生物化学与分子生物学实验指导PDF电子书下载

第一篇 理论篇 3

第一章 生物大分子的制备 3

第一节 细胞的破碎与细胞器的分离 3

第二节 蛋白质、核酸的提取、分离和纯化 4

第三节 样品的浓缩、干燥和保存 7

第二章 电泳技术 9

第一节 电泳 9

第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 11

第三节 Western印迹术 19

第三章 细胞培养 21

第一节 细胞培养基本知识 21

第二节 细胞培养基本技术 26

第三节 细胞培养常用研究方法 31

第四章 分子生物学 34

第一节 聚合酶链式反应（PCR）获取目的基因 34

第二节 外源基因与载体的连接 37

第三节 重组DNA的筛选鉴定 42

第四节 重组DNA的表达 44

第五节 表达产物的分离纯化 49

第二篇 实验篇 53

第一章 基础性实验 53

实验一 蛋白质定性实验 53

实验二 改良Lowry比色测定法（Hartree法）定量蛋白质 56

实验三 紫外分光光度法定量蛋白质 59

实验四 考马斯亮蓝法（Bradford法）定量蛋白质 60

实验五 肝脏谷丙转氨酶活性测定 61

实验六 血中葡萄糖的测定——葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法 64

实验七 肝糖原的提取与鉴定 65

实验八 血清脂蛋白琼脂糖电泳 66

实验九 血清总胆固醇测定 67

实验十 血清高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的测定 69

实验十一 醋酸纤维薄膜电泳 72

实验十二 不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳 73

实验十三 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS） 76

实验十四 等电聚焦电泳 78

实验十五 Western印迹术 80

实验十六 聚合酶链式反应（PCR） 81

实验十七 反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR） 84

实验十八 真核细胞总RNA的制备 86

第二章 综合性实验 88

实验一 乳汁过氧化物酶的提取纯化与活性鉴定 88

实验二 动物组织中核酸的提取、鉴定及含量测定 91

实验三 重组质粒的构建与筛选 95

实验四 5-氟尿嘧啶对肝癌细胞株HepG2的杀伤实验 109

第三章 设计性实验 112

实验一 血清白蛋白的分离纯化及鉴定 113

实验二 血浆高密度脂蛋白、低密度脂蛋白的分离及鉴定 114

实验三 糖尿病的发病机制与分型 115

实验四 乳酸脱氢酶同工酶（LDH）的测定与急性心肌梗死（AMI）的临床鉴定 116

附录 常用缓冲液配方及单位换算 118