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引言 1

第1章 形态学制片种类 3

一、非切片制作方法 3

二、组织切片制作方法 8

第2章 组织学石蜡切片制作技术 9

第1节 标本取材 9

一、实验动物的处死方法 10

二、不同组织器官的取材方法 13

三、取材注意事项 15

附：大鼠胸、腹腔脏器的取材方法 16

第2节 标本固定 21

一、固定的目的和作用 21

二、固定的方式 22

三、影响固定作用的因素 27

四、固定后的标本修整 33

五、固定后的标本冲洗 33

六、固定容器 35

七、常用固定剂的性质及应用 36

第3节 标本处理过程：脱水、透明、浸蜡、包埋 48

一、脱水 48

二、透明 51

三、浸蜡 53

四、包埋 55

第4节 石蜡切片 60

一、石蜡切片机与切片刀 60

二、石蜡切片技术 68

第5节 染色与染料 83

一、染色与生物染料 83

二、染色作用的原理 87

三、染色方法 88

四、媒染剂和促染剂 91

五、染色形式 93

第6节 苏木精-伊红染色 94

一、苏木精 94

二、伊红 100

三、石蜡切片苏木精-伊红染色 102

第7节 封固 111

一、封固的目的 111

二、封固剂种类 111

三、封固剂的折光率 113

四、常规石蜡切片封固方法 114

第3章 特殊染色技术 119

第1节 胶原纤维染色 121

一、形态结构与特点 121

二、胶原纤维染色 121

三、磷钼酸和（或）磷钨酸在染色中的作用 127

四、影响结缔组织三色染色的因素 127

附：苦味酸-天狼猩红染色显示胶原纤维 129

第2节 弹性纤维染色 130

一、形态结构与特点 130

二、弹性纤维染色 130

第3节 网状纤维染色 138

一、形态结构与特点 138

二、网状纤维铵银技术的基本步骤与作用 139

三、常用的铵银方法 141

四、网状纤维铵银方法的基本要求 146

第4节 肥大细胞染色 147

一、形态结构与特点 147

二、肥大细胞染色 148

三、异染性 150

第5节 胰岛细胞染色 151

一、胰岛细胞形态特点 151

二、胰岛细胞染色 152

第6节 糖原染色 157

一、显示糖原的高碘酸-雪夫（PAS）反应 157

二、Best卡红染色显示肝糖原 162

第7节 细胞内DNA和RNA染色 163

一、Feulgen反应显示DNA 163

二、甲绿-派若宁染色显示DNA和RNA 166

第8节 肌组织染色 168

一、Heidenhain铁苏木精染色 168

二、Mallory磷钨酸-苏木精（PTAH）染色 170

第9节 神经元（细胞）尼氏体染色 171

一、焦油紫染色 171

二、甲苯胺蓝染色 173

三、硫堇染色 174

四、Luxol坚牢蓝-焦油紫染色 174

第4章 免疫组织（细胞）化学技术 176

第1节 免疫组织（细胞）化学相关的基本概念 177

一、抗原 177

二、抗体 178

第2节 免疫组织（细胞）化学基本类型与原理 183

一、免疫组织（细胞）化学直接法 183

二、免疫组织（细胞）化学间接法 184

三、非标记抗体法 186

四、抗生物素-生物素法 188

第3节 免疫组织（细胞）化学技术的种类 191

第4节 免疫组织（细胞）化学技术的基本过程 192

第5节 免疫组织（细胞）化学石蜡切片的有关基本技术 192

一、用于免疫组织（细胞）化学的标本取材 193

二、用于免疫组织（细胞）化学的标本固定 194

三、用于免疫组织（细胞）化学的标本处理过程：脱水、透明、浸蜡、包埋 197

四、用于免疫组织（细胞）化学石蜡切片的制作 198

五、常用的免疫组织（细胞）化学方法 201

六、免疫组织（细胞）化学染色主要步骤及注意事项 205

七、血清封闭排除非特异性着色 213

八、减少或消除内源性生物素 213

九、抗体 214

十、显色 217

十一、检测系统 221

十二、免疫组织（细胞）化学复染 221

十三、孵育盒的作用 222

十四、封固剂的使用 223

十五、免疫组织（细胞）化学结果与非特异染色的控制 223

十六、常见的免疫组织（细胞）化学问题 227

第6节 双重免疫组织（细胞）化学技术 229

一、双重免疫标记染色种类 229

二、常用的双重免疫标记配伍类型 230

三、双重免疫组织（细胞）化学的基本种类 231

四、常用的双重免疫组织（细胞）化学染色方法 231

五、消除双重免疫组织（细胞）化学染色间抗体系统的交叉反应 236

附：常用的酸性溶液洗脱方法与应用 238

六、双重免疫组织（细胞）化学注意事项 239

第5章 原位核酸分子杂交 243

第1节 原位核酸分子杂交的基础知识 243

一、核酸的化学组成 243

二、DNA和RNA 244

三、DNA变性与复性 244

第2节 原位分子杂交的基本原理 246

一、基本原理 246

二、探针类型与制备 247

三、探针标记物与探针标记方法 249

第3节 原位核酸分子杂交技术的基本步骤与原理 251

一、杂交前准备 251

二、杂交预处理 253

三、杂交反应 254

四、杂交后处理 258

五、杂交体的检测 258

第4节 对照实验和实验中的问题与对策 259

一、对照实验 259

二、实验中的问题与对策 259

第6章 形态学技术实验指导 262

实验1 标本取材与固定 262

实验2 标本的处理：脱水、透明、浸蜡、包埋 263

实验3 石蜡切片 265

实验4 苏木精-伊红（HE）染色 267

实验5 胶原纤维染色和弹性纤维染色 268

实验6 细胞染色 270

实验7 网状纤维铵银技术 271

实验8 PAS反应及Schiff试剂配制 272

实验9 肌组织染色 273

实验10 尼氏体染色 275

实验11 免疫组织（细胞）化学染色 276

实验12 免疫组织（细胞）化学双重染色 277

实验13 免疫组织（细胞）化学染色与特殊染色 278

第7章 附录 281

附录1 常用试剂的配制 281

附录2 玻璃制品的清洁 284

附录3 常用染料的中英文名称 286

附录4 石蜡切片评估标准及计分 288

附录5 动物常用麻醉剂的用法和剂量 289

附录6 生物染料的分类—根据染色对象分类 291

附录7 石蜡切片操作所遇到的常见问题 292

附录8 苏木精-伊红染色技术流程 294