上篇 PCR的基本理论与技术 1
第一章 聚合酶链式反应 1
第一节 PCR技术的原理 1
第二节 PCR反应体系 3
第三节 PCR的反应温度和循环参数 9
第四节 PCR反应条件的优化 11
第五节 PCR产物的检测 19
第六节 PCR产物的纯化 22
第二章 DNA模板的制备及PCR技术中常见问题的处理 24
第一节 DNA模板的制备 24
第二节 PCR常见问题及处理 30
第三节 PCR技术中污染问题 32
第四节 PCR技术实验室的质量控制 33
第三章 原位PCR相关技术 35
第一节 原位PCR 35
第二节 原位PCR的分类 42
第三节 原位PCR技术 44
第四章 定量PCR技术 69
第一节 概述 69
第二节 基本概念 69
第三节 定量PCR技术基本原理 70
第四节 定量PCR技术的种类 70
第五节 定量PCR的主要影响因素 74
第六节 常用的定量PCR技术及其在临床上的应用 75
第七节 PCR产物的检测与定量技术 82
第八节 目前存在的问题及展望 84
第五章 其他相关PCR技术 86
第一节 反转录-聚合酶链反应 86
第二节 套式PCR 89
第三节 多重PCR 91
第四节 PCR结合等位基因特异性的寡核苷酸探针法 92
第五节 PCR结合序列特异性引物技术 93
第六节 单链构型多态性分析 94
第七节 限制性酶切片段长度多态性分析 95
第八节 MVR-PCR 96
第九节 RAPD技术 98
下篇 PCR相关技术的应用 102
第六章 PCR技术用于构建cDNA文库、测序及基因突变的检测 102
第一节 cDNA文库构建的基本技术 102
第二节 PCR测序 109
第三节 PCR技术用于基因突变的检测 111
第七章 PCR技术分析DNA序列多态性 114
第一节 DNA的两种多态性和遗传标记分类 114
第二节 PCR技术分析DNA序列多态性 115
第八章 用PCR技术分析VNTR和STR 122
第一节 概述 122
第二节 扩增片段长度多态性分析分型技术基本原理 123
第三节 用PCR技术分析小卫星VNTR基因座分型的基本技术 123
第四节 用PCR技术分析微卫星(STR)基因座 135
第九章 用PCR技术对性别染色体进行分析 146
第一节 概述 146
第二节 PCR扩增的基本方法 146
第三节 讨论 148
第十章 用PCR技术对动植物、微生物DNA进行分析 149
第一节 概述 149
第二节 实验方法与步骤 152
第三节 结果与讨论 156
第十一章 PCR技术检测CDK4敲入转基因鼠的基因型 158
第一节 实验原理 158
第二节 实验方法 158
第三节 实验结果 160
第四节 结果分析及注意事项 165
第十二章 PCR体系中模板DNA浓度与PCR扩增效率的关系 166
第一节 实验目的 166
第二节 实验方法 166
第三节 实验结果 168
第四节 结果分析 171
第十三章 RT-PCR技术检测全横断损伤脊髓中TGF-β1的表达 173
第一节 实验原理 173
第二节 实验设备、试剂及配制 173
第三节 实验步骤 175
第四节 实验结果 196
第五节 实验体会 198