目录 1
第一部分 生物化学基本技术及应用 1
实验一 分光光度技术 1
Ⅰ 可见光分光光度计的使用 2
Ⅱ 紫外分光光度计的使用 6
实验二 层析技术 11
Ⅰ 氨基酸的单向纸上层析 13
Ⅱ 氨基酸的硅胶薄层层析 15
Ⅲ 葡聚糖凝胶柱层析分离核黄素和血红蛋白 17
实验三 电泳技术 20
Ⅰ 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质 21
Ⅱ 琼脂糖凝胶电泳分离血清脂蛋白 24
Ⅲ 聚丙烯酰胺凝胶板状电泳分离血清蛋白质 27
实验四 离心技术 30
Ⅰ 离心分离法分离血浆球蛋白和清蛋白 32
Ⅱ 差速离心法分离亚细胞结构 34
Ⅰ 双缩脲法 37
实验五 蛋白质的定量测定 37
第二部分 生物化学基本实验 37
Ⅱ Folin-酚试剂法(Lowry法) 39
Ⅲ 紫外分光光度法 41
Ⅳ 染料结合比色法 43
实验六 酶活性的测定 45
Ⅰ 脲酶米氏常数的测定 45
Ⅱ 血清丙氨酸氨基转移酶活性的测定(改良赖氏法) 48
Ⅲ 胰脂肪酶活性的测定 51
Ⅳ 血清乳酸脱氢酶同工酶的测定 54
实验七 核酸含量的测定 56
Ⅰ 定磷法 56
Ⅱ 定糖法 59
Ⅲ 紫外分光光度法 63
实验八 维生素C的定量测定 65
Ⅰ 还原型维生素C的测定(2,6-二氯酚靛酚法) 65
Ⅱ 总维生素C的测定(2,4-二硝基苯肼法) 67
实验九 血糖浓度的测定 70
Ⅰ 邻甲苯胺法 70
Ⅱ 葡萄糖氧化酶法 72
实验十 血清总胆固醇的测定 75
Ⅰ 硫磷铁显色法 75
Ⅱ 酶法(CE-COD-POD法) 77
实验十一 血清三脂酰甘油的测定 79
Ⅰ 乙酰丙酮显色法 79
Ⅱ 酶法(GK-GPO-POD法) 82
实验十二 血浆脂蛋白的测定 84
——聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳法 84
实验十三 血清(浆)尿素氮的测定 87
Ⅰ 二乙酰一肟法 87
Ⅱ 脲酶法(半酶法) 89
第三部分 生物化学制剂制备综合实验 92
实验十四 血清γ-球蛋白的分离、纯化及鉴定 92
实验十五 核酸的提取、分离及鉴定 97
实验十六 亚麻子油脂肪酸的制备及其定量测定 102
Ⅱ 磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 107
Ⅰ 甘氨酸-盐酸缓冲液(0.05mol/L) 107
一、常用缓冲液的配制方法 107
附 录 107
Ⅲ 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0.1mol/L) 108
Ⅳ 乙酸-乙酸钠缓冲液(0.2mol/L) 108
V 磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.2mol/L) 109
Ⅵ 巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃) 109
Ⅶ Tris-盐酸缓冲液(0.05mol/L,25℃) 110
Ⅷ 甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(0.05mol/L) 110
Ⅰ 调整硫酸铵溶液饱和度计算表(25℃) 111
二、硫酸铵饱和度的常用表 111
Ⅱ 调整硫酸铵溶液饱和度计算表(0℃) 112
Ⅲ 不同温度下的饱和硫酸铵溶液 112
三、离心机转速n与相对离心力(RCF)的换算 113
四、国产化学试剂的等级表示法 114
五、一些常用单位 114
Ⅰ 长度单位 114
Ⅱ 体积单位 114
Ⅲ 重量单位 115
Ⅳ 摩〔尔〕数与摩〔尔〕浓度表示法 115