第1章 聚丙烯酰胺凝胶电泳导论 1
引言 1
聚丙烯酰胺凝胶的性质 2
化学结构 2
聚合催化剂 3
有效孔径 3
实验方法 3
柱胶和板胶 4
解离或非解离缓冲系统 5
连续或不连续（多相）缓冲系统 5
pH选择 8
聚合催化剂的选择 9
凝胶浓度的选择 9
分子量测定 11
仪器 14
成胶装置和贮液槽 14
电泳所需要的其它装置 16
聚丙烯酰胺凝胶的制备和电泳 18
试剂 18
贮备液 19
凝胶混合液的制备 20
柱胶的制备 21
板胶的制备 24
样品制备 26
加样和电泳 29
电泳后的凝胶分析 30
凝胶的取出 31
蛋白质的染色及定量 32
放射性蛋白质的检定 36
糖蛋白及磷蛋白的测定 43
应用免疫学方法检测蛋白质 44
酶的检测 44
分离蛋白质的回收 45
蛋白质区带的定位 45
蛋白质的洗脱 46
基本技术的改进 47
寡肽的分子量分析 47
特殊蛋白质的分离 47
组蛋白 48
浓度梯度凝胶 52
大批量凝胶 57
微型柱胶和微型板胶 57
琼脂糖-丙烯酰胺混合凝胶 59
均一性和同一性 59
矫作物及故障 62
综合性参考文献 63
第2章 “定量”和制备性的聚丙烯酰胺凝胶电泳 64
引言 64
定量PAGE电泳仪概述 64
凝胶的选择 66
缓冲系统的选择 67
不连续的和连续的区带电泳 67
可供选择的不连续缓冲系统：Jovin输出 68
定量PAGE方法 70
策略 70
最适pH 71
堆积界限的选择 77
对蛋白质稳定和分离最佳条件的选择 77
最适孔径：Ferguson曲线图 79
同一性试验 85
分子大小和电荷异构 87
物理特性 88
最适分离孔径 92
制备性PAGE 93
凝胶切片的提取 94
连续区带洗脱 96
第3章 等速凝胶电泳 100
引言 100
操作程序 100
稳态堆积条件的最佳化 100
堆积区内的分离试验 101
凝胶切片提取法进行制备性等速电泳 102
用连续区带洗脱法进行制备性等速电泳 105
连续区带洗脱法进行制备性稳态堆积 106
第4章 分析和制备性凝胶聚焦电泳 107
应用凝胶聚焦电泳的时机 107
仪器 108
柱胶与水平板胶装置 108
电压控制装置 109
梯度监测装置 110
凝胶 111
聚丙烯酰胺凝胶 111
Sephadcx凝胶 112
琼脂糖凝胶 112
pH梯度的形成 112
“Ampholine”与缓冲液 112
两性或非两性载体组分 113
平坦的和陡峭的pH梯度 114
pH梯度的直线性 114
高离子强度下电聚焦 114
去污剂存在下的聚焦电泳 116
阳极和阴极电解液的选择 116
聚焦电泳的动力学 117
pH梯度 117
蛋白质 119
导电性 119
分析性凝胶聚焦电泳程序 120
制备性凝胶聚焦电泳 126
仪器 126
程序 127
第5章 双向凝胶电泳 129
导言 129
仪器 129
第一向凝胶 130
第二向凝胶 130
双向凝胶电泳的一般技术 131
溶液和仪器 131
样品的制备 132
第一向凝胶的制备 133
平衡第一向凝胶以便进行第二向分离 133
第二向凝胶的制备 134
多肽分布的分析 134
双向凝胶电泳的比较分析 136
根据等电点及分子量进行蛋白质双向分离 136
第一向分离 137
第二向分离 138
基本技术的改进 140
影响分离的因素 142
膜蛋白分离的改进 143
特殊类型蛋白质的分离 144
核糖体蛋白 144
组蛋白 146
核蛋白 148
第6章 蛋白质部分水解后的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳肽图 151
导言 151
仪器 152
方法学 152
实验步骤 152
基本技术的改进 155
资料的解释 157
第7章 免疫电泳 158
引言 158
抗原和抗体的制备 159
抗原 159
抗体的产生 159
抗血清商品 161
抗体活性分析 161
IgG抗体的纯化 161
简易免疫电泳 162
仪器 162
试剂 163
方法 164
放射免疫电泳 165
酶检测法 166
免疫电泳法的其它改进 167
对流电泳 167
“火箭”免疫电泳 167
双向免疫电泳（交叉免疫电泳） 167
故障 170
综合性参考文献 170
附录Ⅰ 多肽检测方法文献目录 171
多肽检测的一般方法 171
染色法 171
荧光染色法 172
直接检测法 172
以放射性同位素为基础的检测方法 173
特殊多肽的检测方法 174
糖蛋白 174
磷蛋白 174
核蛋白 175
具有可以进行反应的巯基蛋白质 175
含镉蛋白 175
胶原（蛋白）及原胶原蛋白 175
免疫方法 175
酶检测法 176
附录Ⅱ 同位素标记蛋白质用试剂 180
一览表 180
试剂 181
乙酸酐(3H或14C) 181
Bolton和Hunter试剂(125I) 181
溴乙酸(14C) 182
氯乙酸(14C) 182
对-氯汞苯磺酸(203Hg) 182
对-氯汞苯甲酸(20？Hg) 183
丹磺酰氯(5-二甲胺-1-萘磺酰氯) (3H或14C) 183
DHP(二异丙基氟磷酸)（3H） 184
乙基亚胺乙酯(14C) 184
N-乙基马来酰亚胺(？4C) 185
1-氟-2,4-二硝基苯(3H或14C) 185
甲醛(14C) 186
碘(12？I) 186
碘乙酰胺(14C) 187
碘乙酸(3H或14C) 187
乙磺酰乙酰亚胺(14C) 188
马来酸酐(14C) 188
甲基3,5-二碘羟基苯亚胺(12？I) 188
异硫氰酸苯酯(24C或？?S) 189
氢硼化钾（3H） 190
氢硼化钠（3H） 190
琥珀酸酐(14C) 191
N-琥珀酰亚胺丙酸（3H） 191
附录Ⅲ 选择蛋白质标志物的分子量及等电点 193
附录Ⅳ 供应电泳专用附件的厂商 195
参考文献 196