第一部分 生物化学实验的基本知识 1
第一章 生物化学实验基本操作与要求 1
第一节 实验室规则与安全 1
目录 1
第二节 实验室一般事故的处理方法 3
第三节 玻璃仪器的清洗和干燥 4
第四节 洗涤液的种类 6
第五节 常用容量仪器的使用 8
第六节 试剂的分级、配制及保存 16
第七节 实验误差与提高实验准确性的方法 27
第八节 实验记录与实验报告 31
第二章 实验样品的制备 34
第一节 实验样品的采集 34
第二部分 生物化学实验的基本技术 34
第二节 生物物质的提取 37
第三章 沉淀技术 40
第一节 盐析法 41
第二节 有机溶剂沉淀法 43
第三节 等电点沉淀 45
第四节 选择性变性沉淀 46
第四章 色谱技术 47
第一节 吸附色谱 49
第二节 凝胶色谱 56
第三节 离子交换色谱 67
第四节 亲和色谱 73
第五章 电泳技术 77
第一节 电泳基本原理 77
第二节 醋酸纤维素薄膜电泳 81
第三节 琼脂糖凝胶电泳 82
第四节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 84
第五节 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 89
第六节 等电聚焦电泳 91
第六章 离心技术 94
第一节 基本原理 94
第二节 离心分离方法 99
第三节 离心机和转子的种类 101
第七章 固定化技术 103
第一节 固定化酶 103
第二节 固定化细胞 106
第八章 免疫化学技术 108
第一节 免疫学基本概念 108
第二节 抗血清的制备 109
第三节 抗体的检测 111
第九章 分光光度法 116
第一节 基本原理 116
第二节 光吸收的测定方法 120
第三节 物质的定性定量测定 123
第四节 提高测量灵敏度和准确度的方法 125
第三部分 生物化学实验 128
第十章 糖类 128
实验一 斐林试剂置换法测定还原糖含量 128
实验二 斐林试剂热滴定法 131
实验三 斐林试剂比色法 135
实验四 蒽酮比色法 137
实验五 3,5-二硝基水杨酸比色法 138
实验六 血糖的测定——Folin-Wu法 140
实验七 血糖的测定——邻-甲苯胺法 142
实验八 猪脑脂质的提取及其分离鉴定 146
第十一章 脂类 146
实验九 血清总胆固醇的定量测定——磷硫铁试剂法 149
实验十 血清甘油三酯的测定——抽提法 151
实验十一 脂肪酸的β-氧化 154
实验十二 辅酶Q10的制备及检测 156
实验十三 血清胆固醇的定量测定——醋酸酐法 159
第十二章 蛋白质、氨基酸 162
实验十四 牛奶中提取酪蛋白 162
实验十五 总氮量的测定——凯氏定氮法 163
实验十六 蛋白质浓度测定——紫外吸收法 170
实验十七 蛋白质浓度测定——双缩脲法 172
实验十八 蛋白质浓度测定——Folin-酚试剂法 175
实验十九 蛋白质浓度测定——考马斯亮蓝染色法 177
实验二十 蛋白质浓度测定——BCA法 179
实验二十一 甲醛滴定法测定氨基氮 180
实验二十二 凝胶色谱特性测试 183
实验二十三 凝胶色谱法测定蛋白质相对分子质量 186
实验二十四 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳 189
实验二十五 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子质量 191
实验二十六 离子交换法制备γ-氨基丁酸 197
实验二十七 血清γ-球蛋白的分离纯化 199
第十三章 酶类 204
实验二十八 酶促反应与时间的关系——初速率时间范围测定 204
实验二十九 pH值对酶活力的影响——最适pH值的测定 207
实验三十 温度对酶活力的影响——最适温度的测定 209
实验三十一 米氏常数（Km）和最大反应速率（Vm）的测定 211
实验三十二 抑制剂对酶活力的影响——抑制类型的判断和抑制剂常数（Ki）的测定 214
实验三十三 氨基酰化酶的测定 218
实验三十四 凝血酶的提取 222
实验三十五 酶联免疫吸附测定 225
第十四章 核酸 228
实验三十六 酵母核糖核酸的提取及测定 228
实验三十七 由动物组织中制备DNA 230
实验三十八 质粒的提取与鉴定 233
实验三十九 核酸的定量测定——定磷法 238
实验四十 核酸含量的测定——紫外吸收法 241
实验四十一 DNA含量测定——二苯胺法 243
实验四十二 RNA含量测定——地衣酚法 244
实验四十三 核酸水解及其产物的分离鉴定 246
实验四十四 离子交换色谱分离核苷酸 250
第十五章 综合实验 255
实验四十五 碱性磷酸单酯酶的分离、纯化与鉴定 255
实验（一）碱性磷酸单酯酶的提取和活性的测定 255
实验（二）离子交换色谱纯化碱性磷酸单酯酶 258
实验（三）亲和色谱纯化碱性磷酸单酯酶 262
实验（四）免疫双向扩散及免疫电泳法检测 264
实验四十六 超氧化物歧化酶的分离、纯化 266
实验（一）超氧化物歧化酶的活性测定 266
实验（二）动物血中超氧化物歧化酶的提取 269
实验（三）离子交换法分离纯化超氧化物歧化酶 270
实验（四）金属螯合色谱分离纯化超氧化物歧化酶 271
实验四十七 胰蛋白酶和抑制剂分离、纯化 273
实验（一）胰蛋白酶的活性测定 273
实验（二）胰蛋白酶的提取 276
实验（三）胰蛋白酶的纯化 279
实验（四）胰蛋白酶抑制剂的制备——亲和色谱纯化卵黏蛋白 285
实验（五）胰蛋白酶抑制剂的制备——亲和色谱纯化抑肽酶 287
附录 291
参考文献 320