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前言 1

第一章组织形态学基本技术 1

第一节概述 1

目 录 1

第二节组织形态学研究方法 2

一、大体解剖学技术 2

二、组织学技术 3

三、电子显微镜技术（超薄切片技术） 4

四、组织化学与细胞化学技术 5

五、细胞凋亡检测 5

第三节实验室设备 5

一、大体解剖室的设备 5

二、组织学实验室设备（切片室设备） 6

附实验室工作注意事项 7

第一节人体（尸体）解剖技术 9

一、尸体固定 9

第二章大体解剖技术 9

二、一般解剖方法 11

三、几种特殊标本的制作方法 13

第二节病理尸体解剖与法医病理尸体解剖技术 15

一、尸体外表各部位的检验 15

二、尸体解剖 17

三、病理学及法医病理学系统尸体解剖主要检查内容 20

四、几种特殊检查方法 24

五、病理学及法医病理学应用举例 25

附录 27

附1解剖尸体规则 27

附2 中华人民共和国公共安全行业标准法医学尸体解剖（GA/T147-1996） 28

附3 法医病理学检材的提取、固定、包装及送检方法（GA/T148-1996） 35

附4 法医学尸表检验（GA/T149-1996） 42

第三章实验动物 46

第一节实验动物的处死 46

一、实验动物的抓取及固定 46

二、实验动物的处死 48

一、实验动物的解剖 49

第二节标本的取材 49

二、取材方法及注意事项 50

第三节标本的固定 51

一、固定的目的 51

二、固定的对象 51

四、固定时应注意的事项 52

五、几种常用的固定液 52

三、固定剂必须具备的性质和条件 52

第四章石蜡切片 55

第一节石蜡切片组织固定后的处理 55

一、组织块修整 55

二、洗涤 55

三、脱水 56

四、透明或媒浸 57

五、透蜡（浸蜡）与包埋 58

一、石蜡切片前的准备 61

第二节石蜡切片 61

二、石蜡切片 62

三、切片中容易出现的问题、原因及解决方法 63

附 火棉胶切片方法 64

第三节染色 65

一、染色的历史 66

二、染料 66

三、染色的原理 68

四、染色的化学作用 69

第五章冰冻切片 70

第一节冰冻切片的取材及处理 70

一、冰冻切片的取材 70

二、组织的速冻 71

第二节冰冻切片 72

一、常用的冰冻切片方法 72

二、冰冻切片的处理 72

四、冰冻切片的粘片剂 73

五、制作冰冻切片的注意事项 73

三、冰冻切片的烤干 73

第六章常用的染色方法 74

第一节一般常用的染色方法 74

一、整体染色法 74

二、组织块染色法 74

三、蜡带染色法 74

四、切片染色法 74

五、其他染色方法 75

第二节切片染色前的准备 75

一、玻璃器皿的清洗 75

二、常用染色试剂的配制 76

第三节苏木精－伊红染色方法（常规染色法） 80

一、苏木精－伊红染色的基本原理 80

二、苏木精－伊红染色的基本方法 81

三、二甲苯在H-E染色中的作用 83

四、酒精在H-E染色中的作用 83

六、分化和蓝化 84

五、水洗切片的作用 84

七、切片制作中出现的问题、原因及解决方法 85

第四节几种常用的特殊染色方法 85

一、脂类的显示方法 86

二、胶原纤维染色法 89

三、弹力纤维染色法 92

四、网状纤维染色方法 94

五、心脏传导系统的染色方法 97

七、横纹肌组织染色 99

六、早期心肌缺血病变组织染色 99

八、羊水角化鳞状上皮细胞的染色 100

九、含铁血黄素染色方法 103

十、血红蛋白的染色 104

十一、纤维蛋白染色 105

十二、索沟的染色方法 106

十三、乙型肝炎表面抗原染色法 107

十四、淀粉样变性的染色方法 109

一、瑞特染色法 111

第一节涂片染色方法 111

第七章非切片染色方法 111

二、巴氏染色法 112

三、迈－格－吉染色方法 113

第二节硅藻的检测方法 114

第三节血管注射 115

一、取材 117

二、固定 117

第一节细胞化学和组织化学的基本方法 117

第八章细胞化学和组织化学方法 117

三、制片 119

四、注意事项 119

第二节无机物的检测方法 119

一、显示组织中钙沉着的方法 119

二、铜质显示法 120

三、显示铅的玫棕酸法 120

四、显示砷的Castel法 121

五、显示锌的Okamoto双硫腙法 121

一、糖类染色方法 122

第三节有机物的检测方法 122

二、RNA和DNA的显示方法 124

第四节显示酶的组织化学方法 126

一、显示碱性磷酸酶的Gomori改良钙－钴法 127

二、显示酸性磷酸酶的萘酚AS-BI法 128

三、显示非特异性酯酶的六偶氮副品红方法 129

四、显示胆碱酯酶的组织化学方法 130

五、显示琥珀酸脱氢酶的方法 131

第九章超微病理及电子显微镜技术 133

第一节医学超微结构与电子显微术发展现状 133

第二节电子显微镜的基本结构及功能 134

一、生物医学电镜种类 134

二、透射式电子显微镜的基本结构及功能 135

第三节常规电子显微技术装备 136

一、透射电子显微镜 136

二、超薄切片机 136

一、透射电子显微镜标本常规制备 137

第四节超薄切片技术 137

三、制刀机 137

二、扫描电子显微镜标本常规制备 149

第十章免疫组织化学技术概述 151

第一节概述 151

第二节免疫组织化学基本技术方法 151

一、抗体的准备 151

三、抗原的修复 152

四、染色 152

二、组织材料的处理 152

第三节免疫组织化学常用试剂和处理方法 154

一、固定剂 154

二、防脱片剂（黏附剂） 154

三、封固剂 154

四、酶消化液 155

五、其他溶液 155

六、过氧化物酶标记显色液 156

第四节免疫电镜技术 158

七、免疫组织化学染色中常出现的问题及处理方法 158

一、组织固定 159

二、组织包埋 159

三、免疫电镜标记物 161

四、免疫染色 163

五、其他免疫电镜技术 165

第十一章计算机显微图像分析技术 166

第一节概述 166

第二节显微图像分析系统 166

一、显微图像分析系统的组成 166

二、数字图像处理原理 168

三、图像处理的基本步骤 168

四、计算机图像分析测试的注意事项 171

第三节 图像分析在生物医学中的应用 172

一、常用的定量技术 172

二、图像分析在细胞形态与功能的研究中的应用 173

二、常用的体视学术语 174

一、图像分析与体视学的关系与区别 174

第四节图像分析与体视学 174

第五节细胞形态测量参数及意义 176

第六节图像分析研究设计及实施 178

一、图像分析研究的设计 178

二、形态定量和图像分析研究的实施 179

第七节国内外图像分析仪简介 181

一、国内生产图像分析仪的情况简介 181

二、国外图像分析仪的情况简介 185

一、PCR基本原理 186

第十二章PCR技术在生物组织学中的应用 186

第一节PCR技术基本原理及操作 186

二、PCR的基本操作步骤 187

三、PCR基本反应体系 188

四、PCR条件的优化 188

五、PCR引物设计原则 190

六、防止PCR实验中的污染及对策 190

三、RNA提取方法 191

二、基本实验前的准备 191

一、RNA分离的原理 191

第二节 RT-PCR技术在生物组织学的应用及操作 191

四、RT-PCR 196

第三节PCR-SSCP技术在生物组织学的应用及操作 198

一、PCR-SSCP的基本原理 198

二、PCR-SSCP的种类 198

三、注意事项 200

四、PCR-SSCP技术在生物组织学中的应用 201

第四节原位PCR在生物组织学的应用及操作 201

一、原位PCR技术的基本原理 201

二、原位PCR的操作方法 201

三、原位PCR中应注意的几个问题 202

四、原位PCR技术的组织生物学应用 203

第五节其他PCR技术简介 204

第六节组织DNA的提取方法 205

一、新鲜血液中白细胞DNA的提取 205

三、甲醛固定或石蜡切片组织DNA提取 207

二、新鲜组织及培养组织细胞的DNA提取 207

第十三章 电泳技术在组织生物学中的应用及操作 210

第一节电泳概述 210

一、电泳的概念及基本原理 210

二、影响电泳的因素 211

第二节 蛋白质电泳技术 212

一、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 212

二、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 214

三、等电聚焦 214

四、蛋白印迹技术 215

五、蛋白显色方法 216

第三节 DNA电泳技术 218

一、琼脂糖电泳 218

二、非变性聚丙烯酰胺凝胶 220

三、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 221

四、DNA电泳显色方法 222

五、PAGE凝胶中DNA的回收 223

一、毛细管电泳技术及其在蛋白质分析中的应用 225

第四节 电泳技术在组织生物学中的研究进展 225

二、毛细管电泳在DNA分析中的应用 226

第十四章核酸杂交技术在生物组织学中的应用 227

第一节核酸杂交技术在生物组织学中的应用概述 227

一、核酸杂交技术发展简述 227

二、核酸杂交的基本原理 228

三、影响核酸杂交的因素 228

四、核酸杂交技术在生物组织学中的应用 229

二、Southern印迹杂交技术基本步骤 230

第二节Southern印迹杂交及技术操作 230

一、Southern印迹杂交技术原理 230

三、Southern印迹杂交技术在组织生物学中的应用 234

第三节Northern印迹杂交技术及操作 234

第四节原位杂交技术及操作 235

一、原位杂交技术的原理 235

二、原位杂交技术的发展历史 235

三、原位杂交技术的基本方法 235

二、斑点印迹杂交的方法 238

第五节斑点杂交技术及操作 238

一、斑点印迹杂交的原理 238

第六节探针的种类及制备 239

一、探针的种类 239

二、探针的标记物 240

三、标记方法 240

第十五章基因芯片技术在组织生物学上的应用及展望 242

第一节基因芯片技术的基本原理和类型 242

一、基本概念及原理 242

二、基因芯片的主要类型 242

三、基因芯片检测 243

四、基因芯片的制作方法 243

第二节基因芯片技术的应用 245

一、测序与人类基因组研究 245

二、基因芯片在法庭科学上的应用 245

三、临床医学诊断 245

第三节基因芯片技术展望 246

五、发现与疾病相关的新基因 246

四、基因芯片与肿瘤研究 246

一、技术在不断完善 247

二、应用展望 247

主要参考文献 248

附录 250

附录1实验室常用溶液及缓冲液的配制 250

一、常用酸溶液的简便配制 250

二、常用碱溶液的简便配制 251

三、常用盐溶液的配制方法 251

四、常用缓冲液的配制 252

附录2常用染色剂的名称、性质及作用 254

一、常用细胞核染色剂 254

二、常用细胞质染色剂 255

三、常用脂肪染色剂 256

四、常用其他染色剂 257

附录3常用试剂中英文对照 257