生物化学实验技术PDF电子书下载

第一篇 生物化学实验技术概论 3

第一章 生物化学制备方法 3

第一节 生物化学制备方法的特点 3

第二节 溶剂提取法 4

第三节 沉淀法 6

第四节 浓缩与干燥 8

第五节 超临界流体萃取 9

第六节 萃取与相分离 10

第七节 结晶 11

第二章 生物化学分离方法 13

第一节 离心技术 13

第二节 电泳技术 20

第三节 层析技术 40

第四节 膜分离技术简介 50

第三章 生物化学分析方法 52

第一节 质量分析法 52

第二节 滴定分析法 53

第三节 分光光度法 55

第二篇 生物化学实验 61

第四章 糖类 61

实验一 植物组织中总糖和还原糖含量的测定——3,5-二硝基水杨酸法 61

实验二 血糖的定量测定——Folin-Wu法 64

实验三 肝糖原的提取和鉴定 66

实验四 蒽酮比色定糖法 68

实验五 粗纤维的测定——酸性洗涤剂法 71

第五章 脂类 73

实验六 植物叶片在衰老过程中过氧化脂质含量的变化 73

实验七 血清胆固醇含量的测定——磷硫铁法 74

实验八 血清甘油三酯含量的测定——乙酰丙酮显色法 76

实验九 血清中游离脂肪酸含量的测定 79

第六章 氨基酸和蛋白质 82

实验十 甲醛滴定法测定氨基酸含量 82

实验十一 双缩脲法测定蛋白质的浓度 84

实验十二 考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质的含量 86

实验十三 Folin-酚试剂法蛋白质含量测定 88

实验十四 紫外吸收法测定蛋白质含量 90

实验十五 凝胶层析法分离血红蛋白 92

实验十六 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳 95

第七章 酶 98

实验十七 影响酶促反应速度的因素 98

实验十八 淀粉酶活力的测定 102

实验十九 过氧化氢酶活力的测定 105

实验二十 植酸酶活性的测定 108

实验二十一 多酚氧化酶活性的测定 110

实验二十二 蛋白酶活力的测定 112

实验二十三 超氧化物歧化酶的分离提取 115

第八章 核苷酸和核酸 119

实验二十四 醋酸纤维素薄膜电泳分离核苷酸 119

实验二十五 SDS法从动物组织中提取DNA 121

实验二十六 CTAB法提取植物组织中的DNA 122

实验二十七 浓盐法制备小牛胸腺DNA 125

实验二十八 植物组织中DNA的制备 127

实验二十九 Trizol法制备动物肝脏RNA 129

实验三十 浓盐法提取酵母核糖核酸 130

实验三十一 稀碱法提取酵母核糖核酸 132

实验三十二 紫外吸收法测定核酸含量 133

实验三十三 定磷法测定核酸含量 135

实验三十四 二苯胺法测定DNA含量 138

实验三十五 地衣酚法测定RNA含量 140

第九章 维生素 143

实验三十六 维生素A的定性测定 143

实验三十七 维生素B1的定性测定 144

实验三十八 维生素B2的定性测定 146

实验三十九 维生素C的含量测定——2,6-二氯酚靛酚滴定法 148

第十章 新陈代谢 152

实验四十 糖酵解中间产物的鉴定 152

实验四十一 脂肪酸β氧化——酮体的生成和测定 154

实验四十二 转氨酶活性的测定 157

第十一章 综合性实验 160

实验四十三 植物过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳 160

实验四十四 胃蛋白酶在水溶液和有机溶剂中的动力学测定 163

实验四十五 菠萝蛋白酶的提取、初步纯化及活性测定 169

实验四十六 Sephadex G-75分离纯化菠萝蛋白酶 173

实验四十七 SDS-PAGE测定纯化的菠萝蛋白酶分子质量 178

实验四十八 酵母蔗糖酶的提取及比活性的测定 183

实验四十九 离子交换柱层析技术分离纯化蔗糖酶 188

实验五十 蔗糖酶糖蛋白电泳技术 194

实验五十一 植物胰蛋白酶抑制剂的提取及活性测定 198

实验五十二 胰蛋白酶抑制剂的明胶-聚丙烯酰胺凝胶电泳 203

实验五十三 动物组织LDH同工酶聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳 206

实验五十四 动物组织LDH同工酶聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳 211

实验五十五 3-磷酸甘油脱氢酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳 214

实验五十六 等电聚焦法测定蛋白质的等电点 218

实验五十七 尼龙固定化木瓜蛋白酶 222

实验五十八 蛋白质双向凝胶电泳 225

实验五十九 Western免疫印迹 229

实验六十 PCR法克隆植物基因组DNA目的基因 232

实验六十一 植物组织基因组RNA的提取及检测 237

第十二章 基础分子生物学实验 241

实验六十二 质粒DNA的分离和纯化 241

实验六十三 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 243

实验六十四 限制性核酸内切酶酶切DNA 244

实验六十五 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 245

实验六十六 目的基因的回收 247

实验六十七 DNA分子的体外重组 249

实验六十八 菌落PCR法筛选阳性重组子 250

实验六十九 外源蛋白的诱导表达及SDS-PAGE检测 252

附录 256

一、一般化学试剂的分级 256

二、实验室常用酸碱的相对密度和浓度 256

三、常用酸碱指示剂 257

四、常用缓冲溶液的配制方法 257

五、pH计标准缓冲液的配制 263

六、不同温度时标准缓冲液的pH 264

七、硫酸铵饱和度的常用表 264

八、层析法常用数据表 266

九、某些蛋白质的物理性质 270

十、常见蛋白质等电点参考值（pH） 271

十一、化学元素的相对原子质量表 272

十二、薄层层析分离各类物质常用的展层溶剂 273

十三、各类物质常用的薄层显色剂 275

十四、离心机转子的转速与相对离心力间的换算关系 275

主要参考文献 277