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第一章 生物化学实验基本知识 1

1.1 生物化学实验室规则 1

1.2 生物化学实验室安全与防护常识 1

1.3 化学药品的使用和储藏 3

1.4 实验误差与数据处理 7

1.5 实验记录与报告 10

1.6 实验室常用仪器的使用 12

第二章 现代生化实验技术基本原理 24

2.1 生物化学实验技术发展简史 24

2.2 离心技术 25

2.3 光谱技术 31

2.4 层析技术 37

2.5 电泳技术 47

2.6 免疫化学技术 60

2.7 基因工程技术 66

2.8 生物大分子的制备 71

第三章 基础实验 89

实验1 糖的呈色反应和定性鉴定 89

实验2 总糖和还原糖的测定（一）——费林试剂热滴定法 93

实验3 总糖和还原糖的测定（二）——3,5-二硝基水杨酸法 96

实验4 血糖含量的测定——邻甲苯胺法 99

实验5 粗脂肪的定量测定 101

实验6 食品油脂中过氧化值的测定 103

实验7 油脂中酸值的测定 105

实验8 脂肪碘值的测定 107

实验9 血清总胆固醇的测定 109

实验10 蛋白质的两性性质及等电点的测定 111

实验11 蛋白质的定量测定（一）——微量凯氏定氮法 113

实验12 蛋白质的定量测定（二）——双缩脲法 116

实验13 蛋白质的定量测定（三）——Folin-酚法 119

实验14 蛋白质的定量测定（四）——紫外（UV）吸收测定法 122

实验15 蛋白质的定量测定（五）——考马斯亮蓝染色法 124

实验16 蛋白质的定量测定（六）——BCA法 126

实验17 牛乳中酪蛋白的制备 128

实验18 紫外吸收法测定核酸的含量 130

实验19 酵母RNA的提取及组分鉴定 132

实验20 质粒DNA的微量制备 134

实验21 小牛胸腺DNA的制备——浓盐法 137

实验22 植物中DNA的提取 139

实验23 胰蛋白酶的制备 141

实验24 胰蛋白酶活力的测定 144

实验25 影响酶促反应的因素——温度、pH值和抑制剂 146

实验26 底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数的测定 149

实验27 酶的特性——底物专一性 151

实验28 乳酸脱氢酶活力测定 153

实验29 多酚氧化酶的纯化和活力测定 155

实验30 脂肪酶活力的测定 157

实验31 维生素A的测定 159

实验32 维生素B1的荧光测定法 161

实验33 维生素B2（核黄素）的荧光测定法 163

实验34 肾上腺素的提取和测定 166

实验35 叶绿素含量测定 168

实验36 总黄酮的提取和测定 169

实验37 肌糖原的酵解作用 171

实验38 发酵过程中无机磷的利用 173

实验39 氨基转换作用 175

实验40 脂肪酸β-氧化 177

第四章 技术实验 179

实验41 蛋白质相对分子质量的测定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 179

实验42 不同相对分子质量蛋白质的分离——凝胶柱层析法 182

实验43 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白 185

实验44 氨基酸的分离与鉴定——双向层析法 188

实验45 离子交换层析法分离氨基酸 191

实验46 聚丙烯酰胺等电聚焦电泳 193

实验47 质粒DNA限制性酶切及琼脂糖凝胶电泳分离鉴定 197

实验48 Southern印迹杂交 201

实验49 Western blot印迹法 203

实验50 兔抗人血清抗体的制备和效价测定 206

实验51 单向定量免疫电泳 209

实验52 酶联免疫吸附测定 211

实验53 TLC、HPLC法分离鉴定含氮杂环化合物 215

实验54 自由流电泳分离纯化细胞色素C 217

第五章 设计实验 220

实验55 果蔬维生素C含量测定及其分析 220

实验56 单细胞凝胶电泳法检测DNA的断裂损伤 223

实验57 转基因食品的PCR定性检测 226

第六章 综合实验 229

实验58 重组蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定 229

实验59 基因克隆技术——pGEX-XY1重组质粒的构建和鉴定 233

实验60 天然产物中多糖的提取、纯化与鉴定 242

附录 245

一、常用缓冲液的配制 245

二、酸、碱、盐及有机溶剂的基本数据 250

三、硫酸铵饱和度的常用表 252

四、常见蛋白质相对分子质量参考表 254

五、凝胶染料的种类及特点 255

六、层析法常用数据表及性质 256

参考文献 260