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第一章 总论 1

一、在基因工程方面的应用 2

二、在细胞工程方面的应用 4

三、在发酵工程方面的应用 6

四、在酶工程方面的应用 7

五、小结 9

参考文献 9

第二章 中药细胞工程的技术原理 11

第一节 概述 11

第二节 实验室及设备要求 12

一、化学试剂室 12

二、培养基制备室 14

三、灭菌室 15

四、接种室 15

五、培养室 15

六、观察室 16

第三节 培养基与培养条件 16

一、培养基成分 16

二、基本培养基的种类 20

三、培养基的选择 21

四、培养基的配制 24

五、培养材料的选择 25

第四节 基本参数设定和培养基分析方法 26

一、基本参数 26

二、细胞生长和培养基成分分析 31

参考文献 37

第三章 中药有效成分的代谢调控 38

第一节 概述 38

一、基本概念 38

二、中药组织培养 40

三、中药细胞培养 41

四、中药器官培养 43

第二节 中药组织细胞培养 43

一、中药组织培养 43

二、中药细胞培养 48

三、中药器官培养 56

四、生物反应器 58

第三节 次生代谢产物的形成与调控体系的建立 62

一、次生代谢产物的结构及分类 62

二、次生代谢产物的生物合成途径 74

三、次生代谢产物生成的影响因素 77

四、次生代谢产物生成的调节 85

第四节 次生代谢产物的产业化生产 87

一、外植体的选择及处理 88

二、种子细胞的获得 88

三、种子细胞系的增殖与放大培养 89

四、大规模细胞悬浮培养 89

五、次生代谢产物的提取分离与纯化 92

参考文献 96

第四章 发酵培养与次生代谢产物的生产 98

第一节 概述 98

一、发酵技术的发展历程 98

二、药用真菌的研究概况 99

三、药用真菌发酵的意义 105

四、药用真菌发酵的发展现状 106

第二节 发酵技术的过程和特点 107

一、发酵技术的内容 107

二、发酵技术的过程 109

三、发酵技术的特点 113

四、发酵技术的应用 114

第三节 菌种的分离纯化和选育 115

一、菌株的分离纯化 115

二、选育 118

第四节 发酵过程的优化 120

一、培养基的组成和浓度 120

二、发酵温度的影响与控制 121

三、发酵pH值的控制 121

四、溶解氧的控制 122

五、泡沫的控制 122

第五节 发酵技术在中药生产中的应用 123

一、冬虫夏草菌丝体的液体深层发酵培养 123

二、槐耳的固体发酵培养 125

三、植物内生菌的发酵培养 126

参考文献 128

第五章 中药化学成分的生物转化 129

第一节 概述 129

第二节 生物转化的主要反应类型 131

一、羟基化反应 131

二、糖基化反应 133

三、醇和酮之间的氧化还原反应 134

四、脱氢反应 134

五、水解反应 135

第三节 生物转化中的效应酶 137

一、生物转化中的效应酶的分类 137

二、生物转化酶的基因工程研究 141

第四节 生物转化系统 142

一、微生物及其酶制剂 143

二、植物细胞或组织器官培养物 143

三、海洋藻类 145

四、昆虫的幼虫 145

第五节 生物转化技术在天然药物研究与开发中的应用 145

一、药用化学成分的结构改造 145

二、药物代谢的研究 146

三、阐明抑真菌药物的耐药机制 147

四、次生代谢产物生源途径的研究 147

第六节 组合生物催化 148

第七节 生物转化存在的问题及展望 151

参考文献 151

第六章 中药有效成分生物合成途径相关基因的克隆与表达 156

第一节 概述 156

第二节 中药有效成分生物合成相关基因的克隆策略 158

第三节 中药有效成分合成基因在微生物中的表达 163

一、大肠杆菌表达载体 164

二、酿酒酵母表达载体 165

三、应用 166

第四节 有效成分合成基因在植物细胞中的表达 168

一、PEG介导和电激介导方法 168

二、基因枪转化法 168

三、花粉管通道法 169

四、农杆菌介导转化方法 169

第五节 植物细胞中有效成分生物合成调控现状 170

参考文献 171

第七章 中药生物技术产品的质量控制 173

一、中药生物技术产品生产过程中的质量控制 173

二、中药生物技术产品质量标准的建立 174

参考文献 181

第八章 中药种质资源保藏 182

第一节 概述 182

第二节 药用植物组织和细胞系的保藏 183

一、常温保藏 183

二、生长期保藏 184

三、超低温保藏 185

第三节 植物种质超低温保藏技术 185

一、细胞学基础 185

二、超低温保藏方法 186

第四节 微生物菌种的保藏 190

参考文献 193

第九章 基因技术与中药鉴定 195

第一节 概述 195

一、传统鉴定方法 195

二、分子生物学发展与中药鉴定 196

第二节 DNA分子标记鉴定 196

一、基本原理 196

二、基本方法 197

第三节 分子标记在中药鉴定中的应用 202

一、易混品种鉴定 202

二、道地药材的鉴定 203

第四节 特异PCR鉴定 205

一、材料 205

二、方法 206

第五节 生物芯片 207

一、生物芯片概念 207

二、生物芯片的类型 207

三、基因芯片操作方法 207

四、生物芯片在中药鉴定方面的应用 208

参考文献 208

第十章 中药品质改良 209

第一节 概述 209

第二节 中药材优良种苗的大规模培养 210

一、外植体的获取 210

二、无菌培养物的获得 211

三、试管苗的增殖 211

四、壮苗与生根 212

五、试管苗移栽与管护 212

第三节 中药材选育技术 213

一、植物细胞融合与中药材品质改良 214

二、转基因技术与中药材品质改良 217

参考文献 219

第十一章 中药与天然药物的研究与开发 221

第一节 概述 221

第二节 中药与天然药物的研究开发过程 222

一、中药与天然药物的研究阶段 222

二、中药与天然药物的开发阶段 223

第三节 中药与天然药物的质量标准 226

第四节 生物技术在中药与天然药物研究开发中的应用 227

一、利用组织和细胞培养技术转化生产药用植物活性成分 227

二、利用生物芯片技术进行筛选和作用机理研究 228

三、利用组合生物催化的方法进行先导化合物的结构优化 229

第五节 中药及天然药物注册分类及申报资料要求 229

一、注册分类及说明 229

二、申报资料项目及说明 230

三、申报资料项目表及说明 235

参考文献 237

第十二章 中药作用机理与制剂的研究方法 238

第一节 中药作用机理的研究方法 238

一、中药作用机理的研究方法概述 238

二、单味中药作用机制研究方法 241

三、中药复方作用机制的研究方法 249

第二节 中药新剂型的研究方法 251

一、中药制剂的新工艺与技术 252

二、中药制剂的新剂型 257

参考文献 262

中英文名词对照 264