第一篇 生物化学实验基础 3
第1章 生物化学实验的基本知识 3
1.1 实验室规范 3
1.2 玻璃仪器 6
1.3 生物化学实验常用仪器 11
第2章 生物化学实验的基本要求 19
2.1 实验样品的制备 19
2.2 实验的准确性与误差 24
2.3 实验记录和实验报告 26
第3章 生物化学基本实验技术 28
3.1 层析技术 28
3.2 电泳技术 36
3.3 离心技术 42
3.4 膜分离技术 49
3.5 光谱学技术 53
3.6 其他生化实验技术 63
第二篇 生物化学实验 73
第4章 蛋白质 73
实验1 氨基酸和蛋白质的呈色反应 73
实验2 蛋白质等电点的测定和沉淀反应 77
实验3 血清蛋白盐析及分子筛层析脱盐 79
实验4 蛋白质含量的测定 81
Ⅰ 双缩脲法测定蛋白质含量 81
Ⅱ 考马斯亮蓝结合法测定蛋白质含量（Bradford法） 83
Ⅲ 紫外光吸收法测定蛋白质含量 85
Ⅳ 微量凯氏定氮法测定总蛋白含量 86
实验5 氨基酸的分离鉴定 88
Ⅰ 纸层析分离鉴定氨基酸 88
Ⅱ 离子交换层析分离混合氨基酸 89
实验6 血清蛋白的醋酸纤维素薄膜电泳 91
实验7 DNS-氨基酸的制备和鉴定 93
实验8 DNP-氨基酸的制备和鉴定 96
实验9 用DNS法鉴定蛋白质或多肽的N-端氨基酸 98
实验10 SDS-聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离细菌总蛋白质 100
实验11 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量 102
实验12 牛乳中蛋白质的提取与鉴定 106
实验13 大豆蛋白的提取与含量测定 107
第5章 核酸 110
实验14 核酸含量的测定 110
Ⅰ 定磷法定量测定核酸 110
Ⅱ 地衣酚法定量测定RNA 112
Ⅲ 二苯胺法测定DNA含量 113
实验15 过碘酸氧化法定量测定核苷酸 114
实验16 酵母核糖核酸的分离及组分鉴定 117
实验17 菜花（花椰菜）中核酸的分离和鉴定 119
实验18 动物肝脏中DNA的提取 121
实验19 碱裂解法小量提取质粒DNA 123
实验20 DNA琼脂糖凝胶电泳 124
实验21 AMP、ADP和ATP的分离 126
Ⅰ 薄层层析分离AMP、ADP和ATP 126
Ⅱ 醋酸纤维素薄膜电泳鉴定AMP、ADP、ATP 128
第6章 酶学 130
实验22 酶的特性实验 130
实验23 米氏常数测定 131
Ⅰ 脲酶米氏常数的简易测定 131
Ⅱ 过氧化氢酶米氏常数的测定 133
Ⅲ 胰蛋白酶米氏常数的测定 135
实验24 酶活力的测定 136
Ⅰ 液化型淀粉酶活力的测定 136
Ⅱ 薄层层析法鉴定转氨酶活性 138
Ⅲ 分光光度法测定血液中转氨酶的活力 139
实验25 酶的制备 142
Ⅰ 乳酸脱氢酶粗提液的制备及活力测定 142
Ⅱ 枯草杆菌碱性磷酸酶的制备及酶活力的测定 143
Ⅲ 马铃薯多酚氧化酶的制备及性质实验 146
实验26 酶的固定化及对酶活性的影响 148
实验27 琥珀酸脱氢酶竞争性抑制 150
实验28 蔗糖酶纯度和相对分子质量测定（SDS-PAGE电泳法） 152
第7章 维生素和辅酶 155
实验29 紫外分光光度法测定鱼肝油中维生素A的含量 155
实验30 食物中脂溶性维生素含量分析（高效液相色谱） 156
实验31 维生素B1的定性测定 159
实验32 维生素B1的含量测定 160
实验33 荧光光度法测定维生素B2的含量 162
实验34 测定维生素C的含量 163
Ⅰ 2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C的含量 163
Ⅱ 铜离子氧化法测定维生素C的含量 165
Ⅲ 磷钼酸法测定维生素C的含量 166
实验35 辅酶Q10的制备和检测 168
实验36 分离层析仪分离核黄素和血红蛋白 170
第8章 生物能学和物质代谢 173
实验37 丙酮酸含量的测定（分光光度法） 173
实验38 发酵过程中无机磷的利用 174
实验39 肌糖原酵解作用 175
实验40 糖酵解中间产物的鉴定 177
实验41 脂肪酸的β-氧化 178
实验42 2,6-二氯酚靛酚显色反应测定电子传递 180
实验43 乳酸脱氢酶的递氢作用 181
第9章 综合性实验 184
实验44 糖的颜色反应 184
Ⅰ Molisch反应鉴定醛糖 184
Ⅱ Seliwanoff反应鉴定酮糖 185
Ⅲ Tollen反应鉴定戊糖 186
实验45 血糖含量的测定 187
Ⅰ Fo1in-Wu法测定血糖含量 187
Ⅱ Folin-Malmors法测定血糖含量 188
Ⅲ 邻甲苯胺法测定血糖含量 190
Ⅳ GOD-PAP法测定血糖含量 192
实验46 总糖和还原糖含量的测定 193
Ⅰ 蒽酮比色法测定糖的含量 193
Ⅱ 斐林试剂比色法测定糖的含量 195
实验47 脂类的测定 197
Ⅰ 索氏抽提法测定粗脂肪含量 197
Ⅱ 脂肪酸的测定 199
Ⅲ 血清甘油三酯简易测定法 200
Ⅳ 醋酸酐法测定血清中胆固醇含量 201
实验48 天然产物中多糖的分离、纯化与鉴定 203
Ⅰ 多糖的提取、纯化 203
Ⅱ 多糖的鉴定 204
实验49 血清蛋白的分离、纯化与鉴定 205
实验50 凝胶层析法分离纯化脲酶 209
实验51 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 212
实验52 质粒DNA的分离、纯化及鉴定 214
实验53 多聚酶链式反应（PCR）技术扩增目的基因片段 217
实验54 重组质粒DNA的转化 219
实验55 感受态细胞的制备及转化 221
实验56 DNA的酶切分析 223
实验57 植物总黄酮的提取与测定 225
第10章 设计性实验 227
实验58 半定量RT-PCR检测基因的表达差异 227
实验59 卵磷脂的提取和鉴定 229
实验60 强酸性阳离子交换树脂在废水处理中的应用 231
实验61 转基因植物的PCR鉴定 233
实验62 三聚氰胺含量的测定 234
附录 235
附录A 缓冲液的配制 235
附录B 常用实验数据表 240
附录C 硫酸铵饱和度常用表 245
附录D 层析技术实验数据 246
参考文献 249