全国高等农林院校“十二五”规划教材 生物化学实验指导 第5版PDF电子书下载

实验室规则及安全守则 1

实验记录和实验报告 2

第一部分 生物化学实验技术原理与生物大分子的分离纯化 3

一、电泳技术 3

二、离心技术 8

三、层析技术 13

四、紫外可见分光光度技术 19

五、生物大分子的分离纯化 23

第二部分 生物化学及分子生物学实验 30

实验1 可溶性总糖的测定——地衣酚-硫酸法 30

实验2 还原糖含量的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法 32

实验3 可溶性糖的硅胶G薄层层析 34

实验4 Teles微量快速乳糖测定法 36

实验5 血糖含量测定——邻甲苯胺法 38

实验6 粗脂肪的索氏提取 40

实验7 甲醛滴定法测定氨基氮 42

实验8 植物水溶性氨基酸测定——茚三酮法测定氨基酸总量 44

实验9 植物水溶性氨基酸的薄层层析 46

实验10 动物蛋白质的水解及纸层析法分离氨基酸 48

实验11 谷物种子中赖氨酸含量的测定 51

实验12 玉米种子中色氨酸含量的测定 54

实验13 植物游离脯氨酸含量的测定 55

实验14 动物材料赖氨酸、色氨酸、甲硫氨酸含量的测定 57

实验15 牛乳中酪蛋白的提取 62

实验16 蛋白质的两性反应及等电点的测定 63

实验17 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳测定蛋白质等电点 65

实验18 蛋白质含量的测定——凯氏定氮法 68

实验19 蛋白质含量的测定——考马斯亮蓝G-250法 72

实验20 蛋白质含量的测定——紫外吸收法 74

实验21 蛋白质含量的测定——双缩脲法 76

实验22 蛋白质含量的测定——Folin酚法 78

实验23 血清γ球蛋白的分离——分子筛凝胶层析法 80

实验24 醋酸纤维薄膜电泳法分离动物血清蛋白质 84

实验25 蛋白质相对分子质量的测定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 87

实验26 蛋白质相对分子质量的测定——葡聚糖凝胶层析法 90

实验27 免疫印迹法鉴定未知蛋白质 92

实验28 植物核DNA的提取和检测 95

实验29 酵母RNA的制备、鉴定及含量测定 97

实验30 动物肝脏DNA的提取 100

实验31 动物组织RNA的提取及鉴定 102

实验32 豌豆叶片中总RNA的提取及mRNA的分离 105

实验33 紫外吸收法测定核酸含量 108

实验34 定磷法测定核酸含量 110

实验35 地衣酚法测定RNA含量 112

实验36 二苯胺显色法测定DNA含量 113

实验37 从聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA 114

实验38 脉冲电场凝胶电泳 116

实验39 RNA甲醛变性凝胶电泳 118

实验40 低熔点琼脂糖凝胶电泳破碎法回收DNA片段 120

实验41 大肠杆菌质粒DNA的提取和鉴定 122

实验42 质粒DNA的限制性核酸内切酶酶切 125

实验43 琼脂糖凝胶电泳法分离鉴定质粒DNA的限制性核酸内切酶酶切片段 127

实验44 聚合酶链式反应实验技术 130

实验45 菌落聚合酶链式反应 132

实验46 逆转录聚合酶链式反应 134

实验47 微卫星标记 136

实验48 大肠杆菌感受态细胞的制备——氯化钙法 138

实验49 淀粉酶活力的测定 140

实验50 谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力的测定 142

实验51 超氧化物歧化酶的提取和活力测定 144

实验52 菠萝蛋白酶的动力学测定 148

实验53 底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数的测定 152

实验54 胰蛋白酶及其抑制剂的制备和活力测定 154

实验55 多酚氧化酶的制备和化学性质 156

实验56 血清乳酸脱氢酶同工酶的分离与测定——聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法 158

实验57 酯酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳 163

实验58 过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳 166

实验59 大蒜细胞超氧化物歧化酶的提取与分离 168

实验60 结晶乳酸脱氢酶的制备 170

实验61 维生素A的提取和含量测定——三氯化锑比色法 174

实验62 动物组织维生素D的提取和含量测定——三氯化锑比色法 177

实验63 维生素B1含量的测定——荧光法 180

实验64 维生素B1含量的测定——质量法 183

实验65 维生素C含量的测定——2,6-二氯酚靛酚法 184

实验66 叶酸的提取和含量测定——茚三酮比色法 187

实验67 植物总黄酮的提取和含量测定 189

实验68 丙酮酸含量的测定 191

实验69 糖酵解中间产物的鉴定 193

实验70 脂肪酸的β-氧化——酮体的生成及其测定 195

实验71 应用纸层析法鉴定酶促转氨基作用 197

实验72 发酵过程中无机磷的利用 199

附录 201

一、结果分析与数据处理 201

二、标定摩尔浓度酸、碱溶液的配制 205

三、常用数据表 207

四、常用缓冲液的配制方法 210

主要参考文献 217