上篇 1
第一章 生物化学与分子生物学实验基本知识 1
第一节 实验室基本规则 1
第二节 实验基础知识与操作 5
第二章 光谱光度分析技术 16
第一节 比色法与分光光度法 16
第二节 荧光分析法 26
第三章 电泳技术 30
第一节 电泳技术的基本知识 30
第二节 常用电泳技术 36
第四章 层析技术 45
第一节 吸附层析 45
第二节 分配层析 51
第三节 凝胶过滤层析 55
第四节 离子交换层析 61
第五节 亲和层析 68
第五章 离心技术 78
第一节 离心技术的原理 78
第二节 离心技术的分类与应用 82
第三节 离心机的类型与结构 86
第六章 常用分子生物学技术 89
第一节 重组DNA技术 89
第二节 聚合酶链反应技术 100
第三节 分子杂交技术 117
下篇 129
实验一 双缩脲法测定蛋白质含量 129
实验二 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量 131
实验三 紫外分光光度法测定蛋白质含量 133
实验四 考马斯亮蓝G-250染色法测定蛋白质含量 135
实验五 BCA法测定蛋白质含量 137
实验六 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳 140
实验七 血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳 144
实验八 SDS-PAGE测定蛋白质的相对分子质量 148
实验九 氨基酸薄层层析 153
实验十 凝胶柱层析法分离蛋白质 155
实验十一 紫外吸收法测定核酸含量 157
实验十二 肝脏DNA和RNA的分离与测定 158
实验十三 碱性磷酸酶的分离纯化与比活性测定 163
实验十四 碱性磷酸酶的动力学分析 171
一、pH对酶促反应速度的影响 171
二、温度对酶促反应速度的影响 174
三、底物浓度对酶促反应速度的影响 175
四、抑制剂对酶促反应速度的影响 176
实验十五 测定血糖及激素对血糖浓度的影响 177
实验十六 血清甘油三酯的测定 180
实验十七 血清丙氨酸氨基转移酶测定 184
实验十八 血清尿素测定 188
实验十九 聚合酶链式反应体外扩增DNA 191
实验二十 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 194
实验二十一 质粒DNA的提取 196
实验二十二 DNA的限制性内切酶消化 199
实验二十三 DNA的重组技术——DNA的连接、感受态细胞制备及质粒转化 201
实验二十四 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 205
实验二十五 Southern blot 207
实验二十六 Northern blot 210
实验二十七 Western blot 214
实验二十八 单链构象多态性分析技术检测基因突变 218
附录 222
附录一 实验室常用试剂、缓冲液的配制方法 222
附录二 常用培养基及抗生素的配制方法 231
附录三 生物化学与分子生物学常用数据 232
附录四 生物化学与分子生物学网上资源、数据库及国内外期刊 240
参考文献 244