植物组织培养教程PDF电子书下载

1绪论 1

1.1植物组织培养的一般概念 1

1.2植物组织培养的发展简史 4

1.2.1探索阶段（本世纪初至30年代中） 4

1.2.2奠基阶段（30年代中至50年代末） 5

1.2.3迅速发展阶段（60年代至现在） 8

1.3组织培养与农业的关系 10

2实验室的基本设备和一般技术 12

2.1 引言 12

2.2设备 12

2.2.1培养基室 12

2.2.2培养容器 13

2.2.3培养室 14

2.3技术 16

2.3.1玻璃器皿和塑料器皿的清洗 16

2.3.2灭菌 16

附录2.Ⅰ 植物组织无菌培养的一般步骤 22

附录2.Ⅱ 组织培养工作所需的各种用具 23

3培养基 26

3.1 引言 26

3.2培养基成分 27

3.2.1无机营养成分 27

3.2.2有机营养成分 33

3.2.3生长激素 34

3.2.4琼脂 35

3.2.5 pH 37

3.3培养基的选择 37

3.4培养基的制备 40

附录3.Ⅰ 植物组织培养基常用化合物分子量 43

附录3.Ⅱ原子量 46

4细胞培养 48

4.1 引言 48

4.2单细胞的分离 48

4.2.1由完整的植物器官分离单细胞 48

4.2.2由培养组织中分离单细胞 50

4.3悬浮培养 51

4.3.1一般技术 51

4.3.2细胞悬浮培养的培养基 55

4.3.3培养基的振荡 55

4.3.4悬浮培养细胞的同步化 57

4.3.5悬浮培养中细胞生长的计量 58

4.3.6培养细胞活力的测定 59

4.4单细胞培养 60

4.4.1单细胞培养方法 61

4.4.2影响单细胞培养的因子 66

4.5细胞培养的应用 70

4.5.1突变体选择 70

4.5.2工业应用 73

4.5.3诱导多倍性 75

附录4.Ⅰ 由篱天剑叶片分离叶肉细胞的机械方法 75

附录4.Ⅱ 酶解法分离烟草叶肉细胞的程序 76

5 细胞的全能性与器官发生 77

5.1 引言 77

5.2细胞分化 78

5.2.1影响维管组织分化过程的因子 79

5.2.2细胞分裂对木质部分化的必要性 82

5.3器官分化 84

5.3.1影响茎芽分化的因素 85

5.3.2茎芽分化的解剖学和细胞学 90

5.3.3表皮细胞的全能性 92

5.3.4冠瘿瘤细胞的全能性 95

6体细胞胚胎发生 97

6.1 引言 97

6.2体细胞胚胎发生的例证 98

6.3影响体细胞胚胎发生的因子 101

6.3.1生长调节物质 101

6.3.2氮源 104

6.3.3其他因子 105

6.4体细胞胚胎发生的解剖学和细胞学 105

6.5体细胞胚的成熟过程 107

6.6体细胞胚与合子胚的比较 108

6.7由单细胞到植株 109

6.8长期培养物形态发生潜力的丧失 109

6.8.1遗传说 110

6.8.2生理说 110

6.8.3竞争说 111

6.9细胞全能性的实际应用 111

6.9.1细胞全能性的应用 111

6.9.2人工种子 112

6.10结束语 114

附录6.Ⅰ 诱导体细胞胚胎发生的实验程序 115

7单倍体的产生 118

7.1 引言 118

7.2花药培养技术 119

7.3影响雄核发育的因子 120

7.3.1营养需要 120

7.3.2药壁因子 125

7.3.3花粉发育时期 126

7.3.4温度和光照 126

7.3.5供体植株的生理状态 128

7.4雄核发育单倍体的个体发生过程 129

7.4.1花粉单倍体的诱导 130

7.4.2雄核发育早期过程的4种途径 131

7.4.3雄核发育晚期过程的差异 133

7.5禾谷类植物花药培养中白化苗的形成 135

7.6离体小孢子和花粉培养 135

7.7通过远缘杂交产生单倍体 139

7.8单倍体植株的二倍化 140

7.9在高等植物中单倍性的意义 142

7.9.1概述 142

7.9.2单倍体在作物改良中应用的实例 143

7.10结束语 144

附录7.Ⅰ 烟草花药培养实验程序 146

8三倍体的产生 148

8.1 引言 148

8.2愈伤组织的形成 149

8.2.1外植体 149

8.2.2培养基 150

8.2.3物理因子 152

8.3愈伤组织的组织学和细胞学 153

8.4器官发生 154

8.4.1影响茎芽分化的因素 155

8.4.2茎芽的个体发生过程 160

8.5胚乳培养的应用 161

8.6结束语 162

9细胞遗传学研究 163

9.1引言 163

9.2培养细胞的一般特征 165

9.3核变异的起源 166

9.3.1初生愈伤组织 166

9.3.2建成愈伤组织 167

9.4影响离体培养细胞核型变异的因子 171

9.4.1培养基 171

9.4.2组织原有的倍数性 173

9.5核型变化和形态发生 173

9.6花粉植株中的倍数性变异 175

9.7嵌合性 178

9.8植株再生的遗传控制 179

9.9组织培养诱发变异的实际应用 180

9.9.1在再生植株中对变异体的选择 181

9.9.2在细胞水平上对变异体的选择 185

9.10离体入选的变异性状在再生植株中的表达和遗传 188

9.10.1变异体和突变体 189

9.10.2后生遗传和遗传 189

9.11结束语 190

10离体授粉 192

10.1 引言 192

10.2术语释义 194

10.3离体授粉的方法 194

10.4胚珠和子房培养 196

10.4.1胚珠培养 196

10.4.2子房培养 200

10.5离体授粉中影响结实的因子 201

10.5.1外植体 201

10.5.2培养基 202

10.5.3培养条件 205

10.5.4基因型 206

10.6离体授粉的应用 206

10.7结束语 207

11合子胚培养 209

11.1引言 209

11.2合子胚培养方法 210

11.2.1植物材料 212

11.2.2消毒方法 213

11.2.3胚的剥离 213

11.2.4胚乳看护培养 217

11.3对培养基和培养条件的要求 219

11.3.1无机盐 222

11.3.2碳水化合物和培养基的渗透压 224

11.3.3氨基酸和维生素 225

11.3.4天然的植物浸提物 226

11.3.5生长调节物质 228

11.3.6培养基的pH 228

11.3.7培养条件 229

11.4胚柄在胚培养中的作用 229

11.5早熟萌发 231

11.6胚分化不全的种子在培养中的形态发生 234

11.7显微手术实验 236

11.8寄生性被子植物胚和种子的培养 240

11.9胚愈伤组织的形态发生潜力 241

11.10实际应用 242

11.10.1获得稀有杂种 242

11.10.2单倍体的产生 245

11.10.3缩短育种周期 246

11.10.4种子生活力的快速测定 246

11.10.5稀有植物的繁殖 246

11.11结束语 247

12原生质体的分离和培养 248

12.1 引言 248

12.2原生质体的分离 249

12.2.1影响原生质体产量和活力的因子 250

12.2.2原生质体的净化 256

12.2.3原生质体活力的测定 257

12.3原生质体培养 257

12.3.1细胞壁的形成 259

12.3.2细胞分裂和愈伤组织的形成 260

12.3.3禾谷类植物原生质体培养 267

12.3.4植株再生 270

附录12.Ⅰ 用一步法制备烟草叶肉原生质体 271

附录12.Ⅱ 细胞筛孔径（μm）与目换算表 272

附录12.Ⅲ 离心机转数与离心力的列线图 273

附录12.Ⅳ用血球计数板计数原生质体的方法 274

13体细胞杂交 276

13.1引言 276

13.2原生质体融合 277

13.2.1自发融合 277

13.2.2诱发融合 277

13.2.3化学诱导融合的机制 281

13.2.4融合产物的细胞学 283

13.3杂种细胞的选择系统 285

13.4体细胞杂种植株的核型 291

13.5细胞质杂种 292

13.6体细胞杂种和胞质杂种的鉴定方法 295

13.7 通过原生质体摄入细胞器、微生物和DNA进行细胞的遗传饰变 295

13.7.1叶绿体移植 296

13.7.2核移植 298

13.7.3微生物移植 298

13.7.4外源DNA的摄入 299

13.7.5离体原生质体的其他用途 301

13.8结束语 301

附录13.Ⅰ 高pH－高浓度Ca2+诱导原生质体融合的实验程序 302

附录13.Ⅱ PEG诱导原生质体融合的实验程序 303

14植物脱毒技术 305

14.1 引言 305

14.2术语释义 306

14.3通过热处理消除病毒 307

14.4通过茎尖培养消除病毒 309

14.4.1外植体名称 309

14.4.2方法 309

14.4.3在茎尖培养中影响脱毒效果的因素 311

14.5通过愈伤组织培养消除病毒 320

14.6脱毒效果的检验 321

14.7无毒原种的保存 322

14.8脱毒植株的应用 323

14.9病毒以外病原菌的离体消除方法 323

14.10通过茎尖培养消除病毒的注意事项 324

14.11结束语 325

附录14.Ⅰ 马铃薯脱毒程序 326

15离体无性繁殖方法 328

15.1 引言 328

15.2兰花的繁殖 329

15.3微繁的一般方法 332

15.3.1培养物的建立 332

15.3.2茎芽增殖的3种途径 335

15.3.3离体形成的枝条的生根 341

15.3.4移栽 342

15.4影响微繁效果的若干因素 343

15.4.1培养基 343

15.4.2光照和温度 347

15.5木本植物的微繁 347

15.5.1外植体 348

15.5.2培养基的褐变 349

15.5.3间苯三酚（PG）的作用 350

15.6微繁的应用 350

15.7微繁方法的局限性 351

15.8结束语 352

附录15.Ⅰ 卡特兰微繁培养基成分 354

附录15.Ⅱ 兰花微繁培养基成分 356

附录15.Ⅲ 应用M S基本培养基进行微繁的一些栽培植物 358

附录15.Ⅳ 杜鹃花微繁培养基成分 364

附录15.Ⅴ草莓微繁培养基成分 365

16种质贮存 366

16.1 引言 366

16.2冷冻保存 367

16.2.1植物材料的性质 369

16.2.2冷冻前的处理 369

16.2.3冷冻防护剂 369

16.2.4冷冻 370

16.2.5贮存 373

16.2.6解冻 374

16.2.7重新培养 374

16.2.8细胞和器官冷冻保存后的存活率 375

16.3低温贮存 376

16.4结束语 377

附录16.Ⅰ 冷冻保存玉米悬浮培养细胞的程序 377