生物化学实验原理和方法 第2版PDF电子书下载

第一章 生物大分子的分离纯化 1

第一节　概述 1

上篇 生物化学实验原理 1

第二节　生物原料的选择和预处理 3

第三节　生物组织与细胞的破碎 5

第四节　生物大分子的提取 5

第五节　生物大分子的分离纯化 8

第六节　生物大分子活性物质的浓缩 10

第七节　生物大分子的结晶 12

第八节　生物大分子活性物质的干燥 13

第一节　蛋白质含量的测定 16

第二章 生物大分子活性物质含量和纯度的分析方法 16

第二节　粘多糖的定量及生物活性测定 17

第三节　核酸含量的测定 19

第四节　生物大分子纯度的鉴定 20

第三章　层析技术 23

第一节　层析技术分类 23

第二节　液相层析法的基本原理 25

第三节　柱层析系统基本操作方法 33

第四章　吸附层析法 39

第一节　基本原理 39

第二节　影响吸附的因素 40

第三节　吸附柱层析法 41

第五章　纸层析法 45

第一节　纸层析基本原理 45

第二节 影响Rf的主要因素 45

第三节　纸层析实验技术 47

第六章　薄层层析法 53

第一节　薄层层析原理 53

第二节　薄层层析的特点 55

第三节　吸附剂的性质与选择 56

第四节　薄层层析实验技术 56

第五节　薄层层析的定性分析 62

第六节　薄层层析的定量分析 63

第七节　薄层层析法的近代发展 64

第七章　离子交换层析法 66

第一节　基本原理 66

第二节　离子交换层析介质 67

第三节　离子交换树脂 68

第四节　离子交换纤维素 74

第五节　葡聚糖凝胶离子交换剂及琼脂糖凝胶离子交换剂 77

第六节　离子交换层析实验技术 80

第七节　离子交换层析法的应用 84

第八章　凝胶层析法 85

第一节　引言 85

第二节　基本原理 85

第三节　凝胶的条件和类型 88

第四节　凝胶层析实验技术 92

第五节　影响凝胶层析的主要因素 94

第九章　亲和层析法 96

第一节　基本原理 96

第二节　配基和载体的选择 96

第三节　亲和吸附剂的制备方法 98

第四节　亲和层析实验技术 102

第五节　亲和层析应用举例 104

第六节　金属螯合亲和层析 106

第十章　疏水层析法 111

第一节　疏水层析原理 111

第二节　疏水层析的分离机理 112

第三节　影响疏水层析分离的因素 113

第十一章　电泳技术 115

第一节　电泳基本原理 115

第二节　电泳的分类 119

第三节　醋酸纤维素薄膜电泳 120

第四节　琼脂糖凝胶电泳 121

第五节　聚丙烯酰胺凝胶电泳 127

第六节　染色方法 148

第七节 聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中异常现象产生的原因及解决办法 155

第八节　毛细管电泳 157

第一节　离心的基本理论 165

第十二章　离心技术 165

第二节　离心的基本方法 167

第三节　离心机的安全操作与保养 170

第十三章　膜分离技术 172

第一节　过滤技术 172

第二节　半透膜分离技术 173

第三节　超滤技术 175

第十四章 紫外－可见吸收光谱分析 178

第一节　光谱分析的基本概念 178

第二节　化合物中的发色基团及助色基团 181

第三节　紫外－可见分光光度计 183

第四节　紫外－可见吸收光谱分析方法 188

第五节 紫外－可见吸收光谱分析的影响因素 192

下篇　生物化学实验 194

实验1　香菇多糖的制备 194

实验2　魔芋多糖的提取、魔芋葡甘聚糖含量的测定及还原糖成分分析 197

实验3 甲壳素和壳聚糖的制备及壳聚糖乙酰度的测定 202

实验4　脂肪碘值的测定 206

实验5　血清总胆固醇含量的测定（磷硫铁法） 209

实验6　卵磷脂的制备 212

实验7　维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法） 215

实验8　氨基酸定量测定——茚三酮显色法 219

实验9　氨基酸的分离与鉴定——滤纸层析法 222

实验10　蛋白质定量测定（1）——微量凯氏定氮法 227

实验11　蛋白质定量测定（2）——双缩脲法 232

实验12　蛋白质定量测定（3）——Folin-酚法（Lowry法） 236

实验13　蛋白质定量测定（4）——考马斯亮蓝染色法 240

实验14　蛋白质定量测定（5）——BCA法 243

实验15 蛋白质定量测定（6）——紫外（UV）吸收法 246

实验16　蛋白质相对分子质量测定（1）——凝胶过滤层析法 250

实验17　蛋白质相对分子质量测定（2）——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 262

实验18　聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测定蛋白质等电点 271

实验19　蛋白质及多肽N-末端氨基酸残基测定——DNS-Cl法 278

实验20　蛋白质印迹法 286

实验21　血红蛋白脱辅基和重组 293

实验22　细胞色素c的制备和测定 297

实验23　凝胶层析法分离纯化含锌金属硫蛋白 310

实验24 固定化金属离子亲和层析 313

实验25　疏水层析分离金属结合蛋白 316

实验26　脂蛋白的分离——琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶电泳法 319

实验27　聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶（活性染色鉴定法） 323

实验28　谷胱甘肽转硫酶的制备及动力学研究 332

实验29 溶菌酶的制备及活性测定 340

实验30　超氧化物歧化酶的分离纯化 345

实验31　超氧化物歧化酶活性染色鉴定法 351

实验32　酯酶的分离、纯化与活性测定 354

实验33 亲和层析及离子交换层析法分离纯化乳酸脱氢酶及其同工酶 359

实验34　核酸定量测定（1）——定磷法 368

实验35　核酸定量测定（2）——紫外（UV）吸收法 373

实验36　猪脾脏DNA制备与二苯胺测定法 376

实验37 酵母RNA提取与地衣酚测定法 380

实验38　质粒DNA的微量制备（碱裂解法、煮沸裂解法） 384

实验39 质粒DNA限制性内切酶酶切及琼脂糖凝胶电泳 390

实验40　大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 397

实验41 聚合酶链式反应（PCR） 402

实验42　核酸原位杂交 407

实验43　免疫球蛋白的分离纯化 413

实验44　免疫学检测法 420

实验45　酶联免疫吸附测定法 434

附录 444

附录Ⅰ 实验室安全及防护知识 444

一、实验室安全知识 444

二、实验室灭火法 445

三、实验室急救 446

附录Ⅱ 试剂及试剂配制与保存 447

一、一般化学试剂的分级 447

二、试剂配制的一般注意事项 447

三、易变质及需要特殊方法保存的试剂 448

四、标准溶液的配制和标定 448

五、缓冲溶液 449

六、指示剂 457

七、干燥剂 458

附录Ⅲ　一些常用单位 459

一、长度单位 459

二、体积单位 459

三、质量单位 459

四、物质的量与物质的量浓度单位 460

附录Ⅳ 单位与浓度的表示及溶液浓度的调整 460

一、单位表示 460

二、溶液浓度的表示及其配制 461

三、溶液浓度的调整 462

一、实验误差 463

附录Ⅴ 实验误差与提高实验准确度的方法 463

二、误差来源 465

三、提高实验准确度的方法 466

四、准确度、精确度和误差的关系 467

附录Ⅵ 实验记录与实验报告 467

一、实验记录 467

二、实验报告 468

三、表格和图解 469

附录Ⅶ 常用数据表 470

一、元素的相对原子质量表 470

二、常用市售酸碱的浓度 472

三、一些常用化合物的溶解度（20℃） 472

四、一些常用做缓冲剂的化合物的酸解离常数 473

六、氨基酸的一些物理常数 474

五、某些有机溶剂的主要物理常数 474

七、常见氨基酸在不同溶剂系统中的Rf 476

八、嘌呤、嘧啶碱基、核苷和核苷酸的相对分子质量 477

九、某些蛋白质的物理性质 477

十、一些常见蛋白质相对分子质量参考值 478

十一、常用蛋白质相对分子质量标准参照物 479

十二、常见蛋白质等电点参考值 479

十三、硫酸铵饱和度的常用表 481

十四、离心机转数（r/min）与相对离心力（RCF）的换算 482

十五、常用化学物质相对分子质量表 483

一、常用离子交换纤维素 485

附录Ⅷ 层析法常用数据表及层析介质性质 485

二、常用国产离子交换树脂的某些物理化学性质表 486

三、各类常用离子交换树脂型号对照表 488

四、离子交换层析介质的技术数据 489

五、凝胶过滤层析介质的技术数据 490

六、聚丙烯酰胺凝胶的技术数据 492

七、琼脂糖凝胶的技术数据 492

八、疏水层析介质的技术数据 493

九、部分亲和层析介质的技术数据 494

十、各种凝胶所允许的最大操作压 495

附录Ⅸ 常用限制性内切酶酶切位点 496