生物化学实验技术教程PDF电子书下载

第一篇 生物化学实验技术原理第一章 离心技术及原理 2

1.1 离心基本原理 2

1.2 离心机的结构与分类 4

1.3 离心机的应用 5

第二章 层析技术及原理 9

2.1 层析概述 9

2.2 常用层析技术 11

第三章 电泳技术及原理 22

3.1 电泳概述 22

3.2 常用电泳技术 25

第四章 光谱技术及原理 32

4.1 分光光度法 32

4.2 旋光分析法 35

第五章 生物大分子的分离纯化 39

5.1 分离纯化概述 39

5.2 生物材料的选择和前处理 40

5.3 常用生物大分子分离纯化技术 42

5.4 样品的保存 45

第二篇 生物化学模块实验第一模块 糖化学实验技术 48

1.1 糖化学实验技术 48

实验1 糖的还原作用 48

实验2 糖的旋光性和变旋现象（糖含量测定） 50

1.2 糖的含量测定 51

实验1 血糖浓度的测定（邻甲苯胺法） 51

实验2 蒽酮比色法测定植物组织中总糖含量 53

实验3 3,5-二硝基水杨酸法测定总糖与还原糖含量 55

第二模块 脂质化学实验技术 58

2.1 脂肪提取及含量和性质测定 58

实验1 脂肪酸价的测定 58

实验2 油脂皂化值的测定 59

实验3 粗脂肪提取与含量的测定（索氏抽提法） 60

实验4 血清甘油三酯含量测定（乙酰丙酮显色法） 62

2.2 血清胆固醇的定量测定 64

实验1 磷硫铁法测定血清胆固醇含量 64

实验2 邻苯二甲醛法测定血清胆固醇含量 66

实验3 乙酸酐法测定血清胆固醇含量 67

2.3 肝中丙二醛含量的测定 68

第三模块 蛋白质化学实验技术 71

3.1 蛋白质与氨基酸的性质实验 71

实验1 蛋白质的颜色反应 71

实验2 蛋白质的沉淀作用 74

实验3 蛋白质的盐析和透析 75

3.2 牛乳中酪蛋白的制备 77

3.3 蛋白质和氨基酸的层析分离 77

实验1 氨基酸纸层析 77

实验2 氨基酸的薄层层析 79

实验3 离子交换层析分离蛋白质 80

实验4 凝胶过滤层析测定蛋白质的相对分子质量 81

3.4 蛋白质和氨基酸含量测定 83

实验1 植物组织中赖氨酸含量的测定 83

实验2 考马斯亮蓝（G-250）比色法测定蛋白质含量 84

实验3 Folin-酚法测定蛋白质含量 86

实验4 紫外分光光度法测定蛋白质含量 87

实验5 微量凯氏定氮法测定蛋白质含量 88

3.5 蛋白质电泳分析 91

实验1 乙酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白 91

实验2 聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离血清蛋白质 93

实验3 SDS-PAGE测定蛋白质的相对分子质量 95

实验4 等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点 98

实验5 SDS-PAGE检测植物中热激蛋白（银染法） 100

第四模块 核酸化学实验技术 104

4.1 核苷酸的分析测定 104

实验1 纸电泳法测定腺苷三磷酸（ATP）含量 104

实验2 薄层层析法分离核苷酸 106

实验3 离子交换柱层析分离单核苷酸 107

实验4 5′-核苷酸含量测定（过碘酸氧化法） 108

4.2 核酸含量的测定 110

实验1 定磷法测定核酸含量 110

实验2 紫外分光光度法测定核酸含量 112

4.3 核酸的提取及分析 114

实验1 动物肝DNA的提取及含量测定（二苯胺法） 114

实验2 酵母RNA的提取及组成成分鉴定 117

实验3 动物肝组织中核酸的制备与测定 118

第五模块 酶学及维生素实验技术 122

5.1 酶的性质实验 122

实验1 温度与pH对唾液淀粉酶活性的影响 122

实验2 酶的专一性 124

实验3 唾液淀粉酶的激活与抑制作用 125

5.2 酶促反应动力学实验 127

实验1 影响酶活力的因素——正交实验法 128

实验2 胰蛋白酶米氏常数的测定 131

实验3 过氧化氢酶米氏常数测定 132

5.3 酶活力的测定 134

实验1 淀粉酶的活力测定 134

实验2 酸性磷酸酯酶活力测定 137

实验3 胆碱酯酶活力测定 140

实验4 肝丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性测定 141

实验5 血清氨基转移酶活性的测定——赖氏比色法 143

实验6 超氧化物歧化酶（SOD）活力测定 146

实验7 溶菌酶的分离纯化和活力测定 149

5.4 同工酶分析 150

实验1 琼脂糖凝胶电泳法分离LDH同工酶及血清LDH总活力的测定 151

实验2 植物过氧化物酶同工酶测定（凝胶圆盘电泳） 154

5.5 维生素的定量测定 156

实验1 维生素B1的定量测定（荧光光度法） 156

实验2 维生素B2的定量测定（荧光光度法） 158

实验3 2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C含量 159

实验4 磷钼蓝法测定维生素C含量 161

第六模块 物质代谢实验技术 164

6.1 糖代谢实验 164

实验1 肌糖原酵解作用 164

实验2 胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 166

实验3 发酵过程无机磷的利用 168

6.2 脂质代谢实验 169

实验1 油料种子脂肪转化为糖的定性实验 169

实验2 脂肪酸β-氧化的测定 170

第七模块 常见生物活性物质分离分析技术 172

实验1 花色素的分离、纯化与测定 172

实验2 熊果酸的制备和测定 174

实验3 儿茶素的提取和测定 175

实验4 血红素的提取和测定 177

实验5 番茄红素的提取和测定 179

实验6 大豆皂苷的提取和测定 180

实验7 阿魏酸的提取和测定 181

第八模块 分子生物学基础实验技术 184

8.1 植物基因组DNA和质粒DNA的提取及回收 184

实验1 SDS（十二烷基硫酸钠）法提取植物基因组DNA 184

实验2 CTAB（十六烷基三乙基溴化铵）法提取植物总DNA 185

实验3 碱裂解法提取质粒DNA 187

实验4 煮沸法提取质粒DNA 189

实验5 低熔点琼脂糖法回收DNA 191

实验6 透析袋法回收DNA 192

8.2 RNA的提取及其鉴定 193

实验1 植物总RNA提取（Trizol法）及其电泳鉴定 193

实验2 哺乳动物mRNA的制备和纯化 195

实验3 RNA分子杂交（Northern blotting） 196

8.3 基因扩增及扩增产物的检测 198

实验1 PCR扩增基因及扩增产物的电泳检测 198

实验2 水稻Actin基因的RT-PCR及电泳检测 203

8.4 DNA重组、转化及原核表达 205

实验1 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA的转化 205

实验2 禽流感病毒HA1基因原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的诱导表达 206

第九模块 设计性实验选题 210

选题1 不同环境条件对水果维生素C含量的影响 210

选题2 绿色植物色素的分离与鉴定 211

选题3 卵磷脂的提取和鉴定 212

选题4 壳聚糖的制备及性质鉴定 212

选题5 食用真菌多糖的制备、纯化及性质鉴定 213

选题6 细胞膜的制备及其成分（磷脂、胆固醇）分析 214

选题7 植物凝集素的提取及生物学活性研究 215

选题8 花生油是否掺杂棉子油的初步鉴定 216

选题9 螺旋藻藻蓝蛋白的分离、纯化与鉴定 216

选题10 奶粉中真实蛋白质含量测定方法研究 217

选题11 血清白蛋白的分离、纯化与鉴定 217

选题12 植物α-淀粉酶抑制剂的分离及活性研究 218

选题13 血液乙酰胆碱酯酶的分离纯化及活力测定 219

选题14 离子交换层析法纯化碱性磷酸酶 219

选题15 猪胰糜蛋白酶的制备和纯度鉴定 220

选题16 多酚氧化酶（PPO）的制备和活力测定 221

选题17 溶菌酶的制备及其酶活力测定 222

选题18 牛心线粒体分离、组分分离和酶学分析 222

选题19 水稻某一基因的简单克隆分析 223

选题20 猪胰岛素基因的原核表达载体的构建 223

第十模块 实验论文撰写 225

附录 227

1 常用缓冲液的配制 227

2 常用标准溶液的配制与标定 233

3 常用酸碱指示剂 237

4 市售酸碱试剂的浓度与比重 237

主要参考文献 239

参考网页地址 241