目录 1
第一部分 绪论和基本理论知识 1
1绪论 1
组织培养基本概念 1
对组织培养的评价 2
组织培养发展简史 3
早期组织培养 3
组织培养的建立 3
现代组织培养 4
组织培养的发展 4
我国组织培养的发展 6
对组织培养工作者的要求和工作方法 7
2组织培养细胞生物学 8
体内、外细胞的差异和分化 8
差异 8
分化 9
体外培养细胞的分型 10
贴附型 10
细胞形态结构 13
大体形态 13
悬浮型 13
超微结构 15
组织培养细胞的生长和增殖过程 16
组织培养细胞生命期 16
组织培养细胞一代生长过程 18
细胞周期 21
细胞相互关系 24
组织培养细胞遗传学特征 25
细胞生存环境和代谢 27
天然培养基 33
合成培养基 33
人工培养基 33
无血清培养基 34
附着底物 34
抑制细胞生长因素 35
细胞代谢 35
3建立细胞系或细胞株 39
体外培养细胞的种类和命名 39
建立细胞系（或株）的要求 41
已建立细胞的鉴定、管理和使用 42
无菌操作设施 43
实验室设计 43
第二部分 实验室设施条件、培养用液 43
4实验室设计和设备 43
实验室设备 46
大型装置和仪器 47
器械 51
培养器皿 51
杂用品 53
5培养用液 55
水 56
平衡盐溶液 56
水和平衡盐溶液 56
天然培养基 58
鸡血浆的制备 58
鸡胚浸出液的制备 58
小牛血清 60
水解乳蛋白 62
鼠尾胶原 63
合成培养液 64
合成培养液的种类 64
合成培养液的主要成分 74
合成培养液的配制 75
培养液的种类 82
无血清培养基 83
基础培养液 84
附加成分 84
其它常用液 88
消化液 88
pH调整液 90
抗生素液 90
6清洗与消毒 91
清洗 91
玻璃器皿 92
胶塞 93
塑料器皿 94
包装 94
消毒 94
紫外线 95
干热消毒 95
湿热消毒 95
滤过消毒 96
射线消毒 97
消毒剂的使用 98
无菌操作 100
基本要领和要求 100
第三部分 基本培养技术 100
7细胞和组织培养基本技术方法 100
取材 102
取鸡胚组织 102
取鼠胚组织 103
取皮肤 104
取血 104
取骨髓组织、羊水、胸水和腹水 104
机械分散组织法 105
切割分离组织法 105
离心分离法 105
组织分离 105
消化分离法 107
细胞计数法 112
细胞冻存 114
原理 114
要点 115
冻存方法 115
复苏方法 117
初代培养 119
双盖片悬滴培养法 119
细胞运输 119
8天然培养基组织培养法 119
换液和传代 121
柯氏瓶培养法 122
9人工合成限定培养基组织培养法 123
初代培养 124
消化培养法 124
组织块培养法 127
传代培养 128
加支持物培养法 130
要求 131
原理 131
悬浮培养 131
要点 131
10单细胞分离培养 131
提高克隆形成率的措施 132
技术方法 135
低密度细胞悬液的制备 136
接种 138
11微载体细胞培养 142
微载体及其性质 143
原理 143
微载体细胞培养方法 145
12球体细胞培养 146
原理 146
培养方法 146
球体细胞培养 146
球体细胞和单层细胞混合培养 148
13培养细胞生物学检测和建立细胞株（或系） 149
细胞培养常规检查 149
形态学方面 151
细胞生物学检测 151
细胞生长方面 153
活细胞直接观察 156
细胞遗传学方面 156
细胞转化及恶性程度检查 156
其它方面观察 160
14培养细胞同工酶的测定 160
原理 160
方法 161
要点 162
15二倍体细胞培养 162
方法 163
16建立突变细胞系 163
原理 163
突变 164
HGPRT基因 164
方法 165
细胞选择 165
诱发HGPRT－缺欠型 166
肿瘤细胞生物学特性 168
肿瘤细胞培养基本知识 168
17肿瘤细胞培养 168
肿瘤细胞培养技术要点 169
体外培养肿瘤细胞生物学检测 175
对肿瘤细胞株或细胞系的评价 175
18各别器官组织细胞的培养 176
上皮细胞培养 176
表皮细胞培养 177
乳腺组织培养 178
内皮细胞培养 180
传代培养 182
消化法培养 182
肝细胞培养 182
初代组织块培养 182
神经胶质细胞培养 183
肌组织培养 184
骨骼肌细胞培养 184
心肌细胞培养 185
巨噬细胞培养 185
培养技术要点 185
培养方法 187
空气 189
污染途径 189
19组织培养的污染、检测和排除 189
清洗消毒 190
操作 190
血清 190
组织 190
污染对细胞的影响 190
霉菌污染 191
细菌污染 191
支原体污染和检测 191
支原体种类 191
支原体生物学特性和对细胞的影响 192
支原体的检测 194
微生物污染的排除 197
抗生素 197
加温处理 197
动物体内接种 198
巨噬细胞吞噬法 198
细胞和固定 200
常用固定液 200
细胞培养 200
20细胞形态学和细胞化学观察法 200
第四部分 观察法和研究技术 200
一般染色法 201
苏木精－伊红染色 201
Giemsa染色法 202
May-Grünwald-Giemsa染色 203
火棉胶揭膜法 203
细胞化学法 204
Fuelgen反应显示DNA方法 204
甲绿－派郎宁显示DNA和RNA 206
吖啶橙荧光染色法显示DNA和RNA 207
2,2－二羟基－6,6－二萘基二硫化物（DDD）法显示硫氢基 208
过碘酸Schiff反应显示糖原和其它多糖 209
苏丹黑B显示脂类（McMaus改良法） 210
碱性磷酸酶的显示 211
酸性磷酸酶的显示 213
三磷酸腺苷酶显示法 214
葡萄糖－6－磷酸酶显示法 216
细胞色素氧化酶 217
琥珀酸脱氢酶显示法（简称SDH） 218
乳酸脱氢酶（LDH） 219
葡萄糖－6－磷酸脱氢酶 219
原理 220
电子显微镜观察法 220
原位包埋法 221
脱钙卵壳膜包埋法 223
聚苯乙烯盖片培养 225
离心分离包埋法 225
21活细胞观察法 226
培养瓶细胞直接摄影 226
活细胞相差显微摄影 227
缩时显微摄电影术 229
拍摄用培养细胞的准备 230
显微摄影装置 230
暗室设施 230
缩时间隔确定 232
拍摄程序 233
22细胞遗传学方法 234
性染色质检查法 234
原理 234
常用显示染色体方法 234
碳酸复红显示法 235
硫堇染色法 235
原理 236
染色体显示法 236
Y．染色质显示法 236
染色体显带 242
显Q带法 244
胰酶－Giemsa显G带法 244
显G带法之二 245
姐妹染色单体分化染色 245
微核试验用细胞 248
原理 248
微核试验 248
染色体脆性位点检测 248
微核试验方法 249
微核的标准 249
23细胞融合法 250
原理 250
方法 251
仙台病毒诱导细胞融合法 251
聚乙二醇（PEG）诱导细胞融合法 252
杂种细胞的选择 253
细胞行为特性的选择 256
染色体的分离 256
24非程序DNA合成 257
原理 257
UDS用细胞 258
UDS的测定 258
放射自显影法 258
细胞 259
本底 259
药物特性 259
影响UDS因素 259
液闪计数法 259
25细胞脱核法 260
原理 260
脱核程序 262
26同位素标记自显影术 263
原理 263
技术方法（脉冲式标记） 265
27细胞同步化法 266
细胞分裂相脱离法 267
秋水仙素阻抑法 268
离心分离同型细胞法 268
胸腺嘧啶核苷双阻断法 269
28细胞分离技术 269
梯度沉降法 270
原理 270
方法 271
束流荧光分离细胞法 274
细胞自发转化 276
基本概念和原理 276
细胞转化与恶变 276
29体外培养细胞的转化 276
第五部分 组织培养技术的应用 276
人工诱发细胞恶性转化 277
细胞转化基本过程 277
诱发 277
DNA的损伤与修复 277
发展和表现 278
转化实验方法 278
细胞 278
人工诱发转化实验程序 280
转化细胞的检测 283
30细胞培养在癌基因研究中的应用 284
基本原理 285
关于癌基因 285
技术方法 285
总DNA的提取 285
转染 287
共转染 289
受体细胞的选择 290
细胞选择 291
31组织培养药物测试 291
药物剂量 292
测试程序 293
观测指标 294
32在杂交瘤技术中的应用 295
原理 296
杂交瘤细胞的制备 298
克隆化培养 303
抗体的检测 305
单克隆抗体的大量制备 307
缩写名词 308
第六部分 附录 308
常用名词译名和释义 310
国内已建人和动物的一些主要细胞系（或株） 313
国际常用细胞系（或株） 317
常用人工合成培养基 319
常用液体配制技术和参考资料 320
实验常用度量衡 323
酒精稀释表 324
缓冲液 325
离心速度和离心力换算表 326
参考资料 326