园艺植物生物技术实验指导PDF电子书下载

第一部分 细胞工程 1

实验1-1 培养基母液的配制 1

实验1-2 培养基的配制与灭菌 6

实验1-3 植物材料的消毒与接种 11

实验1-4 愈伤组织诱导及悬浮细胞培养 16

实验1-5 植物茎尖脱毒与病毒检测 18

实验1-6 胚状体诱导技术 23

实验1-7 花药培养及花粉发育时期的鉴定 24

实验1-8 胚挽救技术 27

实验1-9 原生质体的分离与纯化 28

实验1-10 原生质体培养 32

实验1-11 原生质体融合 36

实验1-12 植物离体培养诱导开花 38

实验1-13 兰花原球茎快繁技术 41

实验1-14 香蕉快繁技术 45

实验1-15 离体种质保存 48

第二部分 基因工程 53

实验2-1 基因组DNA提取 53

实验2-2 RNA提取与逆转录 56

实验2-3 核酸琼脂糖凝胶电泳 61

实验2-4 核酸定量 63

实验2-5 PCR 66

实验2-6 DNA连接、感受态细胞制备与转化 68

实验2-7 质粒提取与重组质粒的酶切鉴定 71

实验2-8 重组质粒的PCR鉴定 74

实验2-9 愈伤组织或悬浮细胞与根癌农杆菌共培养转化 76

实验2-10 茎段与根癌农杆菌共培养转化 79

实验2-11 叶盘与农杆菌共培养转化 81

实验2-12 原生质体PEG介导转化 83

实验2-13 发根农杆菌介导的目的基因转化 89

实验2-14 基因枪转化外源基因 91

实验2-15 GUS或GFP检测 93

实验2-16 RT-PCR技术 98

实验2-17 Southern杂交 100

实验2-18 Northern杂交 105

实验2-19 Western杂交 110

第三部分 DNA分子标记 119

实验3-1 RAPD分子标记 119

实验3-2 AFLP分子标记 122

实验3-3 SSR分子标记 129

实验3-4 ISSR分子标记 134

实验3-5 SRAP分子标记 137

附录 141

附录1 常用基本培养基配方 141

附录2 DNA Markers 149

附录3 33μg/ml引物配成10μmol/L应加双蒸水的体积（μ1） 150

附录4 常用抗生素的配制与使用 150

附录5 同位素操作注意事项 150

主要参考文献 152