学习情境1动物细胞培养的准备工作 1
任务一 动物细胞培养常用设备和器材的使用与保养 1
认知与解读 1
一、动物细胞培养实验室的设置 1
二、动物细胞培养常用设备 2
三、动物细胞培养常用器材 4
操作与体验 6
技能一 动物细胞培养常用设备的使用与维护 6
技能二 动物细胞培养常用器材的使用与维护 16
检查与评价 20
一、检查 20
二、评价 21
分析与思考 24
拓展与链接 24
一、动物细胞培养的发展简史 24
二、动物细胞培养的概念 26
任务二 动物细胞培养用品的清洗、包装和灭菌 27
认知与解读 27
一、培养用品的清洗 27
二、培养用品的包装 30
三、培养用品的消毒灭菌 31
操作与体验 32
技能一 清洗液的配制 32
技能二 动物细胞培养用品的清洗、包装和灭菌 33
检查与评价 38
一、检查 38
二、评价 39
分析与思考 41
拓展与链接 42
一、细胞培养的优缺点 42
二、细胞培养的基本要求 43
任务三 动物细胞培养液及培养用液的配制 44
认知与解读 44
一、平衡盐溶液 44
二、天然培养基 44
三、合成培养基 45
四、细胞消化液 47
五、pH调整液 47
六、抗生素溶液 48
七、无血清培养基 48
操作与体验 48
技能一 常用BSS液的配制 48
技能二 常用细胞消化液的配制 50
技能三 常用pH调整液的配制 51
技能四 常用抗生素溶液的配制 52
技能五 常用天然培养基的制备 53
技能六 常用合成培养基的配制 56
检查与 评价 58
一、检查 58
二、评价 59
分析与思考 61
拓展与链接 61
一、动物细胞体外培养的营养条件 61
二、动物细胞体外培养的环境条件 63
学习情境2动物细胞培养 65
任务一 动物细胞的取材与分离 65
认知与解读 65
一、原代细胞的取材 65
二、原代细胞的分离 66
操作与体验 68
技能一 机械分散法分离原代细胞 68
技能二 消化法分离原代细胞 69
技能三 细胞计数及活力测定 70
检查与评价 72
一、检查 72
二、评价 72
分析与思考 74
拓展与链接 75
一、培养操作基本要领和要求 75
二、其他组织的取材 77
任务二 动物细胞的原代培养 78
认知与解读 78
一、组织培养法 78
二、消化培养法 79
操作与体验 80
技能一 鸡胚成纤维细胞原代培养——组织培养法 80
技能二 鸡胚成纤维细胞原代培养——消化培养法 82
检查与评价 84
一、检查 84
二、评价 84
分析与思考 86
拓展与链接 87
一、小鼠胎儿细胞的原代培养 87
二、其他细胞的培养 89
任务三 动物细胞的传代培养 94
认知与解读 94
一、原代培养的首次传代 94
二、细胞传代方法 95
三、培养细胞的纯化 96
四、培养细胞的克隆化 96
操作与体验 97
技能一 鸡胚成纤维细胞的传代培养 97
技能二 培养细胞的纯化 99
技能三 培养细胞的克隆化 100
检查与评价 103
一、检查 103
二、评价 104
分析与思考 105
拓展与链接 106
一、传代细胞的建系和维持 106
二、培养细胞的其他纯化方法 107
任务四动物细胞的常规检查 108
认知与解读 108
一、培养细胞常规检查内容和方法 108
二、培养细胞的污染 109
操作与体验 111
技能一 细胞生长曲线的测定 111
技能二 检查培养细胞的常用手段 112
技能三 培养细胞的常规检查 115
技能四细胞活性检查 118
检查与评价 119
一、检查 119
二、评价 120
分析与思考 122
拓展与链接 123
一、培养细胞的生长类型和形态特征 123
二、培养细胞的生长特点 125
三、培养细胞的生长和增殖过程 127
学习情境3动物细胞的冷冻和复苏 130
任务一 动物细胞的冻存 130
认知与解读 130
一、细胞的冻存和复苏 130
二、细胞的运输 133
操作与体验 133
技能一 培养细胞的冻存 133
技能二 特殊培养细胞的冻存 135
检查与评价 136
一、检查 136
二、评价 136
分析与思考 139
拓展与链接 140
一、培养细胞冷冻保存概述 140
二、冷冻保存方法 141
任务二 动物冻存细胞的复苏 142
认知与解读 142
一、细胞复苏基本知识 142
二、细胞的常规复苏法 142
三、杂交瘤的复苏 142
操作与体验 142
技能一 冻存细胞的常规复苏技术 142
技能二 杂交瘤细胞的复苏技术 144
检查与评价 146
一、检查 146
二、评价 146
分析与思考 149
拓展与链接 150
一、细胞冻存的发展历史 150
二、细胞冻存的应用 150
三、细胞的运输 151
学习情境4病毒的细胞培养与鉴定 153
任务一 病毒的细胞培养 153
认知与解读 153
一、细胞培养用于病毒研究的优点 153
二、用细胞培养技术分离病毒 154
三、用细胞培养病毒基本条件 155
四、用细胞培养病毒时的注意事项 156
操作与体验 156
技能一 MDCK细胞分离流感病毒 156
技能二 人胚肾细胞分离脊髓灰质炎病毒 158
技能三 侵染病毒（病变）细胞的观察与判断 159
检查与评价 161
一、检查 161
二、评价 162
分析与思考 163
拓展与链接 164
一、病毒细胞培养的发展简史 164
二、病毒概述 164
任务二 病毒的鉴定技术 169
认知与解读 169
一、病毒蚀斑技术 169
二、病毒蚀斑抑制试验 171
三、细胞培养系统中的中和试验 171
四、用细胞培养法制备病毒血清学抗原应注意的问题 172
操作与体验 172
技能一 病毒的蚀斑鉴定技术 172
技能二 病毒蚀斑抑制试验 175
技能三 病毒的中和试验鉴定技术 176
检查与评价 178
一、检查 178
二、评价 178
分析与思考 180
拓展与链接 181
一、病毒毒价的测定 181
二、病毒毒价的测定（微量法） 182
学习情境5 单克隆抗体制备 184
任务一 动物免疫 184
认知与解读 184
一、抗原制备 184
二、免疫动物的选择 184
三、免疫程序的确定 184
四、抗体检测 185
操作与体验 185
技能一 小鼠捕捉、注射与采血技术 185
技能二 动物免疫技术 188
技能三 免疫小鼠血清效价测定技术 190
检查与评价 193
一、检查 193
二、评价 193
分析与思考 196
拓展与链接 197
一、单克隆抗体的概念 197
二、杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本原理 198
三、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要过程 198
四、各种免疫方法的比较 198
任务二 细胞融合及杂交瘤细胞的筛选 199
认知与解读 199
一、骨髓瘤细胞 199
二、饲养细胞 200
三、脾细胞 200
四、细胞融合 201
五、杂交瘤细胞的培养、观察与筛选 201
操作与体验 203
技能一 细胞融合主要试剂的配制 203
技能二 骨髓瘤细胞悬液的制备 205
技能三 饲养细胞的制备 205
技能四 免疫脾细胞悬液的制备 207
技能五 细胞融合 208
技能六 融合后混合细胞的培养及杂交瘤细胞的筛选与观察 210
检查与评价 212
一、检查 212
二、评价 212
分析与思考 214
拓展与链接 215
一、细胞融合 215
二、融合细胞的早期观察及其异常结果分析 219
任务三 单克隆抗体的筛选与检测 220
认知与解读 220
一、概述 220
二、酶联免疫技术（ELISA） 221
操作与体验 224
技能一 可溶性抗原的ELISA间接法筛选杂交瘤阳性克隆 224
检查与评价 226
一、检查 226
二、评价 226
分析与思考 229
拓展与链接 229
其他常用的抗体检测方法 229
任务四杂交瘤细胞克隆化 233
认知与解读 233
一、杂交瘤克隆化概述 233
二、杂交瘤克隆化的方法 234
操作与体验 235
技能一 有限稀释法克隆化杂交瘤细胞 235
技能二 软琼脂法克隆化杂交瘤细胞 236
检查与评价 237
一、检查 237
二、评价 238
分析与思考 239
拓展与链接 240
杂交瘤细胞的冻存与复苏（详参情境三） 240
任务五单克隆抗体的大量制备与鉴定 241
认知与解读 241
一、单克隆抗体的大规模制备 241
二、单克隆抗体的纯化 243
三、单抗特性的鉴定 244
操作与体验 245
技能一 动物体内大量生产单克隆抗体 245
技能二 单克隆抗体的初步纯化 246
技能三 单克隆抗体的鉴定 248
检查与评价 250
一、检查 250
二、评价 251
分析与思考 253
拓展与链接 254
一、单抗的标记 254
二、单克隆抗体生产的影响因素、失败原因分析 257
附录 259
附录一 259
附录二 260
附录三 261
附录四 262
参考文献 263