第一篇 生物化学与分子生物学实验基本技术第一章 常用玻璃仪器的清洁与校正 1
第一节 常用玻璃仪器的名称和主要用途 1
第二节 常用玻璃仪器的清洁与校正 2
第二章 分光光度分析技术 7
第一节 紫外-可见分光光度分析技术 7
第二节 荧光分光光度分析技术 12
第三章 层析技术 15
第一节 概述 15
第二节 几种常用的层析方法 16
第四章 电泳技术 23
第一节 电泳技术的原理与分类 23
第二节 几种常用的电泳技术 25
第五章 离心技术 31
第一节 离心技术的基本原理 31
第二节 常用的离心分离方法 35
第六章 DNA体外重组技术 38
第七章 分子杂交基本原理 47
第一节 核酸分子探针技术 47
第二节 几种常见的杂交 48
第八章 基因文库技术 52
第一节 基因组文库 52
第二节 cDNA文库 54
第九章 聚合酶链式反应(PCR技术) 57
第一节 聚合酶链式反应的原理 57
第二节 PCR反应的成分和作用 57
第三节 PCR反应引物的设计 59
第四节 几种特殊的PCR 60
第五节 PCR技术的应用 61
第十章 DNA序列分析 63
第十一章 分子标记技术 66
第二篇 生物化学与分子生物学实验 70
第一章 蛋白质的分离、纯化与鉴定 70
实验一 血清γ-球蛋白的分离与纯化 70
实验二 蛋白质的鉴定——电泳法 73
实验三 凝胶层析分离蛋白质(血红蛋白与胰蛋白酶的分离) 78
实验四 DEAE纤维素离子交换层析法分离蛋白质 79
实验五 血浆脂蛋白的超速离心分离 81
实验六 碱性磷酸酶的分离与纯化 82
实验七 蛋白质的定量测定 86
第二章 酶学 90
实验八 温度对酶活性的影响 90
实验九 pH对酶活性的影响 91
实验十 激活剂和抑制剂对酶活性的影响 93
实验十一 酶的竞争性抑制作用 94
实验十二 碱性磷酸酶米氏常数(Km)测定 96
实验十三 磷酸盐对碱性磷酸酶的抑制作用 100
实验十四 乳酸脱氢酶活性测定 102
实验十五 乳酸脱氢酶同工酶分析 104
第三章 物质代谢 106
实验十六 血糖测定——Folin-吴宪氏法 106
实验十七 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 108
实验十八 运动对尿中乳酸含量的影响 109
实验十九 饱食、饥饿对动物肝糖原含量的影响 110
实验二十 血清胆固醇测定 111
实验二十一 酮体的生成和利用 115
实验二十二 肝脏中酮体生成作用 117
实验二十三 血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 119
实验二十四 血清过氧化物(LPO)测定——荧光法 121
实验二十五 血清谷丙转氨酶的测定 122
实验二十六 纸层析法鉴定转氨酶的转氨基作用 124
实验二十七 尿酸含量测定 126
第四章 临床生化检验 128
实验二十八 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳 128
实验二十九 血清甘油三酯测定(乙酰丙酮显色法) 130
实验三十 血清游离脂肪酸测定(一次提取比色法) 132
实验三十一 血液尿素氮(BUN)的测定——二乙酰-肟显色法 135
实验三十二 血清碱性磷酸酶(ALP)测定 137
实验三十三 血清单胺氧化酶(MAO)测定 139
实验三十四 血清肌酸激酶测定(肌酸显色法) 141
实验三十五 尿中酮体定性——Lange法 144
实验三十六 血氨测定(碱性酚次氯酸盐法) 145
实验三十七 血清钙测定 147
实验三十八 血清无机磷测定 148
第五章 分子生物学实验 151
实验三十九 RNA的提取与鉴定 151
实验四十 DNA的提取与鉴定 154
实验四十一 质粒DNA的提取及酶切 156
实验四十二 目的DNA片段的回收 158
实验四十三 PCR基因扩增 159
附录 162