第一部分 生物化学实验 1
实验一 糖的还原作用 1
实验二 植物组织中总糖和还原糖的测定 2
实验三 血液中葡萄糖含量的测定(氧化酶法) 4
实验四 粗脂肪含量的测定(索氏抽提法) 6
实验五 碘值的测定 8
实验六 氨基酸分离鉴定——纸层析法 10
实验七 蛋白质及氨基酸的呈色反应 13
一、双缩脲反应 14
二、茚三酮反应 15
三、黄色反应 16
实验八 蛋白质含量的测定(考马斯亮蓝染色法) 16
实验九 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳 19
实验十 总氮量的测定——微量凯氏定氮法 22
实验十一 过氧化氢酶、过氧化物酶的作用 26
实验十二 不同因素对淀粉酶活力的影响 28
实验十三 动物肝脏DNA的提取 31
实验十四 核酸的定量测定——二苯胺法 32
实验十五 核酸的定量测定——紫外吸收法 33
实验十六 维生素C含量的测定(2,6-氯酚靛酚滴定法) 35
实验十七 兔血清免疫球蛋白IgG的分离纯化与鉴定 38
一、盐析法分离兔血清免疫球蛋白IgG 38
二、蛋白质脱盐和浓缩 40
三、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定兔血清IgG分子量 46
四、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳银染色法 52
五、等电聚焦电泳法测定蛋白质等电点 54
六、酶联免疫吸附测定法(ELISA) 58
实验十八 单核苷酸的离子交换柱层析分离 59
实验十九 自行设计实验 64
附录1 生化实验室常用仪器设备的使用方法 65
附录2 常用试剂及缓冲液的配制 73
第二部分 细胞生物学实验 82
实验一 细胞大小的测量 82
实验二 细胞膜的渗透性 85
实验三 线粒体的活体染色与观察 87
实验四 线粒体的分离制备与观察 88
实验五 植物液泡的活体染色与观察 91
实验六 叶绿体的分离与荧光观察 93
实验七 细胞内过氧化物酶的观察 96
实验八 细胞内含物的观察 98
实验九 细胞骨架的光学显微镜观察 101
实验十 植物原生质体分离和活性鉴定 104
实验十一 聚乙二醇法诱导的细胞融合 107
实验十二 细胞中DNA的Feulgen染色观察 109
实验十三 DNA和RNA的甲基绿-哌洛宁原位染色法 112
实验十四 植物染色体结构与Giemsa分带技术 113
实验十五 染色体核仁组织区的银染法 117
实验十六 细胞凋亡的检测 119
实验十七 染色体荧光原位杂交技术 122
附录1 细胞生物学实验室守则 127
附录2 细胞生物学染色技术 128
附录3 生物绘图与临时装片知识 130
附录4 实验报告的书写 131
第三部分 遗传学实验 132
实验一 有丝分裂与减数分裂的观察与比较 132
实验二 植物染色体压片法 136
实验三 植物染色体组型分析 138
实验四 质量性状的遗传分析 140
实验五 植物染色体分带技术 143
实验六 高等植物有性杂交 146
实验七 植物多倍体诱发和鉴定 147
实验八 果蝇唾腺染色体 149
实验九 果蝇的二对因子的自由组合 151
实验十 果蝇三点测交 152
实验十一 果蝇的伴性遗传实验 154
实验十二 大肠杆菌的杂交 156
实验十三 细菌转化实验 158
实验十四 链孢霉四分子分析 160
实验十五 环境因子对生物遗传物质的损伤 161
实验十六 两栖动物血细胞培养的染色体观察 162
实验十七 利用基因组原位杂交比较不同物种亲缘关系 163
实验十八 数量性状实验 165
附录1 遗传学实验室工作规程 166
附录2 遗传学实验基本技能 170
附录3 x2值表 177
第四部分 分子生物学实验 178
实验一 质粒DNA的制备与电泳检测 178
实验二 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 186
实验三 质粒DNA的酶切鉴定 190
实验四 目的DNA片段的回收 193
实验五 重组质粒的构建 197
实验六 重组质粒DNA的PCR鉴定 202
实验七 外源基因在大肠杆菌中诱导表达 208
实验八 蛋白质免疫印迹(Western Blotting) 213
实验九 哺乳动物基因组DNA的制备 217
实验十 植物基因组DNA的制备 219
实验十一 植物总RNA的制备 222
实验十二 DNA探针标记 225
实验十三 DNA分子杂交(Southern Blotting) 230
实验十四 RNA分子杂交(Northern Blotting) 235
实验十五 随机扩增片段多态性(RAPD)分析 243
参考文献 246