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第1章 紫外-可见分光光度法 1

第一节 概述 1

一、有机物分子电子跃迁的类型 1

二、影响有机化合物紫外-可见吸收光谱的因素 2

第二节 紫外-可见分光光度法 8

一、Lambert-Beer定律 8

二、吸收系数 8

三、吸光度的加合性 9

四、影响紫外分光光度法准确度的因素 9

第三节 紫外-可见分光光度法的应用 13

一、定性鉴别和纯度检测 13

二、结构分析 15

三、定量分析 17

第2章 荧光分光光度法 22

第一节 荧光分析法的基本原理 22

一、荧光的产生 22

二、荧光光谱 22

三、荧光激发光谱和发射光谱的特征 23

四、荧光与分子结构的关系 24

第二节 荧光分光光度计简介 26

第三节 荧光分析法 27

一、荧光法定量分析的基本原理 27

二、一般测定方法的建立 27

第四节 荧光分析法的应用 29

一、临床实验诊断 29

二、药物检测 30

三、药动学研究 30

第3章 荧光共振能量转移技术 32

第一节 荧光共振能量转移的基本原理 32

一、发生FRET的条件 32

二、能量传递率的测定 33

三、FRET的测量 33

第二节 供体与受体的选择 33

一、荧光蛋白 34

二、传统有机染料 34

三、镧系染料 35

第三节 荧光共振能量转移技术的应用 35

一、研究生物大分子的功能 35

二、研究生物大分子空间结构与功能的关系 35

三、研究生物大分子的相互作用 36

四、研究药物的作用机制 36

五、细胞内物质的测定 37

六、物质含量的测定 37

七、应用量子点测定核酸含量 38

第4章 核磁共振波谱分析技术 41

第一节 核磁共振原理 41

一、原子核自旋现象 41

二、核磁共振现象 41

三、弛豫过程 42

第二节 1 H核磁共振提供信息与分子结构的关系 42

一、化学位移 42

二、影响化学位移的因素 43

三、积分线 44

四、化学位移与分子结构的关系 45

第三节 自旋偶合与自旋裂分 46

一、基本原理 46

二、偶合常数 46

三、偶合作用的一般规律 47

四、质子的远程偶合 48

第四节 核磁共振的测定 48

一、主要组件 48

二、仪器分类 48

三、样品制备 49

四、谱图解析 49

第五节 13 C核磁共振 50

第六节 二维核磁共振谱 52

一、同核位移相关谱 52

二、异核位移相关谱 53

三、总相关谱 53

第七节 核磁共振的应用 53

一、推导有机化合物结构 54

二、有机物定量分析 54

三、固体高分辨核磁共振谱 55

第5章 高效液相色谱法 56

第一节 概述 56

一、主要特点 56

二、色谱仪组成 56

三、主要方法 59

四、主要发展 61

第二节 色谱法基本理论 61

一、基本概念和术语 61

二、塔板理论 66

三、速率理论 67

第三节 基本分析方法 70

一、主要类型 70

二、分析方法的建立 72

三、标准曲线的建立 73

四、色谱条件选择 74

第四节 高效液相色谱法的应用 77

一、在药学中的应用 77

二、在医学中的应用 78

三、在其他方面的应用 79

第五节 制备型色谱的操作 80

一、分离条件的选择 80

二、上样 80

三、检测 80

四、馏分收集和再循环 80

五、色谱置换 81

第六节 超高效液相色谱的主要特点与应用 81

一、主要特点 81

二、主要应用 82

第6章 毛细管电泳技术 84

第一节 概述 84

一、仪器组成 84

二、电泳 84

三、电渗 85

四、分离效率和分离度 85

第二节 毛细管电泳分离模式 86

一、毛细管区带电泳 86

二、胶束电动毛细管色谱 86

三、毛细管凝胶电泳 86

四、毛细管等电聚焦 87

五、毛细管等速电泳 87

六、毛细管电色谱 87

第三节 毛细管电泳硬件技术 87

一、进样方法 87

二、毛细管柱技术 87

三、检测技术 88

第四节 毛细管电泳在生物医药的应用 90

一、化学药品分析 90

二、生物大分子分析 90

三、中药分析 91

第7章 质谱分析技术 93

第一节 概述 93

一、发展简史 93

二、质谱分析法的特点和用途 93

第二节 质谱仪的工作原理 94

一、分析原理 94

二、主要离子源及其功能 95

三、质量分析器的种类及其作用 96

四、离子检测器和记录器 98

五、质谱仪的主要性能指标 98

六、质谱表示方式 99

第三节 离子类型 99

一、分子离子 99

二、碎片离子 100

三、重排离子 100

四、放射性核素离子 100

五、亚稳离子 101

六、多电荷离子 102

七、负离子 102

第四节 裂解过程 102

一、简单裂解 102

二、重排裂解 103

第五节 分子离子峰判断原则与分子式确定方法 103

一、分子离子峰判断原则 103

二、分子式确定方法 104

第六节 质谱分析技术应用举例 105

第8章 色谱联用技术 108

第一节 气相色谱-红外光谱技术 108

第二节 气相色谱-质谱技术 108

一、概述 108

二、研究应用 109

三、质谱仪的基本结构和功能 110

四、GC-MS的操作方法 111

第三节 液相色谱-质谱联用技术 113

一、概述 113

二、基本流程和应用范围 113

三、接口方式 114

四、接口原理 114

五、LC-MS对LC的要求 116

六、分子量测定 116

七、LC-HRMS的方法 117

八、LC-MS/MS 118

九、应用 119

第四节 液相色谱-核磁共振联用技术 120

一、主要特点 120

二、应用 120

第五节 液相色谱与其他技术的联用 121

一、液相色谱-毛细管电色谱 121

二、液相色谱-生物色谱法 121

第9章 热分析技术 124

第一节 概述 124

一、热分析仪的结构和原理 124

二、热分析方法分类 125

第二节 热分析技术的应用 126

一、药物特性研究 126

二、药物制剂研究 127

三、药物、辅料及包装材料质量检查 128

四、中药材鉴别 128

五、蛋白质变性检测 129

第三节 热分析与其他技术联用 129

一、键合药物的表征 129

二、药物晶型研究 129

三、药物热降解及稳定性研究 129

四、新剂型和制剂新技术 129

第10章 激光共聚焦显微镜 133

第一节 概述 133

一、发展简史 133

二、仪器设备 133

三、基本原理 134

四、荧光探针选择 134

第二节 主要应用技术 135

一、黏附细胞分选技术 135

二、光漂白后的荧光恢复技术 135

三、细胞激光显微外科及光陷阱技术 135

四、笼锁化合物解笼锁-光活化技术 135

五、活细胞生理信号动态监测技术 135

第三节 在临床医疗上的应用 137

一、肿瘤诊治 137

二、眼科疾病诊治 137

三、牙科疾病诊治 137

四、其他常见疾病诊治 138

第四节 在药学研究的应用 138

一、药物制剂研究 138

二、药动学研究 138

三、药理学研究 139

第11章 膜片钳技术 141

第一节 概述 141

一、发展简史 141

二、基本原理 141

三、研究进展 142

第二节 膜片钳技术的主要记录模式 142

一、细胞贴附模式 143

二、膜内面向外模式 143

三、膜外面向外模式 143

四、常规全细胞模式和穿孔膜片模式 143

第三节 在医学上的应用 144

一、主要用途 144

二、离子通道研究与发现 145

三、心肌离子通道与药物作用研究 145

四、生理与病理状态下离子通道研究 145

五、单细胞形态与功能的关系研究 146

六、药物作用机制研究 146

七、心血管药理学研究 146

八、药物创新研究与高通量筛选 146