《氧化应激状态下维持黑素小体蛋白低免疫原性的分子机制研究》PDF下载

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  • 作  者:刘小明著
  • 出 版 社:武汉:武汉大学出版社
  • 出版年份:2014
  • ISBN:9787307123304
  • 页数:80 页
图书介绍:本书作为武汉大学优秀博士学位论文文库之著作,主要从Dct突变对黑素小体蛋白表达及其相关生物学功能的影响,Dct调控的氧化应激改变对黑素小体蛋白的免疫原性的影响,以及合成的DHI/DHICA(1:1)—优黑素在维持黑素小体蛋白低免疫原性中的作用三个方面研究黑素小体蛋白与黑素聚合物之间的相互作用以及在氧化应激状态下避免应激损伤以维持其低免疫原性的机制。

引言 1

第一章 Dct突变对黑素小体蛋白表达及其相关生物学功能的影响 3

1.1实验材料 3

1.1.1细胞来源 3

1.1.2主要仪器设备 4

1.1.3主要试剂及其配制 5

1.2实验方法 17

1.2.1细胞培养 17

1.2.2胞内ROS水平测定 17

1.2.3过氧化氢酶酶活力测定 18

1.2.4不连续蔗糖梯度离心[23] 19

1.2.5蔗糖梯度离心片段酪氨酸酶活性测定 20

1.2.6蔗糖梯度离心片段Det活性测定[25-26] 21

1.2.7蔗糖梯度离心片段电镜检查[18] 22

1.2.8 Western蛋白印迹检测蔗糖梯度离心片段Tyr、Tyrp1、Dct蛋白表达[27] 22

1.3统计学处理与结果 24

1.3.1 slaty与melan-a黑素细胞Tyr、Dct和过氧化氢酶活力比较 24

1.3.2 slaty MC与melan-a MC过氧化氢处理前后胞内ROS水平比较 26

1.3.3 slaty MC与melan-a MC蔗糖梯度离心片段超微结构观察 26

1.3.4 slaty MC与melan-a MC早期和晚期黑素生成蛋白表达水平及酶活性比较 28

1.4讨论 30

第二章 Dct调控的氧化应激改变对黑素小体蛋白免疫原性的影响 33

2.1实验材料 33

2.1.1 CB6F1小鼠来源 33

2.1.2主要仪器设备 33

2.1.3主要试剂及其配制 34

2.2实验方法 38

2.2.1 CB6F1(H2d×2b)小鼠免疫 38

2.2.2 CB6F1(H2d×2b)小鼠T淋巴细胞分离及培养 39

2.2.3 CB6F1(H2d×2b)小鼠眼眶静脉丛血样采集 40

2.2.4黑素小体蛋白诱导的体液免疫反应测定 40

2.2.5黑素小体蛋白诱导的细胞免疫反应测定 41

2.3统计学处理与结果 42

2.3.1黑素小体蛋白免疫CB6F1小鼠后解剖学观察 42

2.3.2黑素小体蛋白免疫CB6F1小鼠后T淋巴细胞形态学观察 43

2.3.3 slaty MC和melan-a MC早期与晚期黑素小体蛋白免疫原性的比较 45

2.3.4氧化应激对黑素小体蛋白免疫原性的影响 47

2.4讨论 50

第三章 合成的DHI/DHICA(1:1)-优黑素在维持黑素小体蛋白低免疫原性中的作用 53

3.1实验材料 53

3.1.1 CB6F1小鼠来源 53

3.1.2主要仪器设备 53

3.1.3主要试剂及其配制 54

3.2实验方法 58

3.2.1 CB6F1(H2d×2b)小鼠免疫 58

3.2.2 CB6F1(H2d×2b)小鼠T淋巴细胞分离及培养 59

3.2.3 CB6F1(H2d×2b)小鼠眼眶静脉丛血样采集 60

3.2.4黑素小体蛋白诱导的体液免疫反应测定 60

3.2.5黑素小体蛋白诱导的细胞免疫反应测定 61

3.3统计学处理与结果 61

3.3.1合成的DHI与DHI/DHICA(1:1)-优黑素对小鼠免疫反应的初步观察 62

3.3.2合成的DHI/DHICA(1:1)-优黑素对维持黑素小体蛋白低免疫原性影响 63

3.4讨论 67

第四章 结论 70

参考文献 71

致谢 79