生物化学实验技术PDF电子书下载

第一章 缓冲液的使用 1

第一节 生物化学实验中为什么要使用缓冲液 1

第二节 缓冲液的原理及配制 1

一、pH值和缓冲液 1

二、使用缓冲液时的一些注意事项 5

参考文献 5

第二章 生化物质的制备 6

第一节 起始材料及前期处理 6

一、起始材料 6

二、前期处理 6

第二节 常用的分离纯化技术 7

一、离心作用 7

二、密度梯度离心 8

四、溶液的浓缩 9

三、过滤 9

五、透析 10

第三节 一些生化物质的制备 11

一、细胞组分及细胞器的分级 11

二、蛋白质的提取 12

三、糖类的制备 13

四、核酸的制备 15

五、脂类的制备 18

参考文献 21

第三章 生化物质的分析检测方法 22

第一节 光谱学方法 22

一、电磁辐射和光谱 22

二、光吸收的定量 24

三、紫外和可见光谱法 27

四、荧光光度法 28

五、红外光谱法 29

六、核磁共振光谱法 32

第二节 放射性同位素的使用 39

一、基本原理 39

二、测量仪器及方法 41

三、放射自显影 46

四、实验室防护 53

第三节 一些特定生化物质的定性和定量 59

一、糖类 59

二、氨基酸、肽和蛋白质 66

三、核苷酸及核酸 74

四、脂类和类固醇 77

五、其他物质的测定 79

参考文献 81

一、抗原 83

第一节 基本原理 83

第四章 免疫学方法在生化实验中的应用 83

二、抗体 84

三、抗原与抗体的反应 85

第二节 抗血清的制备和鉴定 86

一、抗血清的制备 86

二、抗血清的鉴定及分装保存 89

第三节 免疫扩散 89

一、双向免疫扩散 89

二、单向免疫扩散 90

三、逆向免疫扩散 91

第四节 免疫标记 91

一、酶标抗体技术 91

二、生物素亲和素免疫标记试剂的制备方法和技术 96

三、胶体金标记抗体技术 98

一、基本原理 102

第五节 放射免疫测定 102

二、测定方法 103

三、操作步骤 103

参考文献 104

第五章 生物大分子的分离纯化及纯度鉴定 105

第一节 生物大分子分离纯化的必要性及意义 105

一、总体考虑 106

二、分离程序和进展 107

第二节 离心技术 108

一、原理和应用 108

二、超离心技术 109

第三节 生物大分子的抽提 120

一、酶的抽提 120

二、用于生化物质分离的沉淀技术 123

一、层析概论 126

第五节 层析技术 126

第四节 各种分离纯化技术的基本理论依据 126

二、凝胶过滤 129

三、吸附层析 137

四、离子交换层析 139

五、高效液相层析(HPLC) 146

六、亲和层析 152

七、其他分析用层析技术 160

第六节 电泳技术 168

一、电泳概论 168

二、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) 175

三、等电聚焦(IEF) 185

四、几种其他的PAGE 204

五、双向电泳及印迹转移(blotting)技术 206

六、等速电泳 217

七、几种其他电泳技术 243

八、电泳仪器及设备 292

参考文献 293

第六章 蛋白质及酶分子的结构与性质研究 294

第一节 蛋白质化学结构研究技术 294

一、氨基酸组成的分析技术 294

二、酶蛋白的断裂及肽图谱 296

三、酶蛋白的断裂及分肽技术 299

四、N-端氨基酸的测定方法 302

五、C-端氨基酸的测定方法 308

六、序列分析技术 311

七、糖蛋白中糖的组成与连接方式的研究方法 315

第二节 蛋白质空间结构研究技术 321

一、从蛋白质的一级结构预测二级结构 321

二、酶或蛋白质的结晶 327

三、酶的溶液构象研究法 333

四、计算机辅助设计在蛋白质结构研究中的应用 352

第三节 酶的物化性质及催化性质 354

一、凝胶过滤法测定蛋白质的分子量 354

二、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分子量 356

三、酶蛋白溶液的特性黏度 361

四、酶蛋白的沉降系数及相对分子质量 364

五、等电聚焦测定等电点 365

六、凝胶电聚焦测定等电点 368

七、酶的电镜观察 371

八、酶的催化性质研究法 377

第四节 酶分子的化学修饰 390

一、氨基酸残基的化学修饰 390

二、酶分子中必需基团的测定 405

参考文献 406