目录 3
上篇 禽传染病实验室诊断技术 3
第一章 实验室工作基本技术 3
第一节 实验室工作注意事项及防护处理 3
一、实验室工作注意事项 3
二、意外事件的预防和处理 4
第二节 常用药械的准备及使用方法 5
一、常用器材和药品 5
二、物品订购、贮藏及财产登记 8
三、常用仪器设备的使用方法 9
第三节 菌（毒）种保存法及保存培养基 21
一、菌（毒）种保存法 21
二、菌（毒）种保存培养基 23
一、冻干菌（毒）种的启封 24
第四节 其他技术 24
二、棉塞的制作 25
三、移液管的包装 25
四、使用吸管的技术 25
参考文献 26
第二章 培养基的制造与应用 27
第一节 培养基的分类 27
一、以成分区分 27
二、以形态区分 27
三、以用途区分 28
第二节 制造培养基前的准备 29
一、常用玻璃器皿的准备 29
二、原材料的准备 30
三、投料、配制 36
二、培养基的制造记录 36
一、材料用量的计算 36
第三节 培养基制造程序 36
四、培养基pH的调节 37
五、过滤和分装 43
六、培养基的灭菌和贮存 44
七、培养基的质量检验 47
参考文献 48
第三章 细菌的分离培养及鉴定 49
第一节 病料的采集和运送 49
一、采集病料的注意事项 49
二、采集病料的方法 49
三、病料的运送 50
第二节 细菌的分离培养 51
一、待检材料的处理 51
二、分离培养注意事项 52
三、细菌的分离和接种 53
四、细菌的培养方法 55
五、获取纯菌的方法 57
六、细菌计数法 58
第三节 细菌的鉴定 60
一、形态学检查 60
二、培养特性检查 67
三、生化特性检查 71
四、细菌血清型鉴定及血清学试验 96
第四节 细菌毒力测定 97
参考文献 98
第四章 细菌DNA G+C含量的测定 100
一、细菌DNA的提取 100
二、细菌DNA G+C含量的测定——热变性温度法 101
参考文献 104
第五章 药物敏感试验 105
第一节 药物敏感试验的目的和原理 105
一、药物敏感试验的目的 105
二、药敏测定的原理 106
第二节 单价药物对细菌的药敏测定 106
一、试管两倍稀释法 106
二、微量稀释法 107
三、琼脂平板稀释法 108
四、药物纸片琼脂扩散法（纸片法） 108
五、Stokes纸片比较法 116
六、影响药敏试验结果的因素 116
七、敏感度的划分及临床意义 117
八、药敏试验的改进 117
一、纸片法 118
第三节 细菌对抗菌药物的联合药敏试验 118
二、棋盘法 120
三、联合药敏抗菌药物组合的选择 121
第四节 药敏试验结果的评价与剂量计算方法 122
一、药敏试验结果的评价 122
二、剂量计算方法 122
第五节 影印培养法测定最低杀菌浓度（MBC） 122
参考文献 123
第六章 病毒的分离培养及鉴定 124
第一节 病毒的分离 124
一、样品的采集与保存 124
二、样品的处理 125
三、样品的接种 125
一、器材准备 134
第二节 细胞培养技术 134
二、细胞培养用溶液的配制 136
三、常用细胞培养物的制备 141
四、细胞培养常见问题及解决方法 143
五、细胞的保存、复苏及运送 145
六、细胞培养中污染的消除 146
第三节 病毒的鉴定 147
一、核酸类型鉴定 148
二、脂溶剂敏感试验 150
三、病毒粒子大小测定 150
四、核衣壳的对称 152
五、病毒感染力的测定 153
六、其他方法 155
参考文献 156
一、试验病毒株的选择 158
二、灭活水平的确定 158
第七章 杀病毒试验 158
第一节 杀病毒试验的条件 158
三、对杀病毒试验的评估 159
第二节 杀病毒试验的方法 159
一、载体试验 159
二、悬浮试验 161
参考文献 163
第八章 血清学试验 164
第一节 凝集试验 164
一、试剂准备 164
二、几种常用的凝集试验 165
第二节 血凝和血凝抑制试验 168
一、原理 170
第三节 间接血凝试验 170
二、优点 171
三、缺点 171
四、醛化红细胞的制备 172
五、间接血凝试验程序 173
第四节 沉淀试验 176
一、琼脂凝胶沉淀试验（AGpT） 176
二、对流免疫电泳（CIEP） 178
三、火箭免疫电泳（RIE） 179
第五节 中和试验 180
一、常规中和试验 180
二、微量细胞培养中和试验 183
三、空斑减少试验 185
一、免疫酶技术的分类 186
第六节 免疫酶技术 186
二、免疫酶技术的原理 187
三、免疫酶技术的条件 187
四、标记物的制备 188
五、酶底物的配制 192
六、检测方法 193
七、常见免疫酶测定法 194
第七节 免疫荧光技术 200
一、IF技术的特点 201
二、IF技术的必备条件 201
三、荧光抗体的制备 202
四、荧光抗体染色法 204
参考文献 208
第一节 免疫球蛋白的分离技术 210
一、盐析法 210
第九章 免疫球蛋白分离及单克隆抗体技术 210
二、离子交换层析法 211
三、凝胶过滤法 213
第二节 免疫血清的制备、浓缩及保存 217
一、免疫血清的制备 217
二、免疫血清的浓缩 217
三、免疫血清的保存 218
第三节 鸡蛋黄IgY的制备与提纯 218
一、蛋黄的组成及形成 219
二、IgY的性质 219
三、IgY的免疫制备 220
四、IgY的提纯 220
第四节 单克隆抗体技术 222
一、McAb的制备 222
三、试剂配制 226
二、McAb的生产 226
参考文献 227
中篇 禽病的病理学诊断技术 231
第十章 尸体剖检技术 231
一、尸检的目的 231
二、尸检的时间、地点、用具及注意事项 231
三、尸检程序和方法 232
四、尸检记录 248
参考文献 250
第十一章 眼观病理标本的制作技术 251
一、标本的选择与清理 251
二、非原色标本制作 251
三、原色标本制作 253
参考文献 254
一、取材 255
第十二章 病理组织切片制作技术 255
二、固定和固定液 256
三、水洗 259
四、脱水 259
五、透明 260
六、浸蜡 260
七、包埋 261
八、切片 261
九、附贴 262
十、染色 263
参考文献 266
第十三章 常见禽病的尸体剖检诊断 267
一、细菌性传染病 267
二、病毒性传染病 270
三、其他微生物病 272
四、寄生虫病 273
五、营养代谢病 273
六、中毒性疾病 275
参考文献 275
下篇 常见禽传染病的实验室诊断 279
第十四章 细菌病的实验室诊断 279
第一节 沙门菌病（avian Salmonellosis） 279
一、样品采集、运送和保存 280
二、形态学镜检 280
三、分离培养 280
四、生化试验 282
五、血清学诊断 282
六、类症鉴别 288
二、形态学镜检 289
一、样品采集和保存 289
第二节 大肠杆菌病（colibacillosis） 289
三、分离培养 290
四、生化特性 290
五、血清学鉴定 290
六、类症鉴别 296
第三节 禽霍乱（fowl cholera） 296
一、样品采集和保存 296
二、形态学镜检 297
三、分离培养 297
四、生化特性 298
五、血清学诊断 298
六、类症鉴别 299
第四节 鸭疫里默菌感染（riemerella anatipestifer infection） 299
四、生化特性 300
五、血清学诊断 300
一、样品采集和保存 300
三、分离培养 300
二、形态学镜检 300
六、类症鉴别 302
第五节 传染性鼻炎（infectious coryza） 302
一、样品采集和保存 302
二、形态学镜检 303
三、分离培养 303
四、生化特性 304
五、血清学诊断 304
六、类症鉴别 306
第六节 葡萄球菌病（staphylococcosis） 306
三、分离培养 307
二、形态学镜检 307
一、样品采集和保存 307
四、生化特性 308
五、血浆凝固酶试验 309
六、血清学诊断 309
七、动物试验 309
八、类症鉴别 310
第七节 链球菌病（streptococcosis） 310
一、样品采集和保存 310
二、形态学镜检 311
三、分离培养 311
四、生化特性 312
五、血清学诊断 313
二、形态学镜检 314
三、分离培养 314
第八节 铜绿假单胞菌病（infection of pseudomonas aeruginosa） 314
一、样品采集 314
六、类症鉴别 314
四、生化特性 315
五、血清学诊断 316
六、动物试验 316
七、类症鉴别 317
第九节 弯曲杆菌病（campylobacteriosis） 317
一、样品采集和保存 317
二、形态学镜检 318
三、分离培养 318
四、生化特性 319
一、坏死性肠炎（necrotic enteritis） 320
第十节 梭状芽孢杆菌病（clostridiosis） 320
六、类症鉴别 320
五、血清学诊断 320
二、溃疡性肠炎（ulcerative enteritis） 323
三、坏疽性皮炎（gangrenous dermatitis） 324
四、肉毒中毒（botulism） 325
第十一节 李氏杆菌病（Listeriosis） 329
一、样品采集和处理 330
二、形态学镜检 330
三、分离培养 330
四、生化特性 331
五、血清学诊断 332
六、类症鉴别 332
第十二节 丹毒（erysipelas） 332
三、分离培养 333
二、形态学镜检 333
一、样品采集和保存 333
四、生化特性 334
五、血清学诊断 334
六、类症鉴别 335
第十三节 结核（tuberculosis） 335
一、样品采集和处理 335
二、形态学镜检 336
三、分离培养 337
四、生化特性 337
五、血清学诊断 338
六、结核菌素试验 339
七、类症鉴别 339
第十四节 波氏杆菌病（Bordetellosis） 339
二、形态学镜检 340
三、分离培养 340
一、样品采集和保存 340
四、生化特性 341
五、血清学诊断 341
六、类症鉴别 343
参考文献 343
第十五章 病毒病的实验室诊断 345
第一节 禽流感（avian influenza） 346
一、样品采集和保存 346
二、分离培养 347
三、形态结构 348
四、理化特性 349
五、血清学诊断 351
六、类症鉴别 358
一、样品采集和处理 359
第二节 新城疫（newcastle disease） 359
二、分离培养 360
三、形态结构 360
四、理化特性 361
五、病型和毒力测定 361
六、血清学诊断 365
七、类症鉴别 367
第三节 传染性法氏囊病（infectious bursal disease） 368
一、样品采集和保存 369
二、分离培养 369
三、形态结构 370
四、理化特性 371
五、血清学诊断 371
六、类症鉴别 376
第四节 传染性支气管炎（infectious bronchitis） 377
二、分离培养 378
一、样品采集和保存 378
三、形态结构 379
四、理化特性 379
五、血清学诊断 380
六、类症鉴别 382
第五节 传染性喉气管炎（infectious laryngotracheitis） 382
一、样品采集和保存 382
二、分离培养 383
三、形态结构 383
四、电镜观察和病理组织学检查 384
五、理化特性 384
六、血清学诊断 384
二、分离培养 387
一、病料采集和保存 387
第六节 病毒性关节炎（viral arthritis） 387
七、类症鉴别 387
三、形态结构 388
四、理化特性 388
五、血清学诊断 389
六、类症鉴别 392
第七节 鸡传染性贫血（chicken infectious anemia） 392
一、样品采集和保存 393
二、分离培养 393
三、形态结构 393
四、理化特性 394
五、组织病理学诊断 394
六、血清学诊断 394
七、类症鉴别 396
二、分离培养 397
第八节 禽痘（avian pox） 397
一、病料采集和保存 397
三、形态结构 398
四、理化特性 398
五、包涵体检查 399
六、血清学诊断 399
七、类症鉴别 400
第九节 腺病毒感染（avian adenovirus infection） 400
一、蛋减综合征-1976（egg drop syndrome-1976） 401
二、包涵体肝炎（inclusion body hepat-itis） 405
三、鹌鹑支气管炎（quail bronchitis） 407
四、火鸡出血性肠炎（hemorrhagic enteritis of turkeys） 408
第十节 禽脑脊髓炎（avian encephalom-yelitis） 409
三、形态结构 410
四、理化特性 410
一、样品采集和保存 410
二、分离培养 410
五、血清学诊断 411
六、病理组织学诊断 412
七、类症鉴别 412
第十一节 禽白血病（avian leukosis） 413
一、样品采集和保存 414
二、分离培养 414
三、形态结构 415
四、理化特性 416
五、血清学诊断 416
六、类症鉴别 420
一、样品采集和保存 421
第十二节 马立克病（Marek's disease） 421
二、分离培养 422
三、形态结构 423
四、理化特性 423
五、毒株分类 424
六、血清学诊断 424
七、类症鉴别 427
第十三节 网状内皮组织增生病（reticulo-endotheliosis） 428
一、样品采集和保存 428
二、分离培养 428
三、形态结构 429
四、理化特性 429
五、血清学诊断 429
一、样品采集和保存 431
第十四节 鸭瘟（duck plague） 431
六、类症鉴别 431
二、分离培养 432
三、形态结构 432
四、理化特性 433
五、血清学诊断 433
六、类症鉴别 435
第十五节 鸭肝炎（duck hepatitis） 435
一、样品采集和保存 436
二、分离培养 436
三、形态结构 437
四、理化特性 437
五、血清学诊断 437
六、类症鉴别 439
一、样品采集和保存 440
二、分离培养 440
第十六节 小鹅瘟（gosling plague） 440
三、形态结构 441
四、理化特性 441
五、血清学诊断 441
六、类症鉴别 444
第十七节 雏番鸭细小病毒病（muscovy duck-ling parvovirusis） 444
一、样品采集和保存 445
二、分离培养 445
三、形态结构 446
四、理化特性 446
五、血清学诊断 446
六、类症鉴别 449
一、样品的采集和保存 450
二、分离培养 450
第十八节 禽轮状病毒感染（avian rotavirus infection） 450
三、形态结构 451
四、理化特性 452
五、血清学诊断 453
六、电镜技术 453
七、聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） 453
八、类症鉴别 454
第十九节 禽肾炎（avian nephritis） 454
一、样品采集与保存 455
二、分离培养 455
三、形态结构与理化特性 455
四、血清学诊断 456
五、类症鉴别 456
参考文献 456
第一节 禽支原体病（avian mycoplasmosis） 461
第十六章 其他微生物病的实验室诊断 461
一、样品采集和保存 462
二、形态学镜检 463
三、分离培养 463
四、生化特性 465
五、血清学诊断 465
六、类症鉴别 471
第二节 禽衣原体病（avian chlanydiosis） 473
一、样品采集和保存 473
二、形态学镜检 474
三、分离培养 476
四、种株鉴别 477
五、血清学诊断 478
六、类症鉴别 482
二、形态染色 483
第三节 螺旋体病（spirochetosis） 483
一、样品采集和保存 483
三、分离培养 484
四、血清学诊断 484
五、类症鉴别 485
第四节 真菌病（mycoses） 485
一、禽曲霉菌病（avian aspergillosis）概述 485
二、样品采集 485
三、显微镜检查 486
四、分离培养 486
五、动物试验 488
六、血清学诊断 488
七、类症鉴别 488
参考文献 489