生物技术原理与实验PDF电子书下载

上篇　生物技术原理 3

第一章　基因工程技术 3

第一节　克隆载体 3

第二节　重组DNA技术 15

第三节　基因文库的构建 28

第四节　PCR技术 40

第五节　核酸分子杂交技术 52

第六节　DNA测序技术 59

第七节　转基因技术 66

第一节　蛋白质的提取与粗分级 77

第二章　蛋白质及酶工程技术 77

第二节　蛋白质的细分级 94

第三节　蛋白质的鉴定 124

第四节　蛋白质结构测定 129

第五节　定点突变技术 139

第六节　蛋白质的原核和真核表达技术 142

第七节　酶工程（酶蛋白工程）概述 144

第三章　细胞工程技术 166

第一节　植物细胞工程技术 166

第二节　动物细胞工程技术 200

第一节　微生物发酵方式 219

第四章　发酵工程技术 219

第二节　发酵过程 226

第五章　其他常用技术 234

第一节　功能基因的克隆技术 234

第二节　基因表达分析技术 239

第三节　RNA干扰（RNAi）技术 242

第四节　双向电泳技术 245

第五节　毛细管电泳技术 249

第六节　酵母双杂交技术 251

实验一　碱裂解法提取质粒DNA 261

第六章　基因工程实验 261

下篇　基本实验 261

实验二　DNA酶切及琼脂糖凝胶电泳 265

实验三 大肠杆菌感受态细胞的制备和质粒DNA的转化 273

实验四　PCR扩增DNA特异性片段 277

实验五　真核生物基因组DNA的提取 280

实验六　植物组织总RNA的提取及变性电泳 284

实验七　Northern杂交 290

实验八　基因组文库的构建 295

实验九　cDNA文库的构建 298

实验十　动物转基因技术——动物细胞的磷酸钙沉淀转化法 304

实验十一　植物转基因技术——农杆菌介导的花芽浸泡法转化拟南芥植株 308

实验十二　植物转基因技术——农杆菌介导的双子叶植物叶盘转化法 312

第七章　蛋白质及酶工程实验 316

实验一　生物组织总蛋白质的提取 316

实验二　考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 319

实验三　变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）测定蛋白质亚基分子量 322

实验四　大肠杆菌中重组蛋白质的诱导表达与亲和层析纯化 328

实验五　蛋白质的免疫印迹分析 335

实验六　Edman降解法测定小肽的氨基酸序列 339

实验七　蛋白质结晶 343

实验八　酶的基本特性 345

实验九　绿色荧光蛋白（GFP）定点突变 350

第八章　细胞工程实验 356

实验一　MS培养基母液的配制 356

实验二　培养基的配制与灭菌 359

实验三　植物培养材料的灭菌与接种 361

实验四　种胚的离体培养 363

实验五　愈伤组织的诱导 365

实验六　悬浮细胞系的建立 366

实验七　植物原生质体的游离和融合 368

实验八　草莓遗传转化实验（农杆菌介导法） 371

实验九　水稻悬浮细胞的遗传转化实验（基因枪法） 373

实验十　动物组织的消化培养及单细胞的获得 375

第九章　发酵工程实验 377

实验一　凝固型酸奶的制作 377

实验二　纤维素酶生产（一）——固体发酵法生产纤维素酶 380

实验三　纤维素酶生产（二）——分级盐析法纯化纤维素酶 383

实验四　纤维素酶生产（三）——凝胶过滤层析法纯化纤维素酶 386

实验五　四环素发酵代谢曲线的绘制 389

第十章　综合设计实验 402

实验一　溶菌酶的纯化、结晶与酶活测定 402

实验二　种子蛋白质含量及组成分析 402

实验三　植物蛋白酶的分离纯化与鉴定 403

实验四 绿色荧光蛋白的原核表达、纯化及鉴定 404

实验五　转绿色荧光蛋白基因烟草的获得及鉴定 404

实验六　大肠杆菌碱性磷酸酶定点诱变与酶活分析 405

附录 407

附录一　实验室规则 407

附录二　实验室安全及防护 409

附录三　常用仪器的使用 414

附录四　常用因特网网址 434

附录五　常用缓冲溶液及试剂的配制 436

附录六　常用实验数据 445