鱼类分子生物学物种鉴定技术PDF电子书下载

第一章 鱼类物种鉴定的分子生物学技术概况 1

第一节 鱼类物种鉴定的分子生物学技术 1

一、蛋白质检测技术 1

二、DNA检测技术 2

第二节 鱼类物种鉴定的遗传物质选择 2

一、线粒体DNA 2

二、核DNA 3

三、卫星DNA 4

第三节 PCR引物 4

一、通用引物 5

二、物种特异性引物 5

第四节 网络信息资源在鱼类物种鉴定中的应用 5

第二章 鱼类物种鉴定的样品处理技术 8

第一节 DNA的提取和纯化 8

一、DNA的提取 8

二、DNA的纯化 10

第二节 蛋白质的提取和纯化 10

一、细胞的破碎 11

二、蛋白质的提取 12

三、蛋白质的分离纯化 13

四、鱼肌肉蛋白的提取实例 15

第三章 鱼类物种鉴定的DNA条形码技术 17

第一节 DNA条形码技术的基本原理 17

一、DNA条形码 17

二、DNA条形码技术的靶基因 18

三、DNA条形码技术的基本原理 19

第二节 DNA条形码技术的基本操作流程 20

一、试剂和设备 20

二、基本操作流程 21

第三节 DNA条形码在鱼类物种鉴定中的应用 22

一、DNA条形码在鱼类研究中的应用概况 23

二、DNA条形码对于鱼类分类学的意义及可行性 24

三、DNA条形码在中国鱼类分类学研究中的应用实例 25

四、DNA条形码技术的问题与展望 26

五、16S rRNA基因和COI基因序列分析在石斑鱼物种鉴定中的应用 26

第四章 鱼类物种鉴定的DNA指纹图谱技术 35

第一节 基于PCR的DNA指纹图谱技术概述 35

一、DNA指纹图谱技术的发展 35

二、DNA指纹图谱技术的特点 36

第二节 PCR-RFLP技术 36

一、PCR-RFLP技术鉴定鱼种的基本原理 37

二、PCR-RFLP技术的基本操作流程 37

三、Lab-on-a-chip毛细管电泳（Lab-on-a-chip capillary electrophoresis，Lab-on-a-chip CE） 39

四、PCR-RFLP技术在主要经济鱼类物种鉴定中的应用 42

五、PCR-RFLP商业化鱼种鉴定试剂盒 43

六、台湾海峡常见石斑鱼的PCR-RFLP鉴定方法 45

七、渤海地区常见经济鱼类的PCR-RFLP鉴定方法 48

第三节 PCR-SSCP技术 49

一、PCR-SSCP技术的基本原理 49

二、PCR-SSCP技术的基本操作流程 50

三、PCR-SSCP技术的注意事项 51

四、PCR-SSCP技术在鱼种鉴定中的应用 52

第四节 PCR-RAPD技术 53

一、PCR-RAPD技术的基本原理 53

二、PCR-RAPD技术的基本操作流程 55

三、PCR-RAPD技术的注意事项 56

四、PCR RAPD技术在鱼种鉴定中的应用 57

第五节 PCR-AFLP技术 58

一、PCR-AFLP技术的基本原理 58

二、AFLP分子标记的特点 59

三、PCR-AFLP技术的基本操作流程 60

四、PCR-AFLP在鱼种鉴定中的应用 61

第五章 鱼种鉴定的定性PCR检测技术 63

第一节 PCR检测技术概述 63

一、PCR技术的基本原理 63

二、PCR技术的特点 64

三、鱼类物种鉴定的主要PCR技术类型 64

四、PCR技术鉴定鱼种的注意事项 65

五、PCR技术在鱼种鉴定中的应用 71

第二节 鱼类物种鉴定的普通PCR检测流程 73

一、基本操作流程 73

二、试剂和设备 74

三、DNA的提取 74

四、PCR反应 74

五、结果分析 75

第三节 鱼种鉴定的实时荧光PCR检测流程 76

一、基本操作流程 76

二、试剂和设备 76

三、DNA的提取 77

四、实时荧光PCR反应 77

五、结果分析 78

六、台湾海峡10种石斑鱼的荧光PCR检测方法 79

第四节 鱼类物种鉴定的DNA检测方法比较 83

第六章 鱼种鉴定的蛋白质检测技术 85

第一节 样品种类与蛋白质检测方法的选择 85

一、生加工鱼产品 85

二、混合粗加工鱼产品 86

三、加工鱼制品 87

四、罐装灭菌鱼制品 87

第二节 同工酶电泳技术 88

一、同工酶电泳技术的研究历史及现状 88

二、同工酶电泳技术在鱼种鉴定中的应用 88

三、同工酶电泳的实验方法 89

第三节 蛋白质组学技术 90

一、蛋白质组学技术概述 90

二、蛋白质组学的基本实验技术 91

第四节 蛋白质毛细管电泳技术 94

一、毛细管电泳的基本原理 94

二、毛细管电泳类型 94

三、毛细管电泳的基本操作流程 96

四、毛细管电泳技术的优缺点 97

第五节 酶联免疫技术 97

一、ELISA方法的基本原理 98

二、ELISA中用于标记的酶 98

三、抗体的酶标记方法及标记效果测定 99

四、ELISA方法的基本步骤及类型 100

五、ELISA方法在鱼种鉴定中的应用 101

第七章 鱼种鉴定的生物芯片技术 102

一、基因芯片技术 102

二、蛋白质芯片技术 105

三、液相芯片技术 109

四、生物芯片技术发展趋势与展望 112

第八章 水产品标签的管理和措施 113

第一节 美国关于水产品标签的法规和措施 113

一、FDA法规要求 113

二、FDA鱼种鉴定的DNA条形码标准操作程序简介 113

第二节 欧盟关于水产品标签的法规和措施 116

一、欧盟法规要求 116

二、欧盟鱼种鉴定的技术方法和关键因素 117

三、欧盟鱼种鉴定方法的适用性 118

四、欧盟经确认的鱼种鉴定方法 118

五、鱼种鉴定的参考物质和试剂盒 118

附Ⅰ 鱼类分类系统 119

附Ⅱ FDA海产品名录（2011） 121

参考文献 170