生物化学与分子生物学实验PDF电子书下载

第一章 生物化学实验基本知识与操作 1

第一节 生物化学实验基本知识 1

第二节 生物化学实验基本操作 3

第二章 分光光度技术 16

实验一 双缩脲法测定蛋白质浓度 26

实验二 Folin-酚试剂法（Lowry法）测定蛋白质浓度 28

实验三 紫外分光光度法测定蛋白质浓度 29

实验四 考马斯（Comessie）亮蓝结合法测定蛋白质浓度 31

实验五 BCA法测定蛋白质浓度 33

实验六 激素对血糖浓度的影响及血糖的测定 34

实验七 碱性磷酸酶（AKP）米氏常数（Km）的测定和底物浓度对酶促反应速度的影响 40

第三章 生物大分子的提取、沉淀和离心分离技术 43

第一节 生物材料的选取与预处理 43

第二节 生物大分子的沉淀分离技术 47

第三节 生物大分子离心分离技术 50

实验八 鸡血SOD的提取、分离及活力测定 55

实验九 碱性磷酸酶的制备及活力测定 57

实验十 酪蛋白的制备 61

实验十一 细胞核蛋白质的提取 62

实验十二 动物肝脏中提取DNA 64

实验十三 猪心肌细胞线粒体可溶性ATP合酶的提纯 66

第四章 电泳技术 71

实验十四 DNA琼脂糖凝胶电泳 77

实验十五 血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 80

实验十六 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶 83

实验十七 蛋白质分子量的测定——SDS-聚丙烯凝胶电泳 88

实验十八 聚丙烯酰胺等电聚焦电泳 90

实验十九 醋酸纤维素薄膜对血清蛋白质的电泳 95

实验二十 双向电泳 97

实验二十一 垂直板SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清脂蛋白蛋白质 108

第五章 层析技术 112

第一节 层析技术概述 112

第二节 吸附层析 113

第三节 分配层析 114

第四节 离子交换层析 116

第五节 凝胶层析 118

第六节 亲和层析 121

第七节 高效液相层析 123

实验二十二 氨基酸的纸上层析与氨基酸的转氨基作用 123

实验二十三 血清γ-球蛋白的分离纯化与鉴定 125

实验二十四 亲和层析纯化胰蛋白酶 129

实验二十五 离子交换层析分离氨基酸 132

实验二十六 蛋白质分子量测定——凝胶过滤层析法 134

第六章 分子生物学基本技术 137

第一节 核酸分子杂交 137

第二节 聚合酶链反应 140

第三节 分子克隆 143

实验二十七 限制性内切酶消化DNA分子 146

实验二十八 核糖核酸（RNA）的提取 147

实验二十九 Southern杂交分析 149

实验三十 Northem杂交分析 152

实验三十一 PCR基因扩增 154

实验三十二 RT-PCR扩增目的基因cDNA 156

实验三十三 琼脂糖凝胶中DNA片段的回收 157

实验三十四 质粒DNA的提取及酶切 158

实验三十五 质粒载体和外源DNA的连接反应 161

实验三十六 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 162

实验三十七 克隆的筛选和快速鉴定 163

参考文献 165

附录一 常用缓冲液的配制方法 166

附录二 易变质及需要特殊方法保存的试剂 172

附录三 一般化学试剂的分级 173

附录四 English words in the lab 174