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第一章 抗原与抗体反应的基本原理 1

第一节 抗原与抗体 1

一、抗原与抗体 2

二、抗原抗体反应 3

三、抗原与抗体检测的临床意义 4

第二节 体外抗原抗体反应 8

一、靶抗原 8

二、抗体 10

三、抗原与抗体结合的条件 12

四、抗原与抗体结合的影响因素 13

五、免疫测定中抗原与抗体的反应 15

六、免疫测定中抗原与抗体反应的特点 16

第二章 免疫测定的靶物质及其制备 18

第一节 免疫测定的靶物质 18

一、生物大分子 18

二、小分子 21

三、免疫复合物 21

四、免疫活性细胞 21

第二节 抗原制备 21

一、颗粒性抗原的制备 22

二、可溶性抗原 22

三、半抗原 26

四、人工抗原 26

五、基因工程抗原 27

第三节 抗体制备 28

一、免疫佐剂 28

二、多克隆抗体 30

三、单克隆抗体 33

四、基因工程抗体 37

第四节 免疫原与抗体制备的常见问题 41

一、免疫原制备的常见问题 41

二、抗体制备中的常见问题 43

第三章 免疫测定标记物 47

第一节 放射免疫测定125I标记物 47

一、常用125I标记方法 48

二、抗原和抗体125I标记物的鉴定 49

三、抗原和抗体125I标记物的纯化 50

第二节 酶免疫测定标记物 51

一、常用酶试剂 51

二、酶标记物的制备 52

三、酶免疫测定标记物相关试剂组分的选择 53

第三节 化学发光免疫测定标记物 57

一、化学发光标记物 58

二、化学发光标记物的制备 59

第四节 荧光免疫测定标记物 60

一、有机荧光染料 61

二、稀土荧光标记材料 64

三、量子点荧光纳米材料 67

第五节 胶体金免疫测定标记物 69

一、胶体金的制备 69

二、胶体金标记蛋白质 70

三、胶体金标记物的纯化与保存 71

第四章 免疫测定试剂的制备 73

第一节 需求分析 73

一、免疫测定试剂的应用领域 73

二、制备怎样的免疫测定试剂 74

第二节 免疫测定方法的选择 76

一、常见的免疫分析方法 76

二、选择分析方法时需要注意的问题 77

第三节 关键原材料的筛选与检测方法的建立 78

一、信号检测系统的选择 79

二、抗原检测方法的建立与原料的筛选 80

三、抗体检测方法的建立与原料的筛选 82

第四节 关键辅助材料的选择 84

一、固相载体的选择 84

二、生物活性组分的特点和质量要求 89

第五节 反应体系的优化 91

一、样本 91

二、反应温度与反应时间 93

三、反应液配方 93

四、临界值的确定 95

五、反应步骤与放大系统 97

第六节 质控物与校准物的制备 98

一、免疫测定的基质效应 98

二、参考物质与参考方法 99

三、溯源途径 100

四、制备过程 103

第五章 试剂性能参数的确定 108

第一节 定性试剂性能参数的确定 108

一、敏感性 108

二、特异性 109

三、精密度 111

四、关于试剂稳定性与有效期的考量 114

第二节 定量试剂性能参数的确定 116

一、空白限 116

二、检测限 117

三、定量限 118

四、线性范围 118

五、准确度 120

六、精密度 122

七、检测范围 123

八、干扰物质 124

九、交叉反应 125

十、参考值与参考区间 126

十一、稳定性与有效期 127

第三节 校准物与质控物性能参数的确定 129

一、校准物 129

二、质控物 130

第六章 常用的免疫测定技术 132

第一节 免疫测定技术的基本分类 133

一、均相免疫测定和非均相免疫测定 134

二、直接测定和间接测定 134

三、免疫测定放大技术 135

四、POCT免疫测定技术 135

第二节 均相免疫测定技术 136

一、凝集反应 137

二、沉淀反应 139

三、荧光偏振免疫测定 145

四、酶增强免疫测定 148

五、克隆酶供体免疫测定 149

六、光激化学发光免疫测定 150

第三节 非均相免疫测定技术 151

一、非均相免疫测定的分离技术 151

二、放射免疫和免疫放射技术 152

三、酶联免疫吸附试验 154

四、荧光免疫测定 158

五、化学发光免疫测定 160

六、固相膜免疫测定 163

第四节 免疫测定的自动化 166

一、进样自动化 167

二、反应自动化 168

三、结果读取自动化 169

四、基于规则的自动追加检测 171

第五节 免疫测定技术的相关问题 172

一、钩状效应 172

二、单克隆抗体与多克隆抗体的应用 173

三、多点定标与专家定标 174

四、透射免疫比浊与散射免疫比浊的应用 175

第七章 免疫测定的质量保证 178

第一节 检测系统的选择 178

一、确定临床需求 178

二、选择检测系统 178

第二节 质量规范的建立 179

一、依据质量目标对临床后果的影响建立质量规范 179

二、依据被测量生物学变异建立质量规范 179

三、依据当前技术水平建立质量规范 180

第三节 检测系统的性能验证 180

一、性能验证的基本要求 181

二、定量检测系统的性能验证 181

三、定性检测系统的性能验证 184

第四节 检验前过程的质量控制 186

一、检验项目申请 186

二、合理选择检验项目 187

三、病人准备 187

四、样本的采集、运送与保存 187

五、免疫学检测的干扰因素 187

第五节 检验过程的质量控制 189

一、定量检测的室内质量控制 190

二、定性检测的室内质量控制 195

三、室内质量控制结果的处理 197

四、室间质量评价 199

五、其他因素的质量控制 201

第六节 检验后过程的质量控制 201

一、检验结果的确认、审核与发放 201

二、检验结果的解读 202

第八章 免疫测定相关技术 205

第一节 免疫组织化学与免疫细胞化学 205

一、免疫组织化学 205

二、组织芯片 207

第二节 免疫测定的衍生技术 208

一、免疫沉淀与免疫共沉淀 209

二、免疫PCR 210

三、酶联免疫斑点试验 211

第三节 基于免疫反应的细胞分离技术 212

一、免疫磁珠分选术 212

二、流式细胞分选术 215

第四节 高通量免疫检测技术 216

一、固相免疫芯片 216

二、液相蛋白芯片 217

三、免疫组库 218

第五节 单克隆抗体免疫治疗 220

一、针对信号传导途径关键蛋白质的单抗免疫治疗 220

二、针对肿瘤免疫检查点和免疫检查点抑制的单抗免疫治疗 221

第六节 免疫传感器 222

一、免疫传感器基本原理 222

二、免疫传感器技术的特点与应用 224

第七节 微流控免疫测定技术 225

一、微流控芯片基本原理 226

二、微流控技术的特点与应用 227

参考文献 229