第一篇 生物化学实验基本要求及常用仪器的使用第一章 生物化学实验基本要求 1
一、实验室规则 1
二、实验记录及实验报告 2
三、生物化学实验课程评分与标准 3
四、实验的准确度 3
第二章 生物化学实验基本操作 4
一、配制试剂 4
二、仪器的清洗与干燥 5
三、玻璃量器的使用 6
四、混匀 9
五、离心和过滤 9
六、溶液pH值的测定 9
第三章 常用仪器及使用方法 10
一、电子天平 10
二、离心机 10
三、分光光度计 11
四、pHS-3C型酸度计 16
第二篇 基础性实验 17
第一章 糖类 17
实验一 糖的颜色反应 17
实验二 糖的还原作用 19
实验三 3,5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖和总糖含量 21
实验四 斐林试剂法测定还原糖含量 23
实验五 蒽酮比色法测定可溶性糖含量 26
实验六 苯酚-硫酸法测定可溶性糖含量 28
实验七 乙酸-氯化钙旋光法测定粗淀粉含量 29
实验八 酸性洗涤剂法测定粗纤维含量 31
实验九 重量法测定果胶含量 32
实验十 比色法测定果胶含量 34
实验十一 磷钼酸显色法（Folin-Wu法）测定血糖含量 35
实验十二 葡萄糖氧化酶法（GOD）测定血糖含量 38
实验十三 邻甲苯胺法测定血糖含量 39
第二章 脂类 41
实验十四 Soxhlet提取法测定粗脂肪含量 41
实验十五 邻苯二甲醛法测定血清总胆固醇含量 43
实验十六 碘价的测定 45
实验十七 油脂酸价的测定 47
实验十八 油脂皂化值的测定 48
实验十九 卵磷脂的提取和鉴定 49
第三章 蛋白质 50
实验二十 蛋白质及氨基酸的呈色反应 50
实验二十一 蛋白质的沉淀反应 54
实验二十二 蛋白质的两性性质及等电点的测定 56
实验二十三 凯氏定氮法测定总氮含量 57
实验二十四 甲醛滴定法测定氨基氮 61
实验二十五 茚三酮显色法测定氨基酸含量 63
实验二十六 双缩脲法测定蛋白质含量 64
实验二十七 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量 66
实验二十八 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量 67
实验二十九 BCA法测定蛋白质含量 69
实验三十 紫外分光光度法测定蛋白质含量 71
实验三十一 纸层析法分离氨基酸 73
实验三十二 离子交换柱层析法分离氨基酸 75
实验三十三 从牛奶中分离制备酪蛋白 77
实验三十四 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白 78
实验三十五 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白 82
实验三十六 凝胶过滤法分离纯化蛋白质 85
第四章 酶和维生素 86
实验三十七 酶的基本性质测定 86
实验三十八 过氧化氢酶米氏常数Km值的测定 91
实验三十九 脲酶Km值的简易测定 92
实验四十 谷丙转氨酶活力的测定 95
实验四十一 淀粉酶活力的测定 97
实验四十二 2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C含量 99
实验四十三 磷钼酸法测定维生素C含量 102
实验四十四 荧光法测定维生素B2含量 103
第五章 核酸 105
实验四十五 二苯胺法测定DNA含量 105
实验四十六 苔黑酚显色法测定RNA含量 106
实验四十七 定磷法测定核酸含量 107
实验四十八 紫外分光光度法测定核酸含量 110
第六章 新陈代谢 111
实验四十九 肌糖原的酵解 111
实验五十 糖酵解中间产物的鉴定 113
实验五十一 脂肪酸的β-氧化 115
实验五十二 丙酮酸含量的测定 117
实验五十三 胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 118
实验五十四 饥饿和饱食对肝糖原含量的影响 120
第三篇 综合性实验 122
实验五十五 SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量 122
实验五十六 酵母蔗糖酶的提取纯化及其性质研究 125
实验五十七 酵母细胞中核糖核酸（RNA）的提取及鉴定 132
实验五十八 菜花（花椰菜）中核酸的分离和鉴定 134
实验五十九 大肠杆菌质粒DNA的制备及电泳鉴定 136
实验六十 发酵过程中无机磷的利用和ATP生成的测定 140
第四篇 设计性实验 144
实验六十一 动物血超氧化物歧化酶（SOD）的分离纯化及鉴定 144
实验六十二 溶菌酶的制备及活性测定 144
附录 146
附录一 化学试剂与保存 146
一、一般化学试剂纯度分级 146
二、需要特殊方法保存的试剂 146
三、化学药品、试剂毒性分类参考类目 146
四、干燥剂 147
五、指示剂 148
附录二 常用清洗液的配制 148
附录三 溶液的配制 149
一、常用溶液浓度的表示及配制 149
二、溶液浓度的调整 150
三、标准溶液的配制和标定 151
附录四 缓冲溶液的配制方法 152
一、选用缓冲溶液的注意事项 153
二、常用缓冲溶液 153
三、标准缓冲溶液的配制 157
附录五 常用数据表 158
一、化学元素的相对原子质量表 158
二、硫酸铵饱和度常用表 159
三、实验室常用酸碱的密度及其浓度 160
四、体积分数酸、碱溶液的配制 160
五、常用固态化合物的浓度配制 161
六、离心机转数与相对离心力的换算 161
七、常用蛋白质相对分子质量标准参照物 161
八、常见蛋白质相对分子质量参考值 162