生物化学实验原理与技术PDF电子书下载

实验室规则 1

实验记录与实验报告 3

基础实验 4

实验一 可溶性糖的硅胶G薄层层析 5

实验二 糖酵解中间产物的鉴定 6

实验三 葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖 7

实验四 肾上腺素对血糖浓度的影响 9

实验五 脂肪的粗提取和定量测定 10

实验六 脂肪酸的β-氧化——酮体的生成及其测定 12

实验七 氨基酸的分离与鉴定——滤纸层析法 15

实验八 氨基移换反应的定性鉴定 17

实验九 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳 20

实验十 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳 24

实验十一 影响酶促反应的因素——温度、pH、激活剂及抑制剂 28

实验十二 乳酸脱氢酶酶活力测定 31

实验十三 紫外吸收法测定蛋白质含量 33

实验十四 双缩脲法测定浆总蛋白质含量 35

实验十五 Folin-酚法测定血清蛋白质含量 37

实验十六 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量 39

实验十七 样品中总氮量的测定——微量凯氏定氮法 41

实验十八 蛋白质基本性质分析与结构预测 43

实验十九 小分子与蛋白质相互作用的模拟与分析 47

实验二十 蛋白质抗原T细胞表位在线预测 51

实验二十一 蛋白质抗原B细胞表位预测 56

实验二十二 动物组织细胞基因组DNA提取 60

实验二十三 植物DNA的提取 63

实验二十四 DNA的琼脂糖凝胶电泳 64

实验二十五 酵母RNA的提取与地衣酚显色测定法 66

实验二十六 维生素A的提取和含量测定——三氯化锑比色法 68

实验二十七 维生素B1含量的测定——荧光法 72

实验二十八 维生素B1含量的测定——质量法 75

实验二十九 维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法） 76

实验三十 维生素C含量的测定——碘量法 79

实验三十一 ATP的生物合成和发光法测定含量 81

实验三十二 碳纳米管电极定量测定维生素C 84

实验三十三 碳纳米管电极定量测定尿酸 87

实验三十四 肌肽清除羟自由基活性测定 90

实验三十五 谷胱甘肽清除DPPH自由基活性测定 92

综合实验 94

综合实验一 酵母蔗糖酶的提取纯化及性质研究 95

分实验一 蔗糖酶的提取与初步纯化 96

分实验二 蔗糖酶的离子交换层析纯化 98

分实验三 蔗糖酶活性和蛋白质含量的测定 100

分实验四 反应时间对产物的影响 104

分实验五 pH对蔗糖酶活性的影响 105

分实验六 温度对蔗糖酶活性的影响 107

分实验七 蔗糖酶米氏常数的测定 108

分实验八 正交法测定三种因素对蔗糖酶活性的影响 110

综合实验二 兔肌磷酸化酶b的提取与纯化 114

分实验一 兔肌总蛋白的提取和初步纯化 114

分实验二 葡聚糖凝胶过滤层析纯化 116

分实验三 离子交换层析纯化 117

分实验四 SDS-PAGE电泳、蛋白含量测定以及纯化率计算 119

综合实验三 阿斯巴甜的合成与高效液相色谱纯化 122

分实验一 苯丙氨酸甲酯盐酸盐的合成 122

分实验二 阿斯巴甜二肽粗产物的合成 123

分实验三 高效液相色谱纯化 126

综合实验四 肿瘤细胞的培养和活力测定 128

分实验一 实验用品的准备及试剂配制 128

分实验二 肿瘤细胞的复苏、传代与冻存 131

分实验三 台盼蓝染色方法检测细胞活力 134

分实验四 吖啶橙染色方法检测细胞活力 136

分实验五 MTT方法检测细胞活力 137

分实验六 LDH方法检测细胞活力 139

综合实验五 肿瘤抗原MAGE-4的RT-PCR检测 142

分实验一 细胞总RNA的提取 143

分实验二 反转录合成cDNA 145

分实验三 PCR及产物检测 146

综合实验六 原核型重组表达质粒的构建及融合蛋白的诱导表达和纯化 150

分实验一 目的基因的PCR扩增技术 153

分实验二 DNA分子的琼脂糖凝胶电泳 157

分实验三 微量质粒DNA提取与纯化（碱裂解法） 160

分实验四 紫外分光光度法测定核酸浓度 163

分实验五 限制性核酸内切酶消化DNA 165

分实验六 琼脂糖凝胶中DNA片段的纯化与回收 169

分实验七 DNA分子的体外重组（目的基因与载体的连接） 170

分实验八 大肠杆菌感受态细胞制备 171

分实验九 大肠杆菌转化与重组克隆的筛选鉴定 173

分实验十 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 177

分实验十一 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） 178

分实验十二 直链淀粉树脂亲和层析纯化MBP融合蛋白 180

综合实验七 真核型重组表达质粒的构建及哺乳动物细胞转染与检测 183

分实验一 真核型重组表达载体pEGFP-4.1N的构建 186

分实验二 细胞的传代与培养 188

分实验三 无内毒素质粒的大量提取 190

分实验四 脂质体法转染真核细胞 192

分实验五 EGFP在真核细胞中的瞬时表达 195

分实验六 G418筛选稳定转染细胞株 197

分实验七 真核细胞基因组DNA的提取 199

分实验八 Southern杂交 201

分实验九 总RNA的提取和电泳 206

分实验十 RT-PCR 208

分实验十一 Northern杂交 209

分实验十二 Western blotting检测 211

分实验十三 细胞免疫荧光法 216

附录 218

附录一 玻璃仪器的洗涤及一些常用的洗涤剂和干燥剂 219

附录二 试剂及试剂配制与保存 220

附录三 层析技术有关介质性质及数据 229

附录四 生化实验室常见仪器的使用方法 230

附录五 实验室常用数据表 235

参考文献 238