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细胞生物学实验技术
细胞生物学实验技术

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生物

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  • 作 者:章静波,黄东阳,方瑾主编
  • 出 版 社:北京:化学工业出版社
  • 出版年份:2011
  • ISBN:9787122113559
  • 页数:245 页
图书介绍:本书介绍了显微镜技术、组织学基本技术、细胞结构与成分的显示技术、细胞生理实验、细胞培养和分析、干细胞培养及诱导分化、细胞周期分析、细胞成分的分离与分析、细胞工程基础技术等经典细胞生物学实验。
《细胞生物学实验技术》目录

第一章 显微镜技术 1

基本方案1 普通显微镜的构造及使用方法 1

基本方案2 相差显微镜的构造及使用方法 6

基本方案3 荧光显微镜的构造及使用方法 8

基本方案4 透射电子显微镜与超薄切片技术 11

基本方案5 扫描电子显微镜与样品制备 15

备择方案1 激光扫描共聚焦显微镜的构造及使用方法 18

备择方案2 激光捕获显微切割技术 25

支持方案 显微摄影技术 27

第二章 组织学基本技术 30

基本方案1 石蜡切片技术 30

基本方案2 冰冻切片技术 32

基本方案3 苏木素-伊红(hematoxylin-eosin stain,HE)染色技术 33

备择方案1 吉姆萨(Giemsa)染色技术 35

备择方案2 组织学切片的Feulgen染色技术 35

备择方案3 中性脂肪油红O显示(Oil red O stain)技术 37

备择方案4 组织切片的碱性磷酸酶染色技术(ALP钙-钴法) 38

备择方案5 组织切片的琥珀酸脱氢酶染色(SDH stain)技术 39

备择方案6 组织切片的核酸甲苯胺蓝显示技术 40

第三章 细胞结构与成分的显示技术 41

基本方案1 细胞中DNA和RNA的显示 41

基本方案2 细胞中过氧化物酶的显示 45

基本方案3 细胞中碱性蛋白的显示 46

基本方案4 一氧化氮合酶的显示 47

基本方案5 细胞中线粒体的活体染色 51

基本方案6 细胞中糖类和脂类的显示 52

基本方案7 酸性磷酸酶的显示 54

备择方案1 细胞中液泡系的活体染色 55

备择方案2 培养细胞完整生物膜系统的观察 56

备择方案3 微丝的染色及形态观察 57

支持方案 间接免疫荧光技术显示胞质微管 59

第四章 细胞生理实验 62

基本方案1 细胞的运动 62

基本方案2 细胞的吞噬活动 63

基本方案3 细胞自噬检测方法 65

备择方案 细胞膜通透性的测定 69

第五章 细胞培养和分析 71

基本方案1 细胞的原代培养 71

基本方案2 培养细胞的形态观察和计数 74

基本方案3 培养细胞生长曲线的绘制和分裂指数的测定 77

基本方案4 细胞集落形成实验 79

基本方案5 器官培养方法 80

基本方案6 鸡胚尿囊培养法 83

备择方案1 细胞的传代培养 85

备择方案2 MTT对细胞生长状况的检测 86

备择方案3 表皮细胞的培养 87

备择方案4 骨骼肌细胞的培养 89

备择方案5 内皮细胞的培养 90

备择方案6 神经胶质细胞的培养 91

备择方案7 骨髓间充质干细胞的培养及其体外诱导分化 92

支持方案1 细胞的冻存与复苏 93

支持方案2 细胞显微测量技术 95

支持方案3 细胞培养中支原体污染的检测 96

支持方案4 放射自显影术及同位素液闪测定 100

第六章 干细胞培养及诱导分化 106

基本方案1 人胚胎干细胞传代培养 106

基本方案2 人胚胎干细胞的诱导分化 108

基本方案3 肿瘤干细胞的分离纯化 113

备择方案 诱导多潜能干细胞 118

支持方案 小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的分离及饲养层的制备 120

第七章 细胞周期分析 124

基本方案 流式细胞仪检测细胞周期 124

备择方案1 细胞同步化实验 126

备择方案2 通过分析CDK的活性检测细胞周期 127

第八章 细胞成分的分离与分析 130

基本方案1 差速离心法分离细胞和细胞器 130

基本方案2 密度梯度离心法分离细胞组分 132

基本方案3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质 134

基本方案4 Western印迹技术 135

备择方案 免疫沉淀法 137

支持方案 蛋白质的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳 138

第九章 细胞工程基础技术 143

基本方案1 细胞融合实验 143

基本方案2 单克隆抗体的制备 146

备择方案1 染色体提前凝集标本的制备 150

备择方案2 显微注射技术(核移植) 152

备择方案3 DNA转染实验(绿色荧光蛋白) 154

支持方案 体外受精技术 158

第十章 细胞凋亡的测定 162

基本方案1 凋亡细胞的普通光镜观察 162

基本方案2 凋亡细胞的荧光显微镜观察 164

基本方案3 凋亡细胞的琼脂糖凝胶电泳检测——DNA梯状条带(DNA ladder) 166

备择方案1 凋亡细胞的电镜观察 167

备择方案2 凋亡细胞的原位末端标记法检测 168

备择方案3 凋亡细胞的单细胞电泳检测 169

备择方案4 凋亡细胞的流式细胞法检测 171

支持方案 磷酸酰丝氨酸外化的流式细胞术分析 171

第十一章 染色体技术 173

基本方案1 染色体标本制备 173

基本方案2 端粒及端粒酶显示技术 176

备择方案1 染色体显带技术 186

备择方案2 性染色质的制备 191

备择方案3 姐妹染色单体交换实验 194

备择方案4 染色体原位杂交技术 195

支持方案 染色体实验试剂配制 197

第十二章 分子细胞生物学技术 200

基本方案1 DNA提取及检测 200

基本方案2 RNA提取及检测 203

基本方案3 Southern印迹技术 204

基本方案4 Northern印迹技术 208

基本方案5 RNA干扰技术 211

基本方案6 酵母双杂交技术 215

备择方案1 RT-PCR 220

备择方案2 原位PCR技术 221

备择方案3 荧光定量PCR技术 224

备择方案4 基因芯片技术 226

备择方案5 原位缺口平移技术 231

备择方案6 染色质免疫沉淀法 233

备择方案7 昆虫杆状病毒表达系统 238

备择方案8 GST pull-down分析 241

参考文献 244

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