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目录 1

第一部分　微生物形态学研究法 1

Ⅰ　显微镜技术 1

一、光学显微镜的构造和使用 1

二、暗视野显微镜的使用 7

三、普通相差显微镜的使用 8

四、荧光显微镜的使用 9

五、透射电子显微镜的使用 11

六、扫描电子显微镜的使用 15

七、普通显微摄影术 19

Ⅱ　微生物的形态观察 24

实验一　细菌涂片的制备及简单染色法 24

实验二　革兰氏染色法 26

实验三　细菌荚膜染色法 28

实验四　细菌芽孢染色法 29

实验五　细菌鞭毛染色法 30

实验六　放线菌形态的观察 31

实验七　霉菌水浸标本的制备与观察 33

实验八　酵母菌子囊孢子的培养及染色观察 33

实验九　四大类微生物菌落的形态比较与识别 34

Ⅲ　微生物的大小与数量测定 36

实验十　微生物显微直接计数法 36

实验十一　稀释平板计数法 37

实验十二　稀释培养测数 40

实验十三　细菌生长曲线的测定 43

实验十四　微生物的大小测定 44

第二部分　培养基的配制与灭菌 47

Ⅰ　培养基 47

一、培养基的主要成分 47

二、培养基的类别 48

三、配制培养基的基本过程 51

四、固体曲料的配制 54

实验十五　牛肉膏蛋白胨培养基的制备 55

五、种子培养基和发酵培养基 55

实验十六　高氏Ⅰ号培养基的制备 58

实验十七　马丁氏培养基的制备 59

实验十八　血液琼脂培养基的制备 60

Ⅱ　灭菌和消毒 61

一、灭菌 61

二、过滤除菌 68

三、紫外线灭菌 70

四、化学药剂消毒与灭菌 70

实验十九　紫外线杀菌试验 76

实验二十　化学药剂对微生物的影响 77

第三部分　微生物的分离纯化技术 79

Ⅰ 微生物接种技术 79

一、接种前的准备工作 79

二、接种方法 81

实验二十一　土壤中好气性细菌的分离与计数（附划线分离法） 83

Ⅱ纯培养分离纯化技术 83

实验二十二　土壤中放线菌的分离与计数 85

实验二十三　土壤中真菌的分离与计数 85

实验二十四　土壤中厌气性细菌的分离与计数 86

实验二十五　土壤中纤维分解菌的分离 88

实验二十六　土壤中氨化细菌的分离 90

实验二十七　土壤中硝化细菌的分离 91

实验二十八　土壤中反硝化细菌的分离 92

实验二十九　土壤中固氮菌的分离和纯化 93

实验三十　土壤中磷细菌的分离 94

实验三十一　土壤中藻类的分离 95

实验三十二　弗兰克氏菌的分离 97

实验三十三　担子菌的弹射分离法 98

第四部分　微生物生理生化 100

实验三十四　酒精发酵试验 100

实验三十五　乳酸发酵试验 101

实验三十六　淀粉水解试验 102

实验三十七 甲基红和乙酰甲基甲醇试验 103

实验三十八　土壤中细菌、真菌呼吸作用强度的测定 104

实验三十九　营养及环境条件对微生物生长的影响 106

第五部分　微生物遗传 109

实验四十　利用紫外线诱变筛选营养缺陷型突变株 109

实验四十一　用亚硝酸诱变筛选乳糖发酵突变株 110

实验四十二　原生质体融合试验 112

实验四十三　细菌互补实验 114

实验四十四　细菌总DNA的提取 116

实验四十五　质粒DNA的提取 117

实验四十六　质粒DNA的快速检测 119

实验四十七　DNA的琼脂糖凝胶电泳 120

实验四十八　从凝胶中回收DNA 122

实验四十九　反转录聚合酶链反应（RT-PCR） 123

实验五十　PCR技术 125

实验五十一　微生物菌种保藏 127

Ⅰ 环境微生物学 132

实验五十二　水中溶解氧（DO）的测定 132

第六部分　应用微生物 132

实验五十三　废水化学需氧量（COD）测定 134

实验五十四　废水生化需氧量（BOD）测定 136

实验五十五　有机磷农药的降解 138

实验五十六　表面活性剂的降解 140

实验五十七　活性污泥菌胶团及生物相观察 141

实验五十八　生物污泥活性测定 143

实验五十九　富营养化湖中藻量的测定 144

实验六十　苏云金芽孢杆菌感染菜青虫 146

Ⅱ　杀虫微生物 146

实验六十一　球形芽孢杆菌感染蚊幼虫 147

实验六十二　白僵菌对昆虫的致病性测定 147

实验六十三　用小菜蛾幼虫测定苏云金杆菌制剂的毒力效价 149

实验六十四　用库蚊幼虫测定球形芽孢杆菌制剂的毒力效价 151

实验六十五　用管碟法测定春雷霉素的发酵液的生物效价 153

实验六十六　用倒转法测定井岗霉素发酵产品的生物效价 155

实验六十七　用比色法测定井岗霉素与产品的化学效价 157

实验六十八　食（药）用真菌菌种的分离培养 158

Ⅲ　食用真菌 158

实验六十九　食用菌菌种的提纯复壮与保藏 162

实验七十　食用菌菌种的生产 166

实验七十一　食（药）用真菌电泳实验 170

实验七十二　食用菌氨基酸含量的测定 174

实验七十三　食用菌多糖的提取与测定 178

实验七十四　药用多孔菌担孢子形态结构观察 179

实验七十五　显微操纵术与真菌单孢分离 183

Ⅳ　食品与发酵微生物实验 186

实验七十六　酸乳的制作及乳酸菌的分离 186

实验七十七　酱油的酿造 188

实验七十八　酱油中氨基酸含量的测定 189

实验七十九　红曲的制备及红方腐乳的制作 190

实验八十　黄酒的酿造 191

实验八十一　生料免蒸发酵工艺酿造蒸馏白酒 192

实验八十二　噬菌体的检查及效价测定 194

样品的采集送检 195

Ⅴ　微生物产品检测 195

实验八十三　菌落总数的测定 196

实验八十四　大肠菌群测定 198

实验八十五　沙门氏菌生化检验鉴别 201

实验八十六　志贺氏菌检验 207

实验八十七　金黄色葡萄球菌检验 209

实验八十八　溶血性链球菌检验 210

实验八十九　用艾姆氏试验（Ames test）检测诱变剂和致癌剂 212

附录一　常用培养基的配方 215

附录 215

附录二　常用染色液、缓冲液及试剂的配制 227

附录三　微生物混浊度计数法麦兰云度计的配制与菌数对照表 233

附录四　最大或然数统计表 233

附录五　食品卫生微生物学检验程序图示 235

附录六　常见沙门氏菌Salmonella spp.抗原表 240

附录七 微生物学实验生物安全 244

参考文献 247