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分子诊断学实验指导
分子诊断学实验指导

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医药卫生

  • 电子书积分:9 积分如何计算积分?
  • 作 者:钱士匀主编
  • 出 版 社:北京:高等教育出版社
  • 出版年份:2006
  • ISBN:7040202379
  • 页数:168 页
图书介绍:本书为“21世纪中国高等学校医学检验专业课程体系与教学内容的创新与实践”教学改革课题的组成部分。参加编写的人员为长期从事一线教学的高级职称教师,并注意吸收有临床实践经验的教授参加。本套教材充分体现现代教育思想和观念,体现该教学改革研究课题形成的培养目标、办学模式、课程体系、教学内容和手段的改革成果。尤其有利于调动学生积极性,解决问题的能力和创新精神的培养。本套教材的编写思路摈弃既往教材编写中求多求全的思想,内容的取舍及轻重要符合教材的要求。学生应掌握的基本知识点,要详尽介绍,切实体现“三基”,突出“检验”的专业特色。在编写的版式上做到重点突出、图文并茂、生动活泼、精炼易懂。重点和难点内容阐述清楚,一般内容评价性、概括性地客观介绍。对名词术语、基本概念、原理、公式推导等必须准确科学。注意介绍新知识、新方法、新技术,反映学科的发展趋势。每章后应有存在问题与发展趋势的小结。并在各章末附参考书目及网络资源网址。教材后附光盘。其中包括教学重点、Power Point 多媒体教案、模拟试题、案例分析、需进一步扩展补充的知识和参考材料(含影像资料)、典型实验和规范化实验操作的视频材料等。既可供教师组
《分子诊断学实验指导》目录

第一章 核酸的分离与纯化 1

第一节 真核基因组DNA的分离纯化 1

实验1 蛋白酶K-苯酚抽提法 3

【附】甲酰胺解聚联合透析法 5

实验2 外周血白细胞DNA的提取(NaI法) 6

实验3 小样本中基因组DNA的分离 7

第二节 质粒DNA的分离纯化 9

实验4 裂解法提取质粒DNA 10

实验5 聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA 13

第三节 真核细胞RNA的制备 15

实验6 异硫氰酸胍-酚-氯仿一步(AGPC)法制备总RNA 17

实验7 氯化锂-尿素法制备总RNA 19

实验8 Trizol专用试剂分离RNA 21

实验9 磁珠分离mRNA 22

第二节 PCR反应体系的组成 25

第一节 PCR原理 25

第二章 聚合酶链反应 25

实验10 大肠杆菌的PCR检测 26

实验11 β-肌动蛋白(β-Actin)的RT-PCR检测 28

实验12 乙型肝炎病毒(HBV)实时荧光定量PCR 29

第三章 核酸的鉴定与分析 33

第一节 分光光度法测定核酸的浓度和纯度 33

实验13 紫外分光光度法检测核酸的浓度及纯度 33

实验14 荧光分光光度法检测核酸浓度 34

第二节 核酸凝胶电泳法 36

实验15 DNA的琼脂糖凝胶电泳 39

实验16 RNA的甲醛变性凝胶电泳 41

实验17 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 44

实验18 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 47

第三节 核酸杂交技术 50

实验19 Southern印迹 50

【附1】核酸探针标记的方法 56

【附2】杂交反应的条件及参数的优化 62

实验20 Northern印迹 63

【附3】RNA变性电泳方法 65

实验21 斑点及狭缝印迹法 67

实验22 组织细胞内mRNA的原位杂交 70

第四节 DNA测序技术 74

实验23 Sanger双脱氧核苷酸末端终止法 74

【附1】Maxam-Gilbert化学降解法测定DNA序列 79

【附2】DNA序列的自动化测定 82

第四章 基因工程——综合性试验 86

实验24 DNA的限制性酶切反应 87

实验25 DNA片段的回收 90

【附1】SYBR?Green Ⅰ核酸荧光染料——快速而灵敏的核酸检测试剂 92

实验26 DNA的重组连接 93

【附2】可以提高连接效率的化学试剂 95

实验27 感受态细胞的制备(CaCl2法)与转化 96

实验28 重组质粒的筛选与鉴定 98

实验29 外源基因的诱导表达与检测 102

第五章 其他相关的分子诊断技术 109

实验30 PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP) 110

实验31 PCR-单链构象多态性分析(PCR-SSCP) 113

实验32 蛋白质印迹技术 116

实验33 等位基因特异的寡核苷酸 120

(PCR-ASO) 120

实验34 甲基化特异性基因扩增 122

实验35 基因芯片 126

【附】分子生物学实验设计与流程 131

参考文献 134

附录一 核酸和蛋白质数据 135

附录二 常用仪器介绍 140

附录三 常用试剂、缓冲液的配制 147

附录四 分子生物学中常用技术 153

附录五 常用词汇的中英文对照 157

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