流程 120

14.5 实验步骤 120

14.6 结果分析 121

14.7 注意事项 121

14.8 应用 121

14.9 真核细胞表达外源基因操作步骤 122

第15章 蛋白质的提取与纯化 123

15.1 实验目的 123

15.2 实验原理 123

15.3 仪器与试剂 124

15.4 实验流程 125

15.5 实验步骤 125

15.6 结果分析 126

15.7 注意事项 126

15.8 应用 127

第16章 蛋白质的定量检测 130

16.1 Lowry法测定蛋白质含量 130

16.2 BCA法测定蛋白质含量 132

16.3 Bradford法测定蛋白质含量 134

第17章 目标蛋白质的测定 137

17.1 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 137

17.2 蛋白质的免疫印迹技术（Western-Blot） 141

17.3 免疫共沉淀 146

17.4 双向聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质 150

第18章 基因工程菌的大规模培养及高密度发酵技术 154

18.1 实验目的 154

18.2 实验原理 154

18.3 仪器与试剂 155

18.4 实验流程 156

18.5 实验步骤 156

18.6 结果分析 158

18.7 注意事项 158

18.8 应用 158

第5篇 生物信息学在分子生物学实验中的应用 162

第19章 核酸和蛋白质序列的查询和分析 162

19.1 核酸与蛋白质序列的数据库查询 162

19.2 核酸与蛋白质序列的相似性分析 169

第20章 常用的分子生物学分析软件 175

20.1 多序列比对软件 175

20.2 构建系统发育树软件 181

20.3 引物设计软件 188

第6篇 综合性实验 194

第21章 综合性实验概述 194

21.1 实验要求 194

21.2 综合实验报告 194

21.3 实验目的 195

21.4 实验安排 195

21.5 实验材料 195

21.6 实验流程 195

21.7 实验步骤 195

第22章 综合性实验案例 196

22.1 阿尔茨海默病（Alzheimer disease，AD） 196

22.2 katG基因全部缺失和点突变等引起结核菌产生对异烟肼（INH）的耐药研究 198

22.3 亨廷顿舞蹈病（Huntington disease，HD） 201

22.4 H7N9禽流感病 203

22.5 神经营养因子（neurotrophic factors， NTFs） 204

附录 207

附录A 分子生物学实验中的常用数据及换算关系 207

附录B 分子生物学实验中的常用试剂 208

附录C 常用细菌培养基和抗生素溶液 213

附录D 与分子生物学实验相关的实验资料 214

参考文献 216