细菌检验用培养基手册PDF电子书下载

一、玻璃器的种类 1

（一）试管 1

（二）吸管 1

第一章　玻璃器的种类，清洁法及灭菌法 1

（三）发酵套管 2

（四）陪替氏皿 2

（五）三角烧瓶 2

（六）白莱克氏与柯莱氏培养瓶 2

二、玻璃器清洁法 2

（一）用过的玻璃器 2

三、玻璃器灭菌法 4

（一）一般玻璃器 4

（三）玻璃器上污迹去除法 4

（二）新玻璃器 4

（二）陪替氏皿 5

（三）吸管 5

（四）试管和玻瓶 6

第二章　灭菌器及其使用法 6

一、灭菌原理 6

二、干热、湿热灭菌器及血清凝固器 6

（一）干热灭菌器 6

（二）阿诺氏流动蒸汽灭菌器 8

（三）高压蒸汽灭菌器 8

（四）煮沸灭菌器 12

（五）血清凝固器 12

三、滤菌器 13

（一）数种常用的滤菌器 13

1．伯克非尔氏滤菌器 13

3．赛氏滤菌器 14

2．姜伯朗氏滤菌器 14

（二）滤烛的选择 15

（三）滤烛清洁法 15

（四）滤过法 16

（五）物体的滤过性 16

（六）滤过装置 16

第三章　培养基综述 17

一、培养基的定义 17

二、培养基的成分 18

三、培养基的种类及用途 24

（一）基础培养基的制备与检查法 24

（二）液体蛋白胨、胰蛋白酶和木瓜酶水解产物的实验室制备 24

（三）基础培养基 24

（四）固体、半固体培养基 25

（五）鉴别培养基 25

（一）制作时应注意事项 26

（六）特殊培养基 26

四、培养基制作及灭菌时应注意事项 26

（二）灭菌时应注意事项 28

五、氢离子浓度概说 30

（一）细菌生长、发育与酸硷度的关系 30

（二）酸与硷 32

（三）酸度与硷度 32

（四）水的离解 32

（五）氢游子浓度表示方法—pH值 32

（六）当量与克当量 33

（七）当量溶液 34

（八）酸硷度与离子酸度 34

（九）缓冲溶液——缓冲剂 34

（十）缓冲指数 35

一、氢离子浓度的测定法 36

二、指示剂 36

第四章　反应的测定 36

1．沙伦生氏指示剂 40

2．克拉克与路白斯二氏双色指示剂 40

3．米亥里斯氏单色指示剂 42

三、标准比色管的原理 42

四、缓冲液的制备 42

（一）沙伦生氏法 42

（二）克拉克-路白斯二氏法 43

（三）枸橼酸-磷酸盐缓冲液的配合法 44

（四）磷酸二氢钾和磷酸氢二钠混合缓冲液的配合法 44

五、标准比色管配制法 46

六、不用标准缓冲液进行比色 48

（一）单色指示剂比色法 48

1．单色指示剂标准管制备法（米亥里斯氏，表12） 51

2．单色指示剂标准管制备法（布莱斯劳氏，表13） 52

（二）双色指示剂比色法（吉利司派氏） 54

七、用比色法测定pH值的限制 56

1．缓冲力微弱的溶液 56

2．天然盐的误差 56

3．蛋白误差 57

4．醇误差 58

5．生物硷误差 58

6．温度误差 58

7．深色溶液的误差 58

8．二色性 58

9．氧化及还原剂误差 58

八、培养基酸硷度测定法 59

九、测定培养基反应的技术 60

一、培养基滤清法 61

（一）鸡蛋白澄清法 61

第五章　培养基的滤清、分装及灭菌法 61

（二）棉花过滤法 62

（三）滤纸过滤法 62

二、培养基的分装法 62

（一）分装法及注意点 62

（二）斜面培养基制作法 63

（三）平板培养基制作法 63

三、培养基灭菌法 64

第六章　各种培养基的制造法 64

一、基础培养基的制备与检查法 64

（一）双缩脲反应 65

（二）配尔费里也夫氏蛋白胨定量法 67

（三）用泽伦森-格夫立洛夫氏简法测定胺氮 68

（四）色氨酸的定性法 72

（五）配斯科夫氏的游离色氨酸定量法 72

（六）阿西尔氏总氮微量比色测定法 73

（七）伊瓦诺夫氏干燥成分定量法 75

（八）阿瑟啸夫氏可氧化物质定量法 75

（九）酶的概说 77

二、“液体”蛋白胨、胰蛋白酶和木瓜酶水解产物的实验室制法 79

（一）马丁氏蛋白胨 79

（二）加料马丁氏蛋白胨 79

（三）制造蛋白质的酶水解产物的常规 80

1．用富尔德氏及格罗斯氏法测定胰腺或其他蛋白酶源的蛋白分解活性 80

2．酪蛋白标准溶液的制法（配斯科夫氏法） 83

（四）何廷盖尔氏消化液的制备法 85

（五）谢尔宾氏消化液的制法 86

（六）肉水解产物快速制备法 87

（七）肉骨粉和鱼粉制备培养基的方法 88

（八）凝血水解产物培养基 89

（九）卵类水解产物的制法 90

（十一）阿瑟啸夫氏用木瓜酶制备肉消化液 91

（十）乳渣水解产物的制法 91

（十二）用酵母制备培养基 92

制备酵母的自体溶解产物 92

（十三）大麦或燕麦肉培养基的制法 94

（十四）酪蛋白制消化液的快速法 95

三、基础培养基制造法 96

（一）牛肉浸液培养基 96

（二）肝消化汤培养基 98

（三）血消化汤培养基 100

（四）胎盘消化汤培养基 100

（五）肝浸液培养基 101

（六）心肌漫液培养基 102

（七）心肌消化液培养基 102

（八）牛肉膏汤培养基 104

（九）牛肉膏制造法 105

（十）黄豆膏代替牛肉膏的制法 107

（十一）猪皮胶代替牛肉膏培养基 108

（十二）黄豆粉浸液汁培养基 108

（十三）豆汤培养基 109

（十四）黄豆芽漫液培养基 110

（十五）蛋白胨水培养基 112

（十六）豆饼消化液 112

（十七）干少鱼消化汤培养基 113

（十八）用液体胰化胨之类的酶水解液制培养基 114

1．胰化胨肉汤 114

2．迅速测定靛基质和硫化氢形成用胰肉汤 115

3．黑斯氏培养基 116

4．测定大肠菌值用的埃克曼氏培养基 117

（十九）嵇曼俐氏新鲜人尿培养基 117

（一）琼脂培养基 118

四、固体、半固体培养基的制造法 118

（二）明胶培养基（需氧菌用） 119

（三）明胶培养基（厌氧菌用） 120

（四）半固体培养基 121

五、鉴别培养基的制造法 122

增菌用培养基 123

（一）氯化镁、孔雀绿培养基（沙门氏菌增菌用）（简称M.M．培养基） 123

（二）亚硒酸盐增菌培养基（沙门氏菌增菌用） 123

（三）胆汁甘油增菌培养基（伤寒及副伤寒杆菌增菌用） 124

（四）分离伤寒杆菌及副伤寒杆菌的增菌培养基 125

甲、煌绿增菌培养基 125

乙、四硫磺酸钠肉浸液 126

（五）0.5％葡萄糖肉汤猪胆汁（伤寒杆菌增菌用） 127

（六）G-N肉汤培养基（痢疾杆菌增菌用） 128

（七）硝酸盐增菌培养基（痢疾杆菌增菌用） 128

（一）痢疾杆菌6小时快速诊断培养基 129

（八）痢疾增菌培养基 129

培养伤寒、副伤寒及痢疾杆菌群用培养基 129

（二）痢疾杆菌24小时快速诊断用培养基 131

（三）胆汁葡萄糖肉浸液培养基 132

（四）亚硫酸铋琼脂培养基 133

（五）胆汁培养基 135

强选择性培养基 136

（一）S-S琼脂平板（上海市卫生防疫站改良方法） 136

（二）S-S琼脂平板（郑翼宗和钱玉昆二氏改良方法） 137

（三）景冠华氏的15％牛胆汁S-S琼脂平板 138

（四）黄豆芽汤为基础的S-S琼脂平板 139

（五）S-S琼脂平板（培养沙门氏及志贺氏菌属） 141

（六）去氧胆酸盐-枸橼酸盐琼脂培养基（分离伤寒和痢疾杆菌） 143

（七）水化氯醛培养基（作分离肠道致病菌及抑制变形杆菌扩散生长） 145

（八）分离溶血性链球菌培养基 146

（九）含胆汁、煌绿肉汤培养基（鉴别炭疽杆菌与伪炭疽杆菌） 147

弱选择性培养基 148

（一）中国蓝蔷薇酸琼脂平板培养基（鉴别肠道杆菌） 148

（二）远藤氏（Endo）培养基（鉴别肠道杆菌） 150

（三）伊红亚甲蓝琼脂培养基 151

（四）麦康盖氏（Mac Conkey）琼脂培养基（分离伤寒和痢疾杆菌） 151

（五）金启桓氏以大豆汤为基础的麦康盖氏培养基（分离肠道病原菌） 153

（六）利伯尔曼-阿塞尔氏培养基（鉴别肠道菌用） 153

（七）山德立叶氏培养基（同上） 154

（八）去氧胆酸盐琼脂培养基（同上） 155

含各种糖的有色培养基 156

糖培养基的概说 156

糖培养基的制造 160

（一）双糖含铁培养基（鉴别肠道杆菌） 160

（二）半固体三糖培养基（同上） 162

（三）克力格拉氏含铁双糖培养基（同上） 165

（四）糖发酵管培养基（同上） 167

（五）毕透尔氏鼠李糖培养基（鉴别沙门氏菌属） 168

（六）肠道细菌综合性发酵鉴别管 168

（七）肠道细菌综合性发酵鉴别管 170

（八）希斯氏血清水培养基（鉴别白喉杆菌） 172

（九）菊糖血清液培养基（鉴定肺炎双球菌） 173

含有只能被一定细菌利用的物质培养基 174

（一）恩热灵氏琼脂培养基（鉴别假白喉杆菌和白喉杆菌用） 174

（二）枸橼酸盐琼脂培养基（鉴别产气杆菌） 175

（三）尿素培养基（鉴别变形杆菌） 176

（四）郑新武氏尿素培养基（用尿液制备） 178

（五）酒石酸盐（Tartrate）培养基（鉴别副伤寒杆菌） 179

（六）6.5％食盐肉浸液培养基（鉴定肠链球菌） 180

（八）氰化钾（KCN）培养基（区别肠道菌中不同的菌属） 181

（七）40％胆汁肉浸液培养基（同上） 181

测定还原能力用的培养基 182

Ⅰ．加染料的培养基 182

（一）美蓝液 182

（二）石蕊液 183

（三）靛红 183

（四）中性红 183

（五）罗特伯格氏琼脂培养基 183

（六）奥米良斯基氏琼脂培养基 183

Ⅱ．加硝酸盐的培养基 184

（一）硝酸盐培养基 184

（二）雷-奥（Reed-Orr）二氏硝酸盐培养基 186

测定分解葡萄糖产酸强度的培养基 186

（一）葡萄糖蛋白胨水（作甲基红及服泼二氏试验用） 186

3．服格斯与泼鲁斯高二氏原法 188

2．培立脱氏法 188

1．利富逊氏法 188

测定细菌产生硫化氢能力的培养基 189

（一）醋酸铅培养基（鉴别副伤寒杆菌） 189

（二）雷-奥二氏醋酸铅肉汤培养基（厌气菌用） 189

测定细菌产生靛基质（吲哚）用的培养基 190

（一）蛋白胨水培养基 190

（二）雷-奥二氏蛋白胨水 191

测定淀粉水解能力用培养基 192

（一）淀粉琼脂培养基（区别白喉杆菌之重型与轻型菌株） 192

（二）淀粉血清肉漫液（区别白喉杆菌之轻型与重型菌株） 192

测定细菌能否水解马尿酸钠用培养基 193

（一）马尿酸钠肉汤培养基 193

水类、乳类细菌检验用培养基 194

（一）麦康盖氏液体培养基（双料浓度） 194

（五）可塞氏枸橼酸钠培养基 195

（四）胰蛋白胨水 195

（二）麦康盖氏琼脂平板培养基 195

（三）葡萄糖蛋白胨水 195

（六）琼脂平板培养基 196

（七）乳蛋白胨培养基 196

（八）克斯列尔氏培养基（改良法） 196

（九）蚁酸盐、蓖麻油酸盐培养基 197

（十）结晶紫中性红胆盐琼脂培养基 198

六、特殊培养基的制造法 199

白喉杆菌培养基 199

（一）马铃薯杆菌培养物滤液培养基 199

（二）勃克（Buck）氏改良吕氏血清培养基 200

（三）格氏改良吕氏血清培养基 201

（四）原吕氏（Loeffler）血清斜面培养基（分离培养白喉杆菌） 201

（五）鸡蛋培养基（培养白喉杆菌） 202

（六）亚碲酸钾甘油液的配制法（白喉培养采标本用） 203

（七）亚碲酸钾培养基（分离及鉴定白喉杆菌） 204

（八）爱立克（Elek）氏白喉杆菌毒力试验用培养基 205

百日咳杆菌培养基 206

（一）水解酪蛋白培养基 206

（二）马、克二氏百日咳培养基 207

（三）博德-姜戈二氏培养基（分离百日咳杆菌） 208

布氏杆菌培养基 210

（一）肝浸液 210

（二）改良布氏杆菌培养液（上海市卫生防疫站） 211

（三）枸橼酸钠-胰蛋白？肉汤 211

（四）胰？琼脂培养基 212

（五）含硫堇及硷性复红肉浸液 212

（七）含硷性复红肝浸液琼脂 213

（六）含硫堇肝漫液琼脂 213

土拉杆菌培养基 214

（一）凝固卵黄培养基 214

（八）含龙胆紫肝浸液琼脂 214

（二）胱氨酸血液琼脂培养基 215

鼠疫杆菌培养基 215

（一）3％氯化钠血琼脂培养基 215

流行性感冒杆菌培养基 216

（一）巧克力培养基 216

（二）血蛋白胨培养液 217

霍乱弧菌培养基 218

（二）丢当氏琼脂培养基 218

（一）硷性蛋白胨水 218

（一）巧克力培养基 218

淋病双球菌培养基 218

自血液标本中分离病原菌的参考 219

（一）采血时间问题 219

（二）采血部位问题 220

（三）血液内抗菌药物及抗体处理问题 220

（四）采血时注意事项 220

（五）血液中可能发现的病原菌 221

血液培养用培养基的制作及选择 222

（一）牛肉浸液培养基（加适量的枸橼酸钠及葡萄糖等） 222

（二）牛肉浸液培养基（加适量的酚红指示剂等） 223

（三）含对氨苯甲酸肉浸液（解除磺胺类药物的抑菌作用） 224

（四）含硫酸镁培养液（解除金、土、四、链、新霉素及多粘菌素等在培养基内的抑菌作用） 225

（一）含血液肉漫液 226

（二）含血清肉浸液 226

营养要求较高的细菌培养基 226

（三）培养脑膜炎球菌及淋球菌的肉浸液 227

（四）血液琼脂平板培养基 227

（五）牛皮胶琼脂培养基 228

（六）腹水肉汤培养基 228

（七）腹水琼脂平板培养基 229

（八）培养脑膜炎双球菌用半固体琼脂培养基 229

（九）纯血培养基 230

（十）供脑脊髓液分离培养用培养基 230

鉴定致病性葡萄球菌用培养基 230

（一）却浦曼氏培养基 230

（二）碲酸钾、甘氨酸琼脂平板培养基 231

（一）三氮化钠血液琼脂培养基 232

从混杂培养中分离细菌用培养基 232

（二）勃罗尔与李莱二氏苯乙醇琼脂培养基 233

（三）含亚碲酸钾、氯化锂培养基 233

（四）水化氯醛培养基 234

（五）含75％氯化钠琼脂平板培养基 235

肺炎球菌分离用培养基 235

（一）爱弗雷（Avery）氏培养基 235

作细菌对磺胺类药物敏感试验用培养基 236

（一）无蛋白胨牛肉浸液 236

作菌苗无菌试验用培养基 236

（一）赫卿（Hitchen）氏培养基 236

牛乳培养基 237

（一）脱脂牛乳 237

（三）紫牛乳培养基 238

（二）全乳培养基 238

（四）亚甲蓝牛乳培养基 239

螺旋体培养基 240

（一）野口氏钩端螺旋体培养基 240

（二）杰门氏半固体培养基 241

耐酸杆菌培养基 242

（一）甘油肉漫液培养基 242

（二）番茄琼脂培养基 243

结核杆菌培养基 244

甲、大跃进中创制的结核杆菌快速培养基 247

（一）小川氏变法结核杆菌快速培养基 247

（二）结核杆菌三至七日快速培养基 248

（三）结核杆菌七日快速培养基 249

（四）结核杆菌快速液体培养基 250

（五）结核菌均匀培养基 251

（六）三天培养出结核菌法 252

乙、国内外一般结核杆菌培养基之介绍 252

（一）柯氏等半固体琼脂培养基 252

（二）胎盘水解产物培养基 253

（三）甘油血清培养基 254

（四）黄豆培养基 254

（五）配曲拉格耐尼氏培养基 256

（六）豌豆培养基 257

（七）含青霉素血琼脂培养基 257

（八）泼-培二氏培养基 258

（九）凯司纳氏培养基 259

（十）友门氏培养基 260

（十一）综合培养基 261

（十三）隆氏培养基 263

（十四）苏通氏马铃薯培养基（培养卡介苗菌种） 263

（十五）甘油胆汁马铃薯培养基（培养卡介苗菌种） 265

（十六）刘温斯坦氏培养基 266

（十七）赫罗氏蛋黄琼脂培养基 267

（十八）罗本诺氏鸡蛋培养基 268

（十九）土路豆氏培养基 269

（廿）杜赛氏培养基 270

（廿一）石竹苷血液培养基 271

培养厌氧菌用的培养基 271

（一）罗森诺氏脑髓培养基（培养微嗜氧菌用） 272

（二）硫乙醇酸钠肉浸液培养基 273

（三）疱肉培养基（分离及培养厌氧菌） 274

（四）肝块肉汤培养基 275

（五）罗宾逊-斯托瓦尔氏培养基 275

（六）含有煮熟鸡蛋白块的肉汤培养基 276

真菌培养基 276

（一）沙氏培养基 276

（二）玉蜀黍粉琼脂培养基 277

（三）娄林氏培养基 277

（四）麦芽汁培养基 278

（五）酵母浸出液培养基 278

（六）酵母水培养基 280

（七）哥罗特科娃氏培养基 280

（八）马铃薯汁培养基 281

（九）葡萄糖淀粉培养基 281

（十）改良依默逊氏培养基 282

（十一）蜂蜜琼脂培养基 282

（十二）胡萝卜马铃薯琼脂培养基 283

（十三）米饭培养基（培养发癣菌） 283

（十五）易煌氏酸性香蕉培养基（培养酵母菌） 284

（十六）沙氏真菌保存用培养基 284

（十四）俞炳麟氏酸性蔗糖豆芽培养基（培养酵母菌） 284

黑热病利什曼原虫培养基 285

（一）杨敷海氏培养基 285

（十七）豌豆粉代替琼脂培养白色念珠菌 285

（二）罗氏含血色蛋白盐水培养基 286

（三）三恩（N.N.N.）培养基 287

（一）常用的固体培养基（伯、德二氏） 288

（二）常用而简单的液体培养基 288

溶组织阿米巴培养基 288

（三）牛血清胨水培养基 289

阴道滴虫培养基 290

（一）血清盐水培养基 290

（四）溶组织阿米巴培养法之简单介绍 290

（二）胱胨肝麦糖培养基 291

（三）肝漫汤培养基 292

（四）肉肝汤培养基 293

（五）帕氏阴道滴虫培养基 294

其他供检验用的数种培养基 295

（一）鉴定绿脓杆菌培养基 295

（二）链球菌溶纤维素激酶培养基 296

（三）葡萄糖淀粉半固体琼脂培养基（保存淋菌棉拭用） 298

（四）产生色素用培养基 299

（五）脱水培养基 299

（六）干燥培养基制法（北京中苏友谊医院） 301

（七）试制干燥培养基成功（上海生物制品研究所） 302

（八）鸡卵培养基 303

（九）链球菌溶血素生产用培养基 303

一、重要保存液和抗凝管的配制法 304

（一）甘油缓冲液粪便保存剂（保存粪标本用） 304

第七章　常用保存液、溶液和试剂的配制法 304

（二）含对氨苯甲酸缓冲甘油盐水保存液（保存粪标本用） 305

（三）彭亨氏和伊氏粪便保存液 306

（四）文-腊二氏霍乱弧菌保存液 306

（五）爱氏羊血球保存液 307

（六）枸橼酸钠抗凝管的配制法 308

（八）pH7.0缓冲液 309

（九）pH7.2缓冲液 309

（七）枸橼酸-枸橼酸钠-葡萄糖溶液 309

（十三）柯卡氏溶液 310

（十二）缓冲葡萄糖石炭酸溶液 310

（十四）缓冲甘油病毒组织保存液 310

（十一）缓冲生理盐水 310

（十）磷酸盐缓冲溶液 310

（十六）生理盐水 311

（十七）消毒用碘酒溶液 311

（十五）甘油2.5％缓冲液病毒防腐剂 311

（廿）0.2％碳酸钠溶液 312

（十九）福尔马林酒精消毒液 312

（廿一）粘液素溶液 312

（十八）70％酒精溶液 312

（一）一当量硫酸溶液 313

（二）一当量盐酸溶液 313

二、当量溶液配制法 313

（四）一当量碳酸钠溶液 314

（五）氢氧化钠当量溶液的配制法 314

（三）十分之一当量（N/10）盐酸溶液 314

（三）0.5％溴麝香草酚蓝酒精溶液 315

（二）1％酸性复红水溶液的配制法 315

（四）亚甲蓝还元试验用试剂及其试验法 315

（一）1％孔雀绿溶液的配制法 315

常用试剂配制法 315

（七）中性红指示剂酒精溶液 316

（六）石蕊指示剂酒精溶液 316

（八）1％酚红水溶液的配制法 316

（五）霍乱红试验试剂及其试验法 316

（十）1％中国蓝水溶液的配制法 317

（十一）1％蔷薇酸酒精溶液的配制法 317

（九）吲哚试剂的配制法 317

（十四）硝酸盐还原试剂的配制法及其试验法 318

（十三）服-泼二氏试剂配制法及其试验法 318

（十五）胆汁溶解试剂的配制法及其试验法 318

（十二）甲基红试剂配制法及其试验法 318

（十六）作马尿酸水解试验用的三氯化铁试剂的配制法及其试验法 319

其他溶液配制法 320

（一）林格氏溶液配制法（白脱油稀释用） 320

（一）粗制胆盐的制法（尤锡根和张鸿富） 321

（二）混合胆盐（梁植权和方慈祺） 321

附录一　胆盐的制造 321

（一）琼脂的制造法 322

附录二　琼脂的制造、检查和回收 322

（二）琼脂中的果胶含量检查法 322

（四）透析胆盐简易法（北京中苏友谊医院） 322

（三）透析胆盐（郑翼宗） 322

（三）琼脂的回收法 323

附录三 324

（一）青霉素酶的制造 324

（二）马铃薯粉的制备 325

（三）人乳粉的制备 325

附录四　猪胆汁中提取甘氨胆酸代替去氧胆酸钠（广东省铁路医院） 326

附录五　常用仪器及用具介绍 328

（一）电气火油两用？箱 328

（二）恒温水箱 329

（三）恒温箱 330

（四）普通天平 330

（七）三脚铁架 332

（六）石棉？ 332

（八）铁座 332

（五）牛角匙 332

附录六　英中名词对照表 333

附录七　常用元素原子量表 343

（十二）杜布氏液体培养基 362