基础篇 3
实验1 碱法提取质粒 3
实验2 煮沸法提取质粒 12
实验3 质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳 16
实验4 质粒的限制性内切酶反应分析 22
实验5 用玻璃奶回收琼脂糖凝胶中的DNA 28
实验6 DNA的连接 31
实验7 E.coli DH5α感受态细胞的制备及转化 36
实验8 植物总RNA的提取 41
实验9 聚合酶链反应——PCR 45
实验10 cDNA末端快速扩增——RACE 51
实验11 高通量基因克隆技术 63
实验12 银染法DNA序列测定 86
应用篇 95
实验13 原核细胞中外源基因的表达和初步纯化 95
实验14 蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 101
实验15 昆虫细胞中外源基因的表达 107
实验16 蛋白质的Western印迹分析 112
实验17 土壤农杆菌介导的烟草基因转化 119
实验18 应用微弹轰击法进行兰花基因转化 127
实验19 植物总DNA的提取 135
实验20 DNA探针的制备 138
实验21 DNA的Southern印迹分析(用同位素标记探针) 146
实验22 DNA的Southern印迹分析(用Dig标记探针) 152
实验23 mRNA的Northern印迹分析(用Dig标记探针) 156
实验24 酵母双杂系统研究蛋白质的相互作用 163
实验25 CytoTrap酵母双杂系统研究蛋白质的相互作用 169
实验26 DNA-蛋白质的相互作用 183
实验27 蛋白质核酸结合活性的分析 190
实验28 以烟草脆裂病毒为载体通过基因沉默分析植物基因功能 194
实验29 水稻突变体库的创建 200
实验30 转基因水稻突变体T-DNA侧翼序列的扩增与分析 206
实验31 亚克隆及检测的独立设计与操作 217
探索篇 217
实验32 土壤农杆菌感受态细胞的制备和转化 219
实验33 不同植物材料组织的再生培养 221
实验34 在酵母细胞中表达外源基因 223
实验35 应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达蛋白 225
实验36 检测蛋白质的相互作用——Protein Overlay 228
实验37 沉默转GUS基因烟草中的GUS基因 230
实验38 拟南芥T-DNA突变库的构建 232
实验39 用RNAi的方法研究拟南芥基因功能 234
主要参考资料 236