抗体工程 第2版PDF电子书下载

第一章 概论 1

第一节 抗体研究的历史 1

一、抗体一词的由来 1

二、抗体生成的理论 2

三、抗体的结构及其多样性 3

四、抗体产生技术 4

五、抗体研究大事记 5

第二节 抗体生成的免疫学基础 6

一、免疫细胞 6

二、免疫系统 8

三、B淋巴细胞的成熟 11

四、B淋巴细胞的活化 12

五、抗体生成的反馈调节 15

第三节 抗原与抗体 15

一、抗原 15

二、抗原抗体反应 16

三、免疫网络学说 17

第二章 抗体的结构与功能 19

第一节 抗体的分子结构 19

一、抗体分子的基本结构 19

二、抗体分子的功能区结构 21

三、免疫球蛋白超家族 23

四、免疫球蛋白的不均一性 24

五、抗体分子的附属成分 28

第二节 抗体分子的基因结构和重排 29

一、抗体基因的基本结构 30

二、可变区基因的重组及其机制 34

三、抗体多样性的来源 40

四、重链恒定区基因的重组和表达 41

五、Ig基因重组与B细胞的个体发育 44

第三节 抗体的生物学功能 46

一、抗原结合 46

二、效应功能 47

第三章 鼠源单克隆抗体 52

第一节 鼠源单克隆抗体的产生历史与原理 52

一、鼠源单克隆抗体的产生历史 52

二、鼠源单克隆抗体的制备原理 55

第二节 鼠源单克隆抗体的制备 56

一、小鼠单克隆抗体的制备 56

二、大鼠单克隆抗体的制备 71

第三节 鼠源单克隆抗体的应用 75

一、单克隆抗体在基础研究中的应用 75

二、单克隆抗体在医学研究及疾病诊断中的应用 79

三、单克隆抗体在人体内的应用 81

第四章 基因工程抗体 84

第一节 鼠单抗人源化 85

一、鼠单抗恒定区的人源化——人－鼠嵌合抗体 86

二、鼠单抗可变区的人源化 87

三、关于鼠单抗人源化的评价 91

第二节 小分子抗体 92

一、Fab 92

二、Fv和ScFv 93

三、单区抗体及最小识别单位 95

一、双价及多价抗体分子 96

第三节 双（多）价及双特异抗体分子 96

二、双特异抗体 99

第四节 抗体融合蛋白 101

一、含Fv段的抗体融合蛋白 101

二、含Fc段的抗体融合蛋白 103

第五章 抗体库技术 107

第一节 初期的抗体库 107

一背景 107

二、初期的抗体库 108

第二节 噬菌体抗体库技术 109

一、噬菌体展示技术 110

二、噬菌体抗体库 111

第三节 大容量抗体库 117

一、总抗体库的容量 118

二、总抗体库的多样性 120

第四节 抗体库技术的应用 122

一、制备人源抗体 122

二、应用抗体库技术改良抗体性能 123

第六章 转人－Ig基因小鼠 130

第一节 概述 130

第二节 酵母人工染色体技术 133

一、酵母人工染色体 133

二、YAC常用载体的基本特点 134

三、免疫球蛋白－YAC（Ig-YAC）基因组文库的构建及筛选 136

第三节 小鼠胚胎干细胞 137

第四节 基因敲除技术 140

一、制备基因敲除小鼠的主要步骤 140

二、小鼠免疫球蛋白基因敲除小鼠的制备 143

第五节 含人免疫球蛋白转基因小鼠的构建 143

一、人类免疫球蛋白基因的克隆和人Ig-YACs的构建 144

二、准备小鼠ES细胞 145

三、含人Ig-YACs酵母与鼠ES细胞的融合及克隆 145

四、人Ig-YACs-ES细胞导入鼠卵母细胞 145

五、含人Ig-YACs-ES细胞的胚胎向小鼠体内送还和子代鼠的生成 147

第六节 转基因小鼠的应用 149

第一节 哺乳动物细胞表达系统 153

第七章 抗体的表达 153

一、淋巴类细胞 154

二、非淋巴类细胞 155

三、抗体的高效表达 155

第二节 大肠杆菌表达系统 166

一、大肠杆菌表达系统的特点 166

二、重组抗体片段的可溶表达 167

三、以包涵体方式表达抗体片段 169

一、昆虫表达系统及其在基因工程抗体中的应用 170

第三节 抗体在酵母及昆虫细胞中的表达 170

二、酵母表达系统 172

第四节 动植物表达系统 174

一、植物表达系统 174

二、转基因动物表达系统 178

第八章 抗体的分离、纯化及测定 184

第一节 抗体的分离纯化 184

一、盐析法 185

二、膜分离技术 185

三、色谱法 188

第二节 抗体的测定 208

一、抗体特异性的测定 209

二、抗体含量及免疫活性的测定 214

三、抗体亲和力的测定 218

四、抗体测定的新方法 226

第九章 抗体在疾病治疗中的应用 238

第一节 概述 238

一、历史回顾及现状 238

二、抗体治疗的机制 243

一、概述 246

第二节 肿瘤治疗 246

二、已上市单抗简介 247

三、临床试用中的治疗性单抗 251

第三节 免疫系统相关疾病的治疗 254

一、自身免疫性疾病 254

二、变态反应性疾病 257

第四节 器官移植 258

第五节 其它 259

一、心血管疾病的治疗 259

二、感染性疾病的治疗 260

一、实验材料 264

二、动物免疫 264

第一节 动物免疫 264

第十章 抗体相关技术 264

三、技术要点及注意事项 265

第二节 抗体的分离纯化 267

一、盐析法 267

二、凝胶过滤 268

三、离子交换 268

四、亲和层析 269

第三节 抗体的鉴定与分析 270

一、抗体的亚类测定 270

二、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） 273

三、高效液相色谱与毛细管电泳分析 275

四、抗体亲和力测定 280

第四节 抗体标记 282

一、抗体的放射性碘标记 282

二、酶标记抗体 284

三、生物素标记抗体 286

四、荧光染料标记抗体 286

五、胶体金标记抗体 287

第五节 抗原抗体反应测定 290

一、放射免疫法 290

二、酶联免疫吸附测定（ELISA） 291

三、免疫荧光法 294

四、免疫组织化学技术 295

五、免疫沉淀 298

六、免疫印迹 300

七、免疫－多聚酶链反应 303

第六节 小鼠杂交瘤单克隆抗体制备 304

一、融合前的准备及动物免疫 305

二、细胞融合和杂交瘤筛选 305

三、技术要点及注意事项 307

第七节 基因工程抗体技术 308

一、逆转录－PCR法（RT-PCR）克隆Ig可变区基因 309

二、人－鼠嵌合抗体的构建 316

三、抗体分子在大肠杆菌中的表达 319

四、噬菌体抗体库技术 321

五、基因工程抗体在真核细胞中的表达 326

附录Ⅰ 常用数据及缓冲液配制 330

一、常用缓冲液的配制 330

二、氨基酸特性 333

三、遗传密码 334

四、氨基酸密码子的使用率 334

五、常用换算数据 335

六、常用放射性核素特性 336

附录Ⅱ CD分子表 337

索引 352