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医学免疫学实验目的和要求 1

实验室规则 2

第一章 抗原抗体反应 3

第一节 凝集反应 4

Ⅰ．直接凝集反应 4

一、玻片凝集试验 4

实验一 痢疾杆菌的血清学鉴定 4

实验二 AB（血型鉴定 5

二、试管凝集试验 6

实验三 血清抗体效价的测定 6

实验四 肥达试验 7

Ⅱ．间接凝集反应 7

一、间接凝集试验 7

实验五 间接乳胶凝集试验——抗链球菌溶素O的检测 8

实验六 间接乳胶凝集试验——类风湿因子的检测 8

二、间接凝集抑制试验 9

实验七 乳胶间接凝集抑制试验——妊娠诊断试验 9

三、反向间接血凝试验 9

实验八 甲胎蛋白检测 10

Ⅲ．协同凝集反应 11

实验九 肺炎链球菌的快速诊断 11

第二节 沉淀反应 12

Ⅰ．免疫扩散试验 13

一、双向免疫扩散试验 13

实验十 双向免疫扩散试验 13

二、单向免疫扩散试验 14

实验十一 人血清中IgG、IgA、IgM的测定 14

Ⅱ．免疫比浊 15

实验十二 人血清中补体C3的测定 15

Ⅲ．免疫电泳 16

实验十三 对流免疫电泳 16

实验十四 火箭免疫电泳 17

第三节 补体参与的反应 17

实验十五 免疫溶血反应 18

实验十六 溶血空斑试验 18

实验十七 50％溶血法（CH50）测总补体活性 19

第四节 免疫标记技术 20

一、酶免疫技术 20

实验十八 ELISA间接法检测血清中结核特异性IgG抗体 21

实验十九 ELISA双抗体夹心法检测HBsAg 22

实验二十 ELISA双抗原夹心法检测HBsAb 23

二、免疫荧光技术 23

实验二十一 间接免疫荧光法检测抗核抗体（ANA） 24

三、放射免疫测定 25

四、免疫印迹 25

实验二十二 Western Blot检测组织中β-actin 25

五、胶体金免疫技术 26

实验二十三 斑点金免疫层析试验 27

第二章 免疫细胞的检测 29

第一节 免疫细胞的分离与纯化 29

实验二十四 外周血单个核细胞的分离 29

第二节 T细胞检测 31

实验二十五 T细胞数量检测——E花环形成试验 31

实验二十六 T细胞亚群检测——间接免疫荧光法 33

实验二十七 T细胞功能检测——淋巴细胞转化试验 34

第三节 NK细胞活性检测 37

实验二十八 NK细胞活性检测 38

第四节 中性粒细胞功能检测 40

实验二十九 中性粒细胞吞噬功能的测定 40

第五节 巨噬细胞吞噬功能检测 41

实验三十 小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验 41

第三章 细胞因子及其他免疫分子的检测 43

实验三十一 IL-2活性检测 43

实验三十二 ELISA双抗体夹心法检测TNF-α 46

实验三十三 放射免疫分析法检测IL-1β 47

实验三十四 ELISA法检测IFN-γ 48

第四章 抗体的制备 51

第一节 多克隆抗体的制备 51

实验三十五 伤寒杆菌抗血清的制备 51

第二节 单克隆抗体的制备 52

实验三十六 单克隆抗体的制备 52

第五章 综合性、设计性实验 54

实验三十七 小鼠抗绵羊红细胞多克隆免疫血清的制备及效价检测 54

实验三十八 中草药对小鼠免疫功能的影响 55

实验三十九 环磷酰胺对小鼠免疫功能的抑制作用 56

实验四十 慢性乙型肝炎患者机体免疫功能的检测 57

参考文献 58

附录1 常用溶液的配制 59

附录2 医学免疫学实验报告册 65