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第一篇 细胞 2

实验一 动物细胞的基本形态观察和显微测量 2

实验二Brachet反应显示细胞中的DNA和RNA 5

实验三 细胞中过氧化物酶的显示 7

实验四 细胞中碱性蛋白的显示 9

实验五 细胞中线粒体的活体染色 11

实验六 细胞中液泡系的活体染色 12

实验七 细胞融合 14

实验八 细胞的原代和传代培养 17

实验九 培养细胞的形态观察和计数 21

实验十 细胞生理活动的观察 26

实验十一 细胞核与线粒体分级分离 29

实验十二 检测T淋巴细胞及其功能的体外实验 32

一、T细胞及其亚群的鉴定和检测 32

二、T细胞功能体外检测法 34

实验十三NK细胞活性的检测 37

实验十四 小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验 39

实验十五 细胞中微丝的染色及微丝与细胞形态的实验观察 40

实验十六 亚细胞器的分离与分析鉴定 43

一、亚细胞器的分离 43

二、线粒体的鉴定 44

三、Western Blotting检测内质网和高尔基体的标志蛋白 45

实验十七 应用细胞融合技术制备染色体提前凝集标本 48

实验十八 放线菌素D诱导HL60细胞凋亡的实验观察 51

实验十九MAPK信号通路与乳腺癌细胞增殖及可能机制 60

第二篇 染色体与核酸 72

第一部分 染色体分析相关实验 72

实验一 人类体细胞染色体标本制备与核型分析 72

实验二 羊水细胞培养及染色体标本制备 82

实验三X和Y染色质标本的制作与观察 85

实验四 姊妹染色单体交换实验 88

实验五 银染核仁形成区与近端着丝粒染色体随体联合 90

实验六 荧光原位杂交（21号）染色体长臂特异探针 92

第二部分 核酸分析相关实验 98

实验七 基因组DNA提取 98

实验八 组织总RNA提取 100

实验九DNA重组技术 101

实验十 报告基因载体构建及活性检测 106

实验十一 染色质免疫沉淀 110

实验十二 凝胶阻滞实验 112

实验十三 哺乳动物细胞的转基因及鉴定 116

实验十四小RNA研究基本技术 119

实验十五Southern印迹杂交 125

实验十六Northern印迹杂交 127

第三部分 聚合酶链反应（PCR）相关实验 130

实验十七PCR-RFLP分析技术 130

实验十八PCR-SSCP 133

实验十九PCR-DGGE 136

实验二十PCR-DHPLC 139

实验二十一Real-time PCR检测mRNA表达 141

实验二十二Real-time PCR进行基因型检测 144

实验二十三 甲基化特异性PCR 145

实验二十四 免疫PCR 149

实验二十五SNP检测及关联分析 153

实验二十六 血红蛋白病的基因诊断 161

第三篇 蛋白质 168

第一部分 电泳技术 168

实验一SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 168

实验二 等电聚焦电泳 176

实验三 双向电泳 180

第二部分 色层分析法相关实验 191

实验四 凝胶过滤层析法蛋白质除盐 191

实验五 纤维素离子交换层析法纯化蛋白 197

实验六 伴刀豆素球蛋白琼脂糖亲和层析法纯化蛋白质 199

实验七 氨基酸纤维素薄层层析 202

第三部分 酶促反应动力学相关实验 204

实验八 酶的特异性、激动药及抑制药 204

实验九 pH对酶活性的影响 206

实验十 底物浓度对酶活性的影响——碱性磷酸酶Km值的测定 208

实验十一 抑制药对酶活性的影响 211

实验十二 温度对酶促反应速度的影响 212

第四部分 蛋白质检测相关实验 214

实验十三 比色分析法和分光光度法测定蛋白质含量 214

实验十四 免疫印迹 219

实验十五 免疫沉淀SD大鼠骨骼肌细胞核α1 -AMPK蛋白 226

实验十六α1-抗胰蛋白酶活性测定 229

实验十七 酵母双杂交 230

实验十八CyclinE蛋白在细胞周期G1/S期的表达 233

实验十九 含有目的基因真核表达pEGFP-C1载体的构建 238

一、PCR反应扩增目的基因片段 238

二、凝胶回收PCR反应片段 239

三、将目的片段克隆到 pEGFP-C1载体中 240

四、转化感受态细胞 242

五、提取质粒并进行酶切鉴定 242

第五部分 免疫学相关实验 245

实验二十 凝集反应 245

一、直接凝集试验 245

二、间接凝集试验 248

实验二十一 沉淀反应 251

一、琼脂扩散试验 251

二、环状沉淀反应 254

三、免疫电泳试验 255

实验二十二 补体参与的反应 257

一、溶血反应 257

二、溶血空斑试验 258

三、50%溶血法（CH50）测总补体活性 260

实验二十三 免疫标记技术 263

一、酶联免疫吸附试验 263

二、免疫荧光技术 265

实验二十四 细胞因子检测 268

一、白细胞介素-2的检测 268

二、肿瘤坏死因子测定 269

第四篇 模式生物 274

实验一 不同发育阶段小鼠胚胎形态观察 274

实验二 鸡胚胎早期发育过程的形态观察 275

实验三 免疫组化检测小鼠肺发育过程中标志分子的表达 278

实验四 地高辛标记寡核苷酸探针检测大鼠海马褪黑素受体1a 280

实验五Western-ECL方法检测不同发育时期鸡胚脑组织中Grp94的表达 284

实验六 染色质免疫沉淀比较肺发育不同阶段SPC启动子的活性 288

实验七 囊胚的观察 291

实验八 小鼠胚胎成纤维细胞培养 293

实验九 骨髓间充质干细胞制备及定向诱导分化 294

实验十 胚胎干细胞端粒酶活性检测 297

实验十一 酵母质粒DNA的提取 298

实验十二 酵母的接合实验 300

实验十三 酵母感受态细胞的制备及酵母的转化 302

实验十四 立体定位技术及C6脑胶质瘤模型制作 304

实验十五 微电极拉制技术及大鼠海马LTP的实验观察 308

实验十六 激光多普勒血流仪监测大鼠脑缺血时血流 312

实验十七 大鼠Morris水迷宫、跳台及穿梭箱实验方法 316

实验十八 辣根过氧化物酶（HRP）追踪法 320

实验十九Nissl ， Cajal， Marchalls染色 322

一、Nissl染色法 322

二、Cajal染色法 323

三、Marchalls法 323

实验二十 中枢神经通路损毁模型的建立 324

实验二十一 中枢给药：小鼠脑室给药，大鼠侧脑室给药，兔脑室灌流的操作方法 331

实验二十二 突触小体和离体脑片的制备 334

实验二十三 神经元和星形胶质细胞的分散培养技术 337