上篇 生物工程技术 3
绪论 3
第一单元 基因工程 4
第一节 基因工程概述 4
第二节 基因工程实施的四大要素 6
第三节 基因工程实验操作技术及操作要点 20
第二单元 细胞工程 38
第一节 细胞工程概述 38
第二节 细胞培养的基本原理与技术 39
第三节 植物细胞培养技术 48
第四节 动物细胞培养技术 51
第五节 组织细胞的培养方法 54
第三单元 发酵工程 57
第一节 发酵工程概述 57
第二节 菌种与种子扩大培养 59
第三节 培养基及其制备 64
第四节 培养基与设备灭菌 66
第五节 发酵工艺控制 69
第六节 下游加工过程 73
第四单元 酶工程 92
第一节 酶的性质和活力测定 92
第二节 酶的生产和制备 96
第三节 酶细胞和原生质体的固定化 101
第四节 酶工程研究进展 107
第五单元 生物反应器 113
第一节 酶反应器 113
第二节 细胞培养反应器 116
第三节 发酵设备 123
第四节 生物反应器的检测及控制 126
下篇 生物工程实验 133
第一单元 基因工程 133
实验1 黄单胞菌基因组DNA的提取 133
实验2 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 134
实验3 质粒DNA的提取 136
实验4 聚合酶链式反应（PCR）扩增DNA片段 139
实验5 DNA的限制性内切酶酶切 142
实验6 重组DNA分子的构建 145
实验7 化学转化法感受态大肠杆菌的制备与转化 147
实验8 重组质粒DNA的PCR验证 150
实验9 核酸分子的转移：Southern印迹和电泳转移 151
第二单元 细胞工程 155
实验10 细胞工程实验基础 155
实验11 植物组织和细胞培养 162
实验12 家蚕细胞传代培养 165
实验13 家蚕细胞融合 166
实验14 PEG诱导动物细胞融合 167
第三单元 发酵工程 169
实验15 液体发酵法生产链霉素 169
实验16 盐酸庆大霉素生产全流程实验 173
实验17 离子交换法提取谷氨酸实验 180
实验18 摇瓶溶氧系数的测定 184
实验19 发酵罐溶氧速率测定实验 186
实验20 面包酵母分批与流加培养实验 188
第四单元 发酵产品制作 191
实验21 淡色啤酒酿制 191
实验22 白酒酿制 192
实验23 柑橘渣微生物发酵生产饲料蛋白 193
实验24 发酵法酿制食醋 195
实验25 小曲酒饼的制作 196
实验26 小曲白酒的制作 197
实验27 酱油种曲的制作 199
实验28 酱油的制作 200
实验29 葡萄酒的制作 202
实验30 糯米甜酒的酿制 203
第五单元 酶工程 205
实验31 蛋清溶菌酶的制备 205
实验32 β-半乳糖苷酶的诱导合成 208
实验33 β-半乳糖苷酶的固定化 209
实验34 谷氨酸棒杆菌原生质体固定化及应用 211
实验35 α-环糊精酶基因的表达和酶活力的测定 213
实验36 糖化酶的反应动力学性质的测定 216
实验37 碱性蛋白酶基因的表达和活性的测定 218
第六单元 生物制药技术 222
实验38 芦丁的精制、鉴定与含量测定 222
实验39 芦丁胶囊的制备与崩解时限测定 225
实验40 不同助悬剂对芦丁混悬剂稳定作用的比较 228
实验41 芦丁片的薄膜包衣及质量评价 229
实验42 薄荷油及其β-环糊精包合物的制备与质量评价 231
实验43 薄荷油微囊的制备与镜检 234
实验44 鱼油高不饱和脂肪酸EPA和DHA制备与含量测定 236
实验45 微生物发酵法制备辅酶Q10 238
第七单元 生物工程综合大实验 241
实验46 细胞生物学大实验——动物细胞培养及外源基因的导入 241
实验47 生物燃料酒精发酵大实验 243
实验47（1） 固定化酵母细胞的制备和增殖培养 243
实验47（2） 甘蔗糖蜜预处理实验 246
实验47（3） 双酶法制备淀粉水解糖 247
实验47（4） 淀粉水解糖含量定量分析 249
实验47（5） 游离酵母细胞和固定化酵母细胞发酵生产酒精 251
实验47（6） 酒精蒸馏与酒精发酵液产物分析 252
实验48 米曲霉固态培养生产中性蛋白酶及产物分离纯化初步研究 254
实验49 淀粉酶基因工程菌的构建及上罐流加发酵 259
实验49（1） 地衣芽孢杆菌染色体DNA的提取 260
实验49（2） DNA琼脂糖凝胶电泳 262
实验49（3） 聚合酶链式反应（PCR） 264
实验49（4） 碱裂解法小量制备质粒DNA 265
实验49（5） 质粒载体与外源DNA片段的连接 267
实验49（6） 连接产物的化学转化 268
实验49（7） 淀粉选择平板筛选重组转化子 270
实验49（8） 小型发酵罐的结构与使用 271
实验49（9） 小型发酵罐上罐操作及流加发酵实验 274
实验49（10） OxiTop IS6 BOD测试仪的使用 278
附录 283
附录A 实验室须知 285
附录B 常用参数 291
附录C 酒精度与温度校正表 292
参考文献 295