《现代分子生物学实验技术》PDF下载

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  • 作  者:魏春红,李毅主编
  • 出 版 社:北京:高等教育出版社
  • 出版年份:2006
  • ISBN:7040192764
  • 页数:237 页
图书介绍:本书主要介绍了现代分子生物学科研中一些最新的、基本的、综合性的及科研探索性的实验方法原理和操作等,共分三部分。第一部内容包括基因克隆和分析,主要训练学生分子生物学实验方法和操作技能。第二部分内容是克隆的基因在科学研究中的几种应用,通过几个系统的综合性实验,主要培养学生的科研思维、实验设计及观察分析能力。第三部分是探索性实验,要求学生对科研中可能遇到的一些问题设计出解决问题的具体方案,通过实验检测其可行性及高效性,提高学生的科研兴趣和解决实际问题的综合能力。本书可作为本科生、研究生教材和相关科研人员的参考书。

基础篇 3

实验1 碱法提取质粒 3

实验2 煮沸法提取质粒 12

实验3 质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳 16

实验4 质粒的限制性内切酶反应分析 22

实验5 用玻璃奶回收琼脂糖凝胶中的DNA 28

实验6 DNA的连接 31

实验7 E.coli DH5α感受态细胞的制备及转化 36

实验8 植物总RNA的提取 41

实验9 聚合酶链反应——PCR 45

实验10 cDNA末端快速扩增——RACE 51

实验11 高通量基因克隆技术 63

实验12 银染法DNA序列测定 86

应用篇 95

实验13 原核细胞中外源基因的表达和初步纯化 95

实验14 蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 101

实验15 昆虫细胞中外源基因的表达 107

实验16 蛋白质的Western印迹分析 112

实验17 土壤农杆菌介导的烟草基因转化 119

实验18 应用微弹轰击法进行兰花基因转化 127

实验19 植物总DNA的提取 135

实验20 DNA探针的制备 138

实验21 DNA的Southern印迹分析(用同位素标记探针) 146

实验22 DNA的Southern印迹分析(用Dig标记探针) 152

实验23 mRNA的Northern印迹分析(用Dig标记探针) 156

实验24 酵母双杂系统研究蛋白质的相互作用 163

实验25 CytoTrap酵母双杂系统研究蛋白质的相互作用 169

实验26 DNA-蛋白质的相互作用 183

实验27 蛋白质核酸结合活性的分析 190

实验28 以烟草脆裂病毒为载体通过基因沉默分析植物基因功能 194

实验29 水稻突变体库的创建 200

实验30 转基因水稻突变体T-DNA侧翼序列的扩增与分析 206

实验31 亚克隆及检测的独立设计与操作 217

探索篇 217

实验32 土壤农杆菌感受态细胞的制备和转化 219

实验33 不同植物材料组织的再生培养 221

实验34 在酵母细胞中表达外源基因 223

实验35 应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达蛋白 225

实验36 检测蛋白质的相互作用——Protein Overlay 228

实验37 沉默转GUS基因烟草中的GUS基因 230

实验38 拟南芥T-DNA突变库的构建 232

实验39 用RNAi的方法研究拟南芥基因功能 234

主要参考资料 236