第一章 生物大分子的分离纯化 1
第一节 概述 1
上篇 生物化学实验原理 1
第二节 生物原料的选择和预处理 3
第三节 生物组织与细胞的破碎 5
第四节 生物大分子的提取 5
第五节 生物大分子的分离纯化 8
第六节 生物大分子活性物质的浓缩 10
第七节 生物大分子的结晶 12
第八节 生物大分子活性物质的干燥 13
第一节 蛋白质含量的测定 16
第二章 生物大分子活性物质含量和纯度的分析方法 16
第二节 粘多糖的定量及生物活性测定 17
第三节 核酸含量的测定 19
第四节 生物大分子纯度的鉴定 20
第三章 层析技术 23
第一节 层析技术分类 23
第二节 液相层析法的基本原理 25
第三节 柱层析系统基本操作方法 33
第四章 吸附层析法 39
第一节 基本原理 39
第二节 影响吸附的因素 40
第三节 吸附柱层析法 41
第五章 纸层析法 45
第一节 纸层析基本原理 45
第二节 影响Rf的主要因素 45
第三节 纸层析实验技术 47
第六章 薄层层析法 53
第一节 薄层层析原理 53
第二节 薄层层析的特点 55
第三节 吸附剂的性质与选择 56
第四节 薄层层析实验技术 56
第五节 薄层层析的定性分析 62
第六节 薄层层析的定量分析 63
第七节 薄层层析法的近代发展 64
第七章 离子交换层析法 66
第一节 基本原理 66
第二节 离子交换层析介质 67
第三节 离子交换树脂 68
第四节 离子交换纤维素 74
第五节 葡聚糖凝胶离子交换剂及琼脂糖凝胶离子交换剂 77
第六节 离子交换层析实验技术 80
第七节 离子交换层析法的应用 84
第八章 凝胶层析法 85
第一节 引言 85
第二节 基本原理 85
第三节 凝胶的条件和类型 88
第四节 凝胶层析实验技术 92
第五节 影响凝胶层析的主要因素 94
第九章 亲和层析法 96
第一节 基本原理 96
第二节 配基和载体的选择 96
第三节 亲和吸附剂的制备方法 98
第四节 亲和层析实验技术 102
第五节 亲和层析应用举例 104
第六节 金属螯合亲和层析 106
第十章 疏水层析法 111
第一节 疏水层析原理 111
第二节 疏水层析的分离机理 112
第三节 影响疏水层析分离的因素 113
第十一章 电泳技术 115
第一节 电泳基本原理 115
第二节 电泳的分类 119
第三节 醋酸纤维素薄膜电泳 120
第四节 琼脂糖凝胶电泳 121
第五节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 127
第六节 染色方法 148
第七节 聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中异常现象产生的原因及解决办法 155
第八节 毛细管电泳 157
第一节 离心的基本理论 165
第十二章 离心技术 165
第二节 离心的基本方法 167
第三节 离心机的安全操作与保养 170
第十三章 膜分离技术 172
第一节 过滤技术 172
第二节 半透膜分离技术 173
第三节 超滤技术 175
第十四章 紫外－可见吸收光谱分析 178
第一节 光谱分析的基本概念 178
第二节 化合物中的发色基团及助色基团 181
第三节 紫外－可见分光光度计 183
第四节 紫外－可见吸收光谱分析方法 188
第五节 紫外－可见吸收光谱分析的影响因素 192
下篇 生物化学实验 194
实验1 香菇多糖的制备 194
实验2 魔芋多糖的提取、魔芋葡甘聚糖含量的测定及还原糖成分分析 197
实验3 甲壳素和壳聚糖的制备及壳聚糖乙酰度的测定 202
实验4 脂肪碘值的测定 206
实验5 血清总胆固醇含量的测定（磷硫铁法） 209
实验6 卵磷脂的制备 212
实验7 维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法） 215
实验8 氨基酸定量测定——茚三酮显色法 219
实验9 氨基酸的分离与鉴定——滤纸层析法 222
实验10 蛋白质定量测定（1）——微量凯氏定氮法 227
实验11 蛋白质定量测定（2）——双缩脲法 232
实验12 蛋白质定量测定（3）——Folin-酚法（Lowry法） 236
实验13 蛋白质定量测定（4）——考马斯亮蓝染色法 240
实验14 蛋白质定量测定（5）——BCA法 243
实验15 蛋白质定量测定（6）——紫外（UV）吸收法 246
实验16 蛋白质相对分子质量测定（1）——凝胶过滤层析法 250
实验17 蛋白质相对分子质量测定（2）——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 262
实验18 聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测定蛋白质等电点 271
实验19 蛋白质及多肽N-末端氨基酸残基测定——DNS-Cl法 278
实验20 蛋白质印迹法 286
实验21 血红蛋白脱辅基和重组 293
实验22 细胞色素c的制备和测定 297
实验23 凝胶层析法分离纯化含锌金属硫蛋白 310
实验24 固定化金属离子亲和层析 313
实验25 疏水层析分离金属结合蛋白 316
实验26 脂蛋白的分离——琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶电泳法 319
实验27 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶（活性染色鉴定法） 323
实验28 谷胱甘肽转硫酶的制备及动力学研究 332
实验29 溶菌酶的制备及活性测定 340
实验30 超氧化物歧化酶的分离纯化 345
实验31 超氧化物歧化酶活性染色鉴定法 351
实验32 酯酶的分离、纯化与活性测定 354
实验33 亲和层析及离子交换层析法分离纯化乳酸脱氢酶及其同工酶 359
实验34 核酸定量测定（1）——定磷法 368
实验35 核酸定量测定（2）——紫外（UV）吸收法 373
实验36 猪脾脏DNA制备与二苯胺测定法 376
实验37 酵母RNA提取与地衣酚测定法 380
实验38 质粒DNA的微量制备（碱裂解法、煮沸裂解法） 384
实验39 质粒DNA限制性内切酶酶切及琼脂糖凝胶电泳 390
实验40 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 397
实验41 聚合酶链式反应（PCR） 402
实验42 核酸原位杂交 407
实验43 免疫球蛋白的分离纯化 413
实验44 免疫学检测法 420
实验45 酶联免疫吸附测定法 434
附录 444
附录Ⅰ 实验室安全及防护知识 444
一、实验室安全知识 444
二、实验室灭火法 445
三、实验室急救 446
附录Ⅱ 试剂及试剂配制与保存 447
一、一般化学试剂的分级 447
二、试剂配制的一般注意事项 447
三、易变质及需要特殊方法保存的试剂 448
四、标准溶液的配制和标定 448
五、缓冲溶液 449
六、指示剂 457
七、干燥剂 458
附录Ⅲ 一些常用单位 459
一、长度单位 459
二、体积单位 459
三、质量单位 459
四、物质的量与物质的量浓度单位 460
附录Ⅳ 单位与浓度的表示及溶液浓度的调整 460
一、单位表示 460
二、溶液浓度的表示及其配制 461
三、溶液浓度的调整 462
一、实验误差 463
附录Ⅴ 实验误差与提高实验准确度的方法 463
二、误差来源 465
三、提高实验准确度的方法 466
四、准确度、精确度和误差的关系 467
附录Ⅵ 实验记录与实验报告 467
一、实验记录 467
二、实验报告 468
三、表格和图解 469
附录Ⅶ 常用数据表 470
一、元素的相对原子质量表 470
二、常用市售酸碱的浓度 472
三、一些常用化合物的溶解度（20℃） 472
四、一些常用做缓冲剂的化合物的酸解离常数 473
六、氨基酸的一些物理常数 474
五、某些有机溶剂的主要物理常数 474
七、常见氨基酸在不同溶剂系统中的Rf 476
八、嘌呤、嘧啶碱基、核苷和核苷酸的相对分子质量 477
九、某些蛋白质的物理性质 477
十、一些常见蛋白质相对分子质量参考值 478
十一、常用蛋白质相对分子质量标准参照物 479
十二、常见蛋白质等电点参考值 479
十三、硫酸铵饱和度的常用表 481
十四、离心机转数（r/min）与相对离心力（RCF）的换算 482
十五、常用化学物质相对分子质量表 483
一、常用离子交换纤维素 485
附录Ⅷ 层析法常用数据表及层析介质性质 485
二、常用国产离子交换树脂的某些物理化学性质表 486
三、各类常用离子交换树脂型号对照表 488
四、离子交换层析介质的技术数据 489
五、凝胶过滤层析介质的技术数据 490
六、聚丙烯酰胺凝胶的技术数据 492
七、琼脂糖凝胶的技术数据 492
八、疏水层析介质的技术数据 493
九、部分亲和层析介质的技术数据 494
十、各种凝胶所允许的最大操作压 495
附录Ⅸ 常用限制性内切酶酶切位点 496