目录 3
译者序 3
前言 3
致谢 3
基础理论篇 3
第一章 如何得知DNA是遗传物质 3
第一节 分子生物学是多学科交叉的结果 4
第二节 分子生物学的基础是物理／化学原则和抽象的模式系统 5
第三节 后基因组时代要求采用更加综合的研究手段 5
第四节 分子生物学源于结构-功能关系说 6
第五节 分子生物学源于研究遗传本质的好奇 7
第六节 如何解释物种的多样性（和相似性）？ 8
第七节 性状如何在不同世代之间传递？ 10
第八节 基因位于何处？ 13
第九节 进化与遗传学之间有何联系？ 15
第十节 基因是物质实体吗？ 16
第十一节 基因具有哪些功能？ 20
第十二节 遗传物质是何分子？ 22
第十三节 DNA分子的结构 27
参考文献 30
第二章 如何了解DNA的功能 32
第一节 DNA如何复制？ 32
第二节 DNA如何多次复制？ 33
第三节 染色体末端如何复制？ 36
第四节 DNA的信息如何指导蛋白质合成？ 37
第五节 细胞如何制造RNA？ 39
第六节 蛋白质是20种不同氨基酸组成的线性聚合物 40
第七节 解析了胰岛素的一级结构 43
第八节 蛋白质如何合成？ 44
第九节 合成蛋白质的过程 47
第十节 如何知道基因中的信息直接翻译为蛋白质？ 48
第十一节 蛋白质在翻译后被修饰 51
第十二节 蛋白质如何被降解？ 53
第十三节 中心法则 53
参考文献 55
第三章 基因调控 56
第一节 真核生物的基因调控 60
第二节 RNA的加工 62
第三节 可变剪接 68
第四节 翻译控制 71
第五节 玉米中的转座子 72
第六节 基因重排 73
第七节 组织特异性基因调控 77
第八节 基因的协调表达 78
参考文献 85
第四章 DNA科学的基本工具和技术 86
第一节 限制性内切核酸酶 87
第二节 凝胶电泳 91
第三节 质粒载体 93
第四节 宿主细胞：大肠杆菌 97
第五节 转化 98
第七节 重组质粒的分离分析 100
第六节 电转化 100
第八节 第一个重组DNA分子 102
第九节 模式生物 104
参考文献 112
第五章 重要基因的鉴别和表达 113
第一节 生物化学家和分子遗传学家面临的问题 113
第二节 分子生物学家的解决办法：构建和筛选文库 115
参考文献 148
第六章 全基因组分析的现代方法 149
第一节 人类基因组计划的产生 152
第二节 染色体图谱和标记 155
第三节 层次鸟枪克隆库 164
第四节 表达序列标签 165
第五节 全基因组鸟枪测序 166
第六节 人类基因组测序的尾声 168
第七节 生物信息学：在我们的基因中寻找信息 170
第八节 人类基因组之外 172
第九节 人类基因组的结构和意义 176
第十节 为什么基因这么少而“垃圾”却这么多？ 178
推荐读物 181
第七章 癌症的DNA科学原理 182
第一节 何为癌症？ 182
第二节 用肿瘤病毒制作癌症模型 184
第三节 病毒癌基因的起源：转导 187
第四节 病毒和人类癌症 190
第五节 哺乳动物细胞转染 191
第六节 人类癌基因：好基因变坏 192
第七节 肿瘤抑制基因 195
第八节 癌基因和肿瘤抑制因子的联合 196
第九节 合作转化和“多次打击”瘤形成学说 197
第十节 致癌剂、点突变和高危个体 199
第十一节 染色体异常和基因扩增 200
第十二节 信号转导：癌症是细胞内一种通讯异常的疾病 202
第十三节 细胞周期与凋亡 206
第十四节 提高对癌症的诊断和治疗能力 208
参考文献 213
第八章 DNA科学在人类遗传学和进化研究中的应用 214
第一节 CharlesDavenport和优生学 215
第二节 优生学将“不良品性”归咎于基因 217
第三节 现代人类遗传学碰到的问题 223
第四节 决定人类疾病的染色体基础 224
第五节 DNA多态性的重要性 230
第六节 基因克隆：从连锁分析到DNA诊断 237
第八节 寻找与复杂疾病有关的基因 245
第七节 药物基因组学 245
第九节 回顾人类和人口的发展史 249
第十节 生物学意义上的种族概念 250
第十一节 化石记录告诉了我们哪些人类进化的事？ 252
第十二节 DNA分子钟 253
第十三节 DNA和人类进化 254
推荐读物 263
国家卫生研究院条例 265
大肠杆菌的使用 265
实验室废物处理 265
实验室安全操作和国家卫生研究院安全条例 265
实验教程篇 265
微生物学的基本操作 266
溴化乙锭的使用 266
参考文献 267
实验一 称量、微量移液和灭菌消毒技术 268
注意事项 269
预实验 269
材料 270
方法 270
结果与讨论 274
进一步研究 275
实验二 细菌的培养技术 276
A部分 单菌落的分离 277
注意事项 277
预实验 278
方法 279
材料 279
结果与讨论 281
B部分 过夜悬浮培养 283
注意事项 283
预实验 284
材料 284
方法 284
结果与讨论 285
进一步研究 286
C部分 对数期培养 287
注意事项 287
预实验 288
材料 288
方法 288
结果与讨论 290
进一步研究 290
实验三 DNA的限制性内切核酸酶分析 292
注意事项 293
材料 299
预实验 299
方法 300
结果与讨论 303
进一步研究 307
实验四 DNA甲基化对限制性内切核酸酶反应的影响 310
注意事项 311
预实验 312
方法 313
材料 313
结果与讨论 317
进一步研究 318
实验五 质粒DNA快速转化大肠杆菌的方法 319
注意事项 320
预实验 323
材料 323
方法 324
结果与讨论 327
进一步研究 329
实验六 抗生素抗性酶的分析 330
注意事项 331
预实验 332
材料 333
方法 333
结果与讨论 335
进一步研究 336
A部分 利用HIC方法纯化GFP 338
实验七 GFP重组体的纯化和鉴定 338
注意事项 339
预实验 340
材料 340
方法 341
结果与讨论 341
进一步研究 342
B部分 纯化的GFP蛋白的PAGE分析 342
注意事项 342
材料 343
预实验 343
方法 344
结果与讨论 345
进一步研究 345
实验八 质粒DNA的纯化和鉴定 346
A部分 pAMP质粒的小量制备 346
注意事项 347
预实验 348
材料 348
方法 349
结果与讨论 351
进一步研究 351
B部分 纯化pAMP的限制性内切核酸酶分析 352
注意事项 352
预实验 353
材料 354
方法 354
结果与讨论 357
进一步研究 359
实验九 具有抗生素抗性基因的重组 360
A部分 pAMP和pKAN质粒的限制酶切 361
注意事项 362
预实验 362
材料 363
方法 363
结果与讨论 365
B部分 pAMP和pKAN限制酶切片段的连接 366
材料 367
注意事项 367
预实验 367
方法 368
结果与讨论 368
进一步研究 369
实验十 重组DNA转化大肠杆菌 370
A部分 感受态细胞的传统制备方法 370
预实验 371
注意事项 371
材料 372
方法 372
B部分 重组DNA转化大肠杆菌 374
注意事项 375
预实验 375
材料 375
方法 376
结果与讨论 378
进一步研究 379
实验十一 影印培养鉴定大肠杆菌菌落 381
注意事项 382
预实验 382
材料 383
方法 383
结果与讨论 383
进一步研究 384
A部分 pAMP/pKAN重组质粒的小量制备 386
实验十二 纯化和鉴定重组DNA 386
注意事项 387
预实验 388
材料 388
方法 388
B部分 纯化的重组质粒的酶切分析 390
注意事项 391
预实验 391
材料 392
方法 392
结果与讨论 395
进一步研究 397
答案与讨论 400
实验一 称量、微量移液和灭菌消毒技术 400
实验二A 单菌落的分离 400
实验二C 对数期培养 401
实验三 DNA的限制性内切核酸酶分析 401
实验二B 过夜悬浮培养 401
实验四 DNA甲基化对限制性内切核酸酶反应的影响 403
实验五 质粒DNA快速转化大肠杆菌的方法 404
实验六 抗生素抗性酶的分析 406
实验七 A利用HIC方法纯化GFP 406
实验七 B纯化的GFP蛋白的PAGE分析 406
实验八A pAMP质粒的小量制备 407
实验八B 纯化pAMP的限制性内切核酸酶分析 408
实验九B pAMP和pKAN限制酶切片段的连接 409
实验十B 重组DNA转化大肠杆菌 410
实验十一 影印培养鉴定大肠杆菌菌落 412
附录1 仪器、耗材与试剂 413
Ⅰ．仪器 413
Ⅱ．耗材 414
Ⅲ．培养基 414
Ⅳ．培养基成分 415
Ⅴ．生物试剂与酶类 415
Ⅵ．试剂 416
Ⅷ．试剂盒 417
Ⅶ．试剂组分 417
供应商 418
附录2 培养基、试剂、贮存液的配制 419
Ⅰ．细菌培养 420
Ⅱ．DNA的限制性内切核酸酶酶切 424
Ⅲ．凝胶电泳 426
Ⅳ．细菌转化 428
Ⅵ．蛋白质纯化 429
Ⅴ．酶活性分析 429
Ⅶ．质粒的小量制备 430
Ⅷ．DNA连接 432
附录3 pAMP、pKAN、pBLU、pGREEN及λ噬菌体的限制酶切图谱 434
附录4 注意事项 439
常规的注意事项 439
常用化学药品的一般特性 440
有毒的物质 440
索引 444